儿童急性淋巴细胞白血病及细胞系p73、DCC、nm23-H1、nm23-H2和E2A-PBX1基因异常表达的研究

发布时间：2020-06-13 20:13

【摘要】：我们应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术、定量RT-PCR技术检测了63例急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞系和53例原发性儿童ALL患者的p73、DCC、nm23-H1、nm23-H2和E2A-PBX1融合基因mRNA表达改变情况，同时结合病人的临床病例资料进行了分析。应用DNA甲基化酶谱测定(REP)、双亚硫酸盐修饰的PCR(MSP)和PCR产物测序(BGS)等技术对63例急性淋巴细胞白血病细胞系p73基因第1外显子的甲基化进行了检测。63例ALL细胞系中，p73mRNA异常表达率33.3％(21／63)；DCC mRNA阴性表达率46.0％(29／63)；nm23-H1、-H2 mRNA表达明显高于正常血细胞；E2A-PBX1融合基因mRNA占11.0％(7／63)，全部为前B-ALL，占前B-ALL 19.0％(7／37)。53例原发性儿童ALL中，p73 mRNA阴性表达率26.4％(14／53)，DCC mRNA阴性表达率39.6％(21／53)，nm23-H1、-H2的表达明显高于正常血细胞，4例(7.5％)检测到E2A-PBX1mRNA。p73 mRNA阴性表达与ALL无病生存期(DFS)、总生存期(OS)的降低有明显关系。E2A-PBX1融合基因mRNA也与患者预后有明显关系。63例ALL细胞系中，38.1％存在p73基因的高甲基化。正常淋巴细胞和不存在p73基因高甲基化的细胞系表达p73mRNA，，大多数高甲基化的细胞系不表达p73 mRNA。研究结果表明，儿童ALL中p73mRNA存在较高的阴性表达，其主要机制为p73基因高甲基化，p73基因失活在ALL的发生发展中起重要作用，p73 mRNA检测对判断儿童ALL患者的预后有一定临床意义。儿童ALL中存在较高比例的DCC mRNA阴性表达和nm23-H1、-H2 mRNA的高表达，说明在ALL的发生发展中DCC基因失活和nm23-H1、-H2基因的过表达起有一定作用。DCC、nm23-H1、-H2 mRNA表达状况与预后无明显关系。E2A-PBX1融合基因虽然不是儿童ALL中的常发事件，但有一定的预后意义。p73、DCC、nm23-H1、-H2基因相互之间无明显相关性。
【图文】：

硫氰酸肌一有机溶剂法从ALL细胞系中提取细胞总RNA

nm23一HIGAPDHRT一PCR扩增，琼脂糖凝胶电泳。M为22，24，26，28，30，32，34，36，38不rl40循环(HEL细胞系)。nm23一Hl/GAPDH/HEL一n.}—}一
【学位授予单位】：中国协和医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2000
【分类号】：R733.71

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本文编号：2711681