原发性肝癌患者CTCs检测的临床应用研究和新生儿感染GBS的生物学特性研究

发布时间：2020-06-11 15:27

【摘要】：本论文包括两部分研究内容。第一章原发性肝癌患者CTCs检棚的临床应用研究目的:初步探讨外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)分型检测在原发性肝癌患者预后判断及肿瘤复发监测中的临床应用价值。方法:本文以2014年1月至2018年7月期间,经南方医科大学珠江医院确诊的67例原发性肝癌患者为研究对象,对患者外周血中CTCs表达水平与患者临床病理分期、肿瘤组织Ki-67抗原表达水平、血清AFP含量及血细胞参数的关系进行统计学分析,并对22例患者治疗前及治疗过程中外周血CTCs检测结果与患者疾病进展状况进行时间序列分析。结果:本研究结果显示原发性肝癌患者外周血CTCs总数及间质型CTCs的比例与患者肿瘤组织Ki-67抗原表达水平呈正相关,而患者外周血CTCs总数与患者BCLC病理分期、血清AFP含量、及血细胞参数(NLR、PLR、RDW)等无明显相关;动态监测结果显示原发性肝癌患者接受肝癌根治切除术后1～2月,外周血CTCs总数及间质型CTCs比例都下降;治疗过程中外周血CTCs总数及间质型CTCs比例增加,提示患者有肿瘤复发的风险。结论::原发性肝癌患者外周血CTCs表达水平可以反映患者肿瘤组织的增殖情况。患者治疗过程的CTCs动态监测,有利于监控治疗效果,尽早发现肿瘤复发,以便及时调整治疗措施,改善预后。第二章新生儿感染GBS的生物学特性研究目的:通过研究B群链球菌(Group B streptococcus,GBS)新生儿感染临床分离株的病原学及分子生物学特征,为进一步研究新生儿GBS感染的致病机制奠定基础。方法:本文以南方医科大学珠江医院2014年3月至2016年12月期间,分离自新生儿感染临床标本的6株GBS为研究对象。对各菌株的生长特性、抗吞噬特征、粘附特征进行实验研究,并对这些菌株进行全基因组测序和BLAST分析。结果:通过测定生长曲线,发现各菌株生长速度有差异。仅有F780号菌株CAMP试验结果阴性。通过粘附试验发现各菌株的粘附率有差异,F780号较其它菌株更容易粘附于Hep-2细胞。通过吞噬试验发现F780号菌株对RAW264.7细胞的吞噬抵抗力最弱。运用流式细胞技术对人血与GBS的相互作用进行定量分析,发现F780号菌株最容易被人血吞噬细胞吞噬。全基因组测序及BLAST分析结果显示F780号菌株的CAMP因子决定基因cfb缺失。结论:根据本研究结果,推测CAMP因子决定基因cfb的缺失可能导致菌株的抗吞噬能力减弱,本文为GBS抗吞噬作用机制的研究提供了科学依据,有助于新生儿GBS感染致病分子机制的研究。
【图文】：

荧光显微镜,分型,载玻片

Ｆｉｇｌ－１邋ＤｉｆｆｒｅｎｔＣＴＣｓ邋ｔｙｐｅｓ邋ｄｅｔｅｃｔｅｄ邋ｂｙ邋ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ邋ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ逡逑１．２．２免疫组化法检测原发性肝癌患者肿瘤组织Ｋｉ－６７抗原表达水平逡逑ａ）切片制作：将患者手术中切除的肿瘤组织标本经１０％中性缓冲福尔马林固定，石蜡逡逑包埋切片，，厚度３ｕｍ，并放置在带正电荷的载玻片上；逡逑ｂ）脱蜡：按顺序将载玻片浸入３个二甲苯槽中，时间各５ｍｉｎ，取出后将载玻片按顺逡逑序浸入两个１００％酒精槽中各３ｍｉｎ，取出后浸入９５％酒精槽中３ｍｉｎ，取出后浸入逡逑８０％酒精槽中３ｍｉｎ，最后将载玻片转移至蒸馏水槽中，浸洗至少１０次，脱蜡完成逡逑后将载玻片浸泡在ＡＰＫ洗涤液中防止变干；逡逑ｃ）抗原修复：在Ｄｅｃｌｏａｋｉｎｇ邋Ｃｈａｍｂｅｒ中压力１７－２５ｐｓｉ，温度１２０１２５°Ｃ条件下进行高温逡逑抗原修复，计时２ｍｉｎ完成抗原增强程序，随后将处理好的片子放入去离子水中清逡逑

患者,外周血,临床分期,总数

逦颂士学位论文ＣＴＣｓ总数的平均值为（９．７１±９．６２）个／５ｍｌ。ＢＣＬＣ－Ｂ期的患者有２１例，ＢＣＬＣ－Ｃ期的者有２０例，ＢＣＬＣ－Ｂ／Ｃ期患者ＣＴＣＳ总数的平均值为（８．９２±７．５４）个／５ｍｌ，如图１－４（Ａ）和１－４（Ｂ）所示，ＢＣＬＣ－Ａ期患者的Ｅ／Ｍ－ＣＴＣｓ所占比例大于与ＢＣＬＣ－Ｂ／Ｃ期患者的Ｅ／Ｍ－ＣＴＣｓ逡逑所占比例（Ｐ＝０．００６），ＢＣＬＣ－Ａ期与ＢＣＬＣ－Ｂ／Ｃ期患者的ＣＴＣｓ总数及Ｅ－ＣＴＣ和Ｍ－ＣＴＣｓ占比例无统计学差异（Ｐ＞０．０５）。逡逑□邋ＢＣＬＣ－Ａ逡逑４０－
【学位授予单位】：南方医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R735.7

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