【摘要】：目的：研究川崎病(KD)患儿急性期、恢复期血清基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)及一氧化氮(NO)的表达水平,并探讨KD急性期血清MMP-2、MMP-3、TIMP-1、TIMP-2与NO的相关性分析的研究,探讨其表达在KD冠脉损害中的作用,从而为预防冠脉损害提供理论依据。 方法：1.标本采集：(1)研究组：30例川崎病患儿,冠脉损害组(CAL)15例,冠脉正常组(NCAL)15例,分别收集急性期(静注IVIG前,病程第1-2周)、恢复期(静注IVIG后,病程第3-4周)外周血制备血清。(2)对照组：分别抽取30例年龄相仿的发热患儿(发热对照组,F组)和30例年龄相仿的正常健康儿童(正常对照组,C组)外周血制备血清。 2.指标检测：用固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)测定各组患儿血清中MMP-2、MMP-3、TIMP-1、TIMP-2的水平,用硝酸还原法检测各组患儿血清中N0的水平。 3.统计学处理：采用SPSS17.0进行统计学分析,数据以均数加减标准差(X±S)表示。方差齐用t检验,方差不齐用t’检验；MMP-2 /TIMP-2、MMP-3/TIMP-1比值用秩和检验。血清MMPs、TIMPs等与NO的相关分析采用Pearson法,检验水准为0.05(双侧),P0.05为差异有统计学意义。 结果：1.MMP-2.TIMP-2.MMP-2/TIMP-2(1)川崎病CAL组MMP-2水平(480.75±9.82μg/L)高于NCAL组(450.06±4.38μg/L),差异有统计学意义(P0.05)；川崎病CAL组血清TIMP-2(393.61±3.89μg/L).MMP-2/TIMP-2(1.57±0.21)水平与NCAL组TIMP-2(376.30±11.28μg/L). MMP-2/TIMP-2(1.29±0.14)相比较明显升高,差异有极显著意义(P均0.01)。(2)KD急性期血清MMP-2(465.40±17.31μg/L). TIMP-2(384.95±12.09μg/L).MMP-2/TIMP-2(1.71±0.16)水平与发热对照组MMP-2(311.26±15.81μg/L).TIMP-2(264.05±12.35μg/L).MMP-2/TIMP-2(1.05±0.19)和正常对照组MMP-2 (295.02±18.18μg/L).TIMP-2(253.46±15.41μg/L) MMP-2/TIMP-2(0.94±0.12)相比明显升高(P均0.01)。(3)KD恢复期血清MMP-2(422.51±16.13μg/L).TIMP-2(338.83±14.93μg/L)与发热对照组MMP-2(311.26±15.81μg/L).TIMP-2 (264.05±12.35μg/L).正常对照组MMP-2(295.02±18.18μg/L).TIMP-2(253.46±15.41μg/L)相比明显升高(P均0.01),KD恢复期MMP-2/TIMP-2(1.29±0.12)与发热对照组(1.05±0.19)和正常对照组(0.94±0.12)相比较明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。(4)KD急性期血清MMP-2水平(465.40±17.31μg/L)与恢复期(422.51±16.13μg/L)相比较明显升高(P0.05)TIMP-2(384.95±12.09μg/L).MMP-2/TIMP-2(1.71±0.16)水平与恢复期TIMP-2(338.83±14.93μg/L).MMP-2/TIMP-2(1.29±0.12)相比明显升高,差异有统计学意义(P0.01)。(5)发热对照组MMP-2(311.26±15.81μg/L).TIMP-2(264.05±12.35μg/L).MMP-2/TIMP-2(1.05±0.19)和正常对照组MMP-2(295.02±18.18μg/L).TIMP-2(253.46±15.41μg/L).MMP-2 /TIMP-2(0.94±0.12)相比较,无统计学意义(P0.05)。 2.MMP-3.TIMP-1.MMP-3/TIMP-1(1)川崎病CAL组血清MMP-3(58.38±9.43μg/L)和NCAL组血清水平(33.78±3.34μg/L)相比明显升高,差异有极显著意义(P0.01)；血清TIMP-1水平(298.37±61.45μg/L)水平较NCAL组(357.16±.22.79μg/L)明显降低,差异有极显著意义(P0.01)；血清MMP-3/TIMP-1(0.45±0.15)和NCAL组(0.08±0.02)相比较明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。(2)KD急性期MMP-3(46.07±14.31μg/L).MMP-3／TIMP-1(0.14±0.06).恢复期血清MMP-3 (32.41±7.48μg/L).MMP-3／TIMP-1(0.13±0.09)水平与发热对照组MMP-3(31.96±4.11μg/L).MMP-3/TIMP-1(0.15±0.04)和正常对照组MMP-3(10.51±0.45μg/L).MMP-3/TIMP-1(0.12±0.02)相比较均明显升高(P均0.01)。(3)KD急性期TIMP-1水平(328.93±45.17μg/L)、KD'恢复期TIMP-1水平(281.61±39.42μg/L)与发热对照组(247.64±16.73μg/L)和正常对照组(94.63±3.60μg/L)相比较,明显升高,差异有统计学意义(P均0.01)；而KD急性期TIMP-1水平(328.93±45.17μg/L)与KD恢复期TIMP-1 (281.61±39.42μg/L)相比较,差异没有统计学意义(P0.05)。(4)发热对照组MMP-3(31.96±4.11μg/L).TIMP-1(247.64±16.73μg/L)与正常对照组MMP-3(10.51±0.45μg/L).TIMP-1 (94.63±3.60μg/L)相比；差异有统计学意义(P0.01)；而发热对照组MMP-3／TIMP-1(0.15±0.04)和正常对照组MMP-3/ TIMP-1(0.12±0.02)相比较,差异没有统计学意义(P0.05)。 3. NO(1)川崎病CAL组NO水平(176±22μmol/L)明显高于NCAL组(97±14μmol/L),差异有统计学意义(P0.05)。(2)KD急性期NO水平(137±44μmol/L)、恢复期(73±23μmol/L)与发热对照组(44±11μmol/L).正常对照组(41±11μmol/L)相比较,明显升高,差异有统计学意义(P均0.01)。(3)KD急性期N0水平(137±44μmol/L)与恢复期(73±23μmol/L)相比较,明显升高,差异有统计学意义(P0.01)。(4)发热对照组NO水平(44±11μmol/L)和正常对照组(41±11μmol/L)相比较没有显著差异(P0.05)。 4.MMPs.TIMPs与NO的相关性分析：(1)血清MMP-2、MMP-3与NO之间呈显著正相关(r=0.895,P0.01；r=0.898,P0.01)。(2)血清中TIMP-2.TIMP-1与NO之间呈显著负相关(r=-0.382,P0.05；r=-0.772,P0.01) 结论：1.KD冠脉损害组患儿血清MMP-2.T IMP-2.MMP-2/TIMP-2的水平明显高于KD冠脉正常组,提示血清中MMP-2.TIMP-2.MMP-2/ TIMP-2可以做为川崎病冠脉损害的一个危险因素,在KD血管壁的损伤以及冠状动脉瘤的形成中起着重要作用,KD急性期过后可能仍存在有MMP-2,TIMP-2升高,表明KD可能存在持久的冠状动脉损伤,因而对KD患儿需长期监测血管损害情况。 2.川崎病CAL组血清MMP-3和NCAL组相比明显升高,提示MMP-3很可能参与了血管壁的损伤过程；可以做为预测与早期诊断CAL的客观生化指标。KD急性期MMP-3.TIMP-1.MMP-3/TIMP-1水平明显高于恢复期和对照组；提示MMP-3.TIMP-1.MMP-3/TIMP-1可作为早期诊断川崎病的一个客观生化指标。 3.NO过度表达参与了KD急性期血管炎尤其是冠脉损害的发生发展,由此可以将循环中NO水平作为判断KD冠脉损害的一个有效指标。 4.血清中MMP-2、MMP-3与NO之间呈显著性正相关,提示MMP-2、MMP-3与NO之间可能存在相互协同作用,共同促进冠脉损害的发生和发展。血清中TIMP-2.TIMP-1与NO之间呈显著性负相关,表明可能TIMPs做为MMPs特异抑制剂在一定程度上抑制MMPs的同时,对NO的表达也有一定抑制作用,应用TIMPs对MMPs水平进行调控的同时,可能对血清中NO水平表达也是一个调控。
【图文】：
例数组15L组15MMI〕一2(pg/L)480.75士9.82TIMP一2(pg/L)HMP一2/Tl柳一393.61士3.891.57士0.21450.06士4.38376.30士11.281.29士0.146.2213。297.75<0.05<0.01<0.01一一一一--一---一---一-川崎病CAL组血清MMP一2、Tl珊一2、MMP一2/TI淤一2和NCAL组相较明显增高，差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)
图4CAL组、NCAL组血清MMP一2/TIMP一2的比较组对象血清MMP一3、T1MP一1含量与MMP一3/T1MP--1的川崎病组、发热对照组、正常对照组血清MMP一3、TIMP一3/TIMP一1比值的比较，，见表3、图5、图6。表3各组血清MMP一3、TIMP一1、MMP一3/TIMP一1比较别例数MMP一3(pg/L)TIMP一1(pg/L)MMP一急性期3046.07士14.31▲获328.93士45一7城0一
【学位授予单位】：泸州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R725.4
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本文编号：
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