Cx43基因对小鼠近端流出道隔心肌化过程的调控机制研究

发布时间：2020-04-29 00:42

【摘要】：锥干部畸形是常见的复杂性先天性心脏病(先心病),是导致儿童死亡的主要原因之一。近端流出道对锥干部的发育起着至关重要的作用。近端流出道隔是指半月瓣水平及瓣下的流出道分隔,此隔起初是由心内膜嵴形成的一个间充质形式的垫组织。在心脏发育过程中,近端流出道隔的间质成分被心肌成分取代,此过程称为“心肌化”。心肌化过程是流出道发育过程中的一个重要事件,心肌化障碍可导致流出道的结构和功能异常,因此阐明流出道隔心肌化的形成过程将有助于进一步揭示流出道畸形的发病机制。一些参与或影响心肌化过程的可能的细胞和分子机制被相继提出,其中心脏神经嵴细胞、细胞凋亡和转化生长因子(transforming growth factor, TGF)β2逐渐引起人们的注意。近年来人们还发现间隙连接蛋白(Conecxin, Cx)43与胚胎心脏锥干部的发育密切相关。Cx43缺失和过表达模型均显示了右室流出道畸形和梗阻,并且心脏神经嵴细胞可能参与了其发病机制。因此,本课题利用Cx43基因敲除(knockout, KO)小鼠模型,旨在研究Cx43在心肌化过程中的作用及其可能的机制;进一步揭示Cx43KO小鼠锥干部畸形的发病机制。第一部分正常小鼠心脏流出道隔的心肌化过程研究研究目的探讨心脏近端流出道隔心肌化过程的时空规律以及心脏神经嵴细胞、细胞凋亡在这一过程中的可能作用。材料与方法成年2月龄C57/BL6小鼠交配,选用胎龄(embryonic day, E)11.5天(day, d)至出生后1d小鼠为研究对象。采用免疫组化法测定横纹肌肌动蛋白α-SCA(α-Sarcomeric Actin),神经嵴细胞的标志物AP-2α(Activator protein-2a),凋亡相关分子Active Caspase-3的表达;采用TUNEL(terminal deoxylnucleotidyl transferase mediated-dUTP nick end labeling)法原位检测细胞的凋亡程度。
【图文】：

近端,心内膜垫

以上结果可以看出:近端流出道心内膜垫于Ell.5开始融合，E13.5完成融合;心肌化从E12.5开始，至E15.5完成。整个心肌化过程呈现心肌从流出道隔由外向内的内向性生长趋势。(图1一)l二、近端流出道隔AP一Za的表达Ell.5几乎无AP一2a表达;E12.5、E13.5可见少量表达，分别位于近端流出道心内膜垫近融合处及散在于侧翼心肌内;E1.45以后消失。(图1一2)三、近端流出道隔AcvtieCaspas-e3的表达ActiveCaspase一3阳性细胞集中出现在E12.5和E13.5的近端流出道隔，尤其以E13.5为著。E15.5以后极少出现。因此近端流出道隔的凋亡主要发生于E13.5。(图l一3)四、Tt」NEL法检测近端流出道隔细胞凋亡E12.5和E13.5近端流出道心内膜垫近融合处散在多量凋亡细胞，以E13.5为著。E巧.5以后极少。与ActiveCasPaes一3检测凋亡的结果相吻合。(图1一4)

近端,心脏,心内膜垫,融合趋势

汗第一部分图:图1一1近端流出道隔。一CA的表达注:A为心脏冠状面，，日一F为横断面。近端流出道心内膜垫组织于Ell.5(A)开始有融合趋势，E，3.5(C)基本完成融合;从E，2.5(B)开始，。一SCA阳性细胞表现出从近端流出道隔外侧向间质性心内膜垫内生长趋势，E，.35及E14.5(O
【学位授予单位】：复旦大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2005
【分类号】：R725.4

【引证文献】