紫癜性肾炎白细胞介素-8基因表达及基因多态性研究

发布时间：2020-04-19 02:29

【摘要】： 过敏性紫癜(HSP)是以坏死性小血炎为主要病理改变的全身性疾病。紫癜性肾炎(HSPN)是继发于HSP的肾脏损害,为儿童常见的继发性肾小球疾病之一。近年来有研究表明,HSPN所致的血管炎中有很多细胞因子的参与,其中白细胞介素-8(IL-8)的作用较为明显,它是一种中性粒细胞趋化因子,参与免疫复合物介导的血管炎的病理过程,与HSPN的临床表现密切相关;IL-8基因依据其3'端2767位点单核苷酸多态性,而在人群中表现为AA型、GG型和GA型, IL-8的基因多态性现象与HSPN患者的易感性密切相关。为进一步阐明HSPN与IL-8的关系,本课题研究HSPN患儿外周血中IL-8的表达,并进行相关的基因多态性检测,分析其表达、基因多态性与HSPN的关系,从而评估IL-8在HSPN发病过程中的影响和作用。 对象与方法 1.选择HSPN急性期患儿42例,随访的HSPN恢复期患儿28例,对照组20例,来自健康体检儿童。 2.对急性期组42例、恢复期组28例及对照组患儿20例采用Real-Time PCR的方法测定IL-8的CT值,并计算出Delter delter CT值,以数学公式定量计算RNA表达水平。 3.对患病组患儿68例(包括急性期组和恢复期组患儿)及对照组患儿20例采用Pyrosequencing(焦磷酸测序)法对IL-8基因多态性分析。 结果 1.外周血中IL-8中RNA表达的平均定量结果为:42例急性期病例组患儿为2-(3.5079±1.14947), 28例恢复期组为2-(5.9782±0.81948),20例对照组为2-(7.3095±0.67266)。急性期患儿外周血中IL-8的RNA表达水平明显高于恢复期组及健康对照组,而恢复期组与急性期病例组比较,外周血IL-8的RNA表达的平均定量水平虽有明显的降低,但仍然高于对照组。经过方差分析,两两比较有统计学意义上的显著性差异(P0.05)。 2.68例患病组(急性期组和恢复期组)中,纯合子41例(60.3%),其中AA型9例(13.2%),GG型32例(47.1%),杂合子(GA型)27例(39.7%),20例健康对照组中纯合子5例(25.0%),其中AA型2例(10.0%),GG型3例(15.0%),杂合子(GA型)15例(75.0%)。患病组中纯合子分布的频率明显高于对照组,经检验,P值0.05。提示IL-8纯合子基因型的患儿对于紫癜性肾炎更易感。对比患病组及对照组中的IL-8基因纯合子(AA/GG)出现频率,经检验,并经Fisher's精确检验校正,P值0.05。即纯合子中GG出现的频率又高出AA出现的频率,并表现出统计学上的明显差异。提示在我国紫癜性肾炎患儿中,纯合子相对易感,其中尤以GG型者为甚。并且样本分布符合Hardy-Weiberg平衡。 结论 IL-8参与了紫癜性肾炎的发病及病理过程,并可能与其临床表现相关;IL-8基因型纯合子(AA/GG),尤其是GG型,出现频率的增高将使过敏性紫癜更易进展为紫癜性肾炎。IL-8的基因多态性在紫癜性肾炎发病过程中起显著作用,提示紫癜性肾炎的发病很可能与其基因背景有关。
【图文】：

RNA逆转录cDNA后Real-TimePCR电泳验证图

IL-8RNA逆转录cDNA后PCR扩增图（多孔）
【学位授予单位】：上海交通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R726.9

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本文编号：2632823