促红细胞生成素对新生HIBD大鼠Bcl-2及Bax蛋白表达的影响

发布时间：2020-05-30 16:04

【摘要】： 目的 围生期窒息引起的缺氧缺血性脑损伤(HIBD)，常危及新生儿生命，是导致儿童神经系统伤残的常见原因之一。近年研究发现，促红细胞生成素(EPO)在新生儿HIBD发病机制中起重要作用。本实验通过制备新生大鼠HIBD模型，腹腔注射外源性重组人促红细胞生成素(rhEPO)，观察不同剂量EPO对新生HIBD大鼠脑组织Bcl-2及Bax蛋白表达的影响，探讨EPO神经保护作用的分子机制，以期为临床治疗新生儿HIBD提供有效的方法和途径。 方法 1．制备HIBD模型：将新生7日龄Wistar大鼠行颈部正中切口，分离结扎左侧颈总动脉后给予低氧(8％O_2，92％N_2)处理2小时，制成HIBD模型。观察缺氧时动物行为变化，并于光镜下观察脑组织病理改变。 2．行为能力检查：分别于手术前及缺氧后1小时对每只大鼠进行翻身能力、夹尾左旋测试。 3．Bcl-2及Bax蛋白表达测定：42只新生7日龄Wistar大鼠随机分为假手术组、HIBD组、生理盐水对照组、EPO干预组，其中EPO干预组又分为大、中小、剂量三组，每组7只动物，于缺氧结束后立即一次性腹腔注射给药，应用免疫组织化学染色方法，观察给药24小时后Bcl-2及Bax蛋白表达变化。 结果 1．行为能力检查术前每只大鼠均做翻身能力、夹尾左旋测定，42只全部正常。缺氧后1小时假手术组测定结果同前。经历缺氧缺血的35只大鼠，，19只不能翻身，28只出现夹尾左旋，13只表现不能翻身和夹尾左旋同时存在。 2．HE染色及光镜检查结果 假手术组：脑组织结构及细胞层次清楚，神经元形态正常，无脑水肿。 HIBD组；脑组织水肿明显，神经元排列紊乱，胞体皱缩，胞质深染，核浓 缩，结构不清，伴有胶质细胞增生。 3．Bcl-2蛋白表达检测结果Bcl-2蛋白在假手术组中存在低水平表达，HIBD后表达明显增高，EPO干预组较生理盐水对照组及HIBD组更高。生理盐水对照组与HIBD组相比，EPO大、中、小剂量三组两两相比差异无统计学意义(P＞0.05)。其余各组间比较均有显著性差异(P＜0.05)。 4．Bax蛋白表达检测结果Bax蛋白在假手术组中表达微弱，HIBD后表达明显增高，EPO干预组较生理盐水对照组及HIBD组表达降低。生理盐水对照组与HIBD组相比，EPO大、中、小剂量三组两两相比差异无统计学意义(P＞0.05)。其余各组间比较均有显著性差异(P＜0.05)。 5．Bcl-2与Bax比值的变化Bcl-2／Bax在脑组织缺氧缺血性损伤后降低，EPO干预后又升高。生理盐水对照组与HIBD组相比，EPO大、中、小剂量三组两两相比差异无统计学意义(P＞0.05)。其余各组间比较均有显著性差异(P＜0.05)。 结论 1．通过对缺氧缺血后动物行为能力观察及脑组织病理学检查，证实新生鼠HIBD模型制作成功。 2．EPO通过上调抗凋亡蛋白Bcl-2表达，下调促凋亡蛋白Bax表达，改变Bcl-2／Bax，抑制脑细胞凋亡起到神经保护作用，为EPO临床治疗新生儿HIBD提供了更深层次的理论依据。
【图文】：

表1EPO对新生H工BD大鼠Bcl一2蛋白表达的影响(x士s)组别例数Bcl佗假手术组719.229士1.116HIBD组45.671士4.241△盐水组43.971士4.505△大剂量组55.743土3.994△#*中剂量组53.957士4.839△#*小剂量组51.643士3.372△#*注:F=84.265P<0.01组相比P<0.05△与假手术组相比P<0.05;#与HIBD组相比P<0.05;*与盐水

余各组间比较均有显著性差异(P<0.05)。(见表3，图3)表3EPO对新生HIBD大鼠Bel一2/Bax的影响(x士s)组别例数Bcl一2/Bax假手术组72.257士0.227HIBD组0.966士0.133△盐水组0.984士0.128△大剂量组2.088士0.338△#*中剂量组2.169士0.296△“*小剂量组2.007士0.428△#*注:F=犯.394P<0.ol;△与假手术组相比P<0.05;#与HIBD组相比P<0.05;*与盐水组相比P<0.05
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R722.1

【参考文献】

相关期刊论文 前3条

1 中华医学会儿科学分会新生儿学组;新生儿缺氧缺血性脑病诊断标准[J];中国当代儿科杂志;2005年02期

2 吴婉芳;新生儿缺氧缺血性脑病[J];中国医刊;2002年05期

3 赵时敏;新生儿缺氧缺血性脑病的防治及研究方向[J];中华儿科杂志;1997年02期

本文编号：2688373