树突状细胞在小儿哮喘免疫发病机制中的作用研究

发布时间：2020-04-18 17:27

【摘要】： 支气管哮喘（bronchial asthma）是临床常见的危害颇大的慢性疾病。哮喘的发病率呈逐年上升趋势，且其发病机制至今仍不明确。近年研究发现支气管哮喘最重要的免疫学异常是TH1/TH2细胞比例和功能的失衡。而树突状细胞（dendritic cells, DC）是抗原递呈功能最强的抗原递呈细胞（Antigen presenting cells, APC），是目前发现的唯一能激活初始型T细胞（Na?ve T cells）的APC，其在诱导TH1/TH2型细胞反应的平衡和偏移过程中起关键作用。为探讨小儿哮喘时DC在诱导TH1/TH2细胞分化中的作用及关系，本研究通过粒-巨噬细胞集落刺激因子（Granulocyte-macrophage colony stimulating factor，GM-CSF），白细胞介素4（Interleukin-4，IL-4）和肿瘤坏死因子(（Tumor necrosis factor-(，TNF-(）联合体外培养诱导哮喘患儿外周血单个核细胞（Peripherial blood mononuclear cells ，PBMC）发育为DC，并观察其形态学变化，流式细胞仪对其进行细胞表面分子鉴定，以及检测其分泌的IL-10、IL-12、IL-18和前列腺素E2（PGE2） 等细胞因子水平和DC的免疫诱导功能，为进一步探讨DC在小儿哮喘免疫发病机制及防治中的作用提供新的思路。主要结果及结论如下： 1．外周血PBMC中粘附细胞在培养12小时后，可见粘附细胞呈圆形。培养3天后观察到胞体出现树突状突起。第4天后，，细胞大多呈悬浮生长，为典型DC外形，贴壁细胞开始均呈集落样生长。培养7天后，培养细胞均匀分散在培养基中。至培养第8天时细胞呈DC外形 WP=10 并继续增殖。 2．哮喘及健康对照组儿童外周血PBMC诱导的DC均表达DC相关分化抗原：CD_{1a}、CD_{40}、CD_{80}、CD_{83}、CD_{86}和HLA-DR，同时不具备其它细胞的分化抗原如CD_{14}、CD_{16}、CD_{19}等，哮喘组CD_{86}和HLA-DR较健康对照组均有明显升高；而CD_{40}较健康对照组有明显降低。其余CD分化抗原在两组儿童之间比较无明显差异。 3．哮喘患儿及健康对照组儿童DC均能刺激自体T淋巴细胞、健康同种异体T淋巴细胞和健康同种脐带血初始T淋巴细胞强烈增殖。随刺激细胞数目的增加其促增殖作用增强。 4．哮喘患儿血浆及DC分泌的IL-10、IL-12水平均显著降低，与对照组比较差异显著；哮喘患儿血浆IL-18水平明显升高，而DC分泌的IL-18水平显著降低，与对照组比较差异显著；哮喘患儿血浆及DC分泌的PGE2水平均显著升高，与对照组比较差异显著。 5．哮喘患儿血浆和DC分泌的IL12与PGE2存在明显负相关；而与CD86等相关不显著。 综上，从以上1、2和3点充分说明我们成功的培养出了DC细胞。哮喘患儿可通过其DC表面差异表达CD_{40}、CD_{86}和HLA-DR等协同刺激分子，从而使其激发T淋巴细胞的作用增强。哮喘时血浆及DC分泌的IL-10、IL-12水平均显著降低，血浆IL-18水平升高，DC分泌的IL-18水平降低以及血浆及DC分泌的PGE2水平均明显升高。导致哮喘时TH1/TH2偏移，使TH2型反应亢进，TH1型反应不足，造成气道慢性变态反应性炎症，气道高反应性而致哮喘发作。本研究为小儿哮喘免疫发病机制的研究提供了新的途径，也为小儿哮喘的防治指出了新的方向。
【图文】：

培养第4天的外周血树突状细胞形态学变化

培养第8天的哮喘患儿外周血DCs形态学变化
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2003
【分类号】：R725.6

【参考文献】

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本文编号：2632339