黄芪注射液对急性期川崎病外周血单个核细胞核转录因子表达干预的研究

发布时间：2020-05-12 22:11

【摘要】： 目的:探讨黄芪注射液对小儿急性期川崎病(KD)外周血单个核细胞(PBMC)核转录因子(NF-κB)活化的影响和对炎症细胞因子TNF-α表达的效用。 方法:采用Ficoll密度梯度离心法常规分离各受试对象的外周静脉血,获得PBMC,将其分编为五组:①空白组(自然培养),②PMA培养组(只加入终浓度为20nmol/L的NF-κB激动剂PMA),③PMA(终浓度20nmol/L)+黄芪注射液(终浓度25mg/ml)培养组,④PMA(终浓度20nmol/L)+黄芪注射液(终浓度50mg/ml)培养组,⑤PMA(终浓度20nmol/L)+黄芪注射液(终浓度100mg/ml)培养组,在37℃、5%CO2及相对湿度为95%的培养箱内进行培养。免疫细胞化学方法观察培养后各组PBMC内NF-κB的活化水平;酶联免疫吸附实验(ELISA)双抗体夹心法测定培养后上清液中TNF-α的表达含量。 结果:(1)在自然培养下,正常对照(Normal)组和KD组PBMC中均可出现一定量的NF-κB活化,其培养上清液中也有TNF-α的表达,KD组显著高于Normal组,差异有统计学意义(P = 0.000);(2)加入PMA刺激培养后,两组PBMC中NF-κB阳性细胞百分比均显著升高,同时培养上清液中TNF-α的表达量也明显升高,KD组仍明显高于Normal组,差异有统计学意义(P = 0.000);与自然培养组比较差异也有统计学意义(P = 0.000);(3)分别加入不同浓度的黄芪注射液(25mg/ml、50mg/ml、100mg/ml)后,可以观察到对PMA刺激的PBMC中NF-κB活化细胞百分比明显降低,相应的PBMC培养上清液中TNF-α的表达量也随之降低,但KD组仍然高于Normal组,差异有统计学意义(P = 0.000);与PMA组比较有统计学意义(P = 0.000);与自然培养组相比差异无统计学意义(P0.05);(4)三组不同浓度的黄芪注射液随着剂量的增大,数据似乎有减小的趋势,但其差异无统计学意义(P0.05);(5)NF-κB活化的阳性细胞百分比与TNF-α的表达含量呈正的直线相关(r =0.601,P = 0.005)。 结论:黄芪注射液在KD急性期的主要抗炎作用机制是抑制了NF-κB的活化,同时也抑制了炎症细胞因子TNF-α的表达。
【图文】：

图 1：阳性对照，霍奇金淋巴瘤（×400）图 2：阴性对照，KD 患儿 PBMC 涂片，一抗为 PBS（×400）图 3：KD 患儿 PBMC 涂片，自然培养组（×400）图 4：KD 患儿 PBMC 涂片，PMA 组（×400）

图 1：阳性对照，，霍奇金淋巴瘤（×400）图 2：阴性对照，KD 患儿 PBMC 涂片，一抗为 PBS（×400）图 3：KD 患儿 PBMC 涂片，自然培养组（×400）图 4：KD 患儿 PBMC 涂片，PMA 组（×400）
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R272

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本文编号：2660915