神经节苷脂联合参附注射液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

发布时间：2020-06-20 18:09

【摘要】：目的:新生儿缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic encephalopathy ,HIE)是指婴儿在围生期发生窒息,导致脑组织缺氧性损伤,常常是造成新生儿早期死亡、小儿智力及躯体发育障碍的重要原因。HIE发病机制复杂,细胞凋亡是后期神经细胞缺失和功能障碍的重要原因。因此根据该病发病机制采取合适的治疗措施对HIE的预后有着十分重要的作用。本实验主要探讨在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后,应用神经节苷脂及参附注射液治疗后其脑组织中Bcl-2,Bax的变化趋势,从理论角度分析,联合应用两种药物对新生大鼠HIE后神经系统功能恢复是否具有更为明显的改善作用。 方法:(1)动物分组:将新生7天SD乳鼠90只随机分为假手术组、缺血缺氧组(HIBD组)、缺血缺氧+ GM1干预组(GM1组)、缺血缺氧+参附干预组(参附组)及缺血缺氧+ GM1及参附干预组(合用组)五组,每组各18只。后四组制成HIBD模型后根据处死动物的时间不同分为3个亚组:6h组、24h组、48h组,每亚组6只。(2)模型制备:假手术组给予颈正中切口并游离左侧颈总动脉,不进行缺氧缺血。模型组采用结扎左侧颈总动脉后置于低氧环境中2h制备而成。GM1组及参附组分别于缺氧缺血后立即给予腹腔注射GM1或参附注射液。合用组于缺氧缺血后腹腔注射两种药物。(3)观察脑组织变化:各组动物于相应时间点处死后取其脑组织,肉眼观察脑组织大体形态的变化,行HE染色后光镜下观察左侧脑组织的病理变化,免疫组织化学方法半定量检测左侧脑组织Bcl-2、Bax表达。 结果:(1)行为改变:新生大鼠在缺氧缺血后会出现不同程度的行为异常。(2)肉眼观察结果:假手术组脑组织大体无明显改变;HIBD组脑组织大体形态有不同程度的异常改变;各治疗组较HIBD组上述改变明显减轻。(3)HE染色结果:假手术组海马组织结构基本正常,细胞排列整齐紧密,形态正常。高倍镜下可见神经元核大而圆,透明;HIBD组海马组织结构疏松,大脑皮层、海马细胞排列紊乱,且出现空泡、变性和坏死,正常神经元细胞减少;干预各组在各时间点损伤程度较HIBD组明显减轻,大脑皮层、海马细胞变性、坏死明显减少,细胞排列尚规则,尤以合用组改变明显。(4)免疫组织化学染色结果:①Bcl-2表达:Bcl-2阳性细胞广泛表达于大脑皮层和海马,为胞浆着色,染色呈棕黄色或黄褐色颗粒。HIBD组和各治疗组Bcl-2阳性表达高峰均在HIBD后24h。假手术组表达较弱,各时间点无明显差异;而HIBD组各时间点Bcl-2阳性表达增加,阳性细胞平均灰度值较假手术组低,差异均有统计学意义(P0.01);GM1组、参附组及合用组各时间点Bcl-2阳性表达较HIBD组进一步增加,阳性细胞平均灰度值较HIBD组进一步降低,差异均有统计学意义(P0.01);而合用组各时间点Bcl-2阳性表达较GM1组及参附组增加程度更为明显,差异均有统计学意义(P0.01)。②Bax表达:Bax阳性细胞主要表达于细胞质,染色呈棕黄色颗粒。HIBD组和各治疗组Bax阳性表达高峰均在HIBD后24h。假手术组中有极少量Bax蛋白表达;HIBD组各时间点Bax蛋白阳性表达明显增加,染色最深,阳性平均灰度值表达较假手术组明显降低,差异均有统计学意义(P0.01);GM1组、参附组及合用组各时间点Bax阳性表达较HIBD组下降,阳性平均灰度值表达较HIBD组增高,差异均有统计学意义(P0.01);而合用组各时间点Bax阳性表达较GM1组及参附组下降程度更为明显,差异均有统计学意义(P0.01)。 结论:(1)成功建立新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型后,单独腹腔注射神经节苷脂或参附注射液均可不同程度减轻新生大鼠脑损伤,联合使用两种药物腹腔注射对其脑损伤的改善作用更为明显。(2)神经节苷脂或参附注射液均可起到将脑组织中Bcl-2的表达上调,Bax阳性表达下降的作用,改变脑组织中Bcl-2/ Bax的比值,从而减轻HIBD病理损伤,抑制神经细胞凋亡。
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R722.1
【图文】：

假手术组新生大鼠脑组织(HE400×)

HIBD组6h脑组织(HE200×)

【引证文献】

相关硕士学位论文 前1条

1 闫焕利;HIF-1α及其抑制剂对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时神经细胞凋亡的影响[D];山西医科大学;2012年

本文编号：2722773