新生大鼠缺氧缺血脑损伤caspase-3mRNA的表达变化及1，6-二磷酸果糖的神经保护机制研究

发布时间：2020-07-04 05:21

【摘要】：目的本实验建立新生鼠缺氧缺血脑损伤(HIBD)模型，观察了HIBD后新生鼠脑组织caspase-3mRNA表达的动态变化，进一步探讨缺氧缺血诱导神经元凋亡的机制及意义；1，6-二磷酸果糖(FDP)是否通过影响凋亡调控基因表达实现抗凋亡作用，尚不明确，本研究观察了FDP对HIBD后新生鼠脑组织caspase-3基因表达的影响，来探讨FDP脑保护作用的分子机制，为其临床治疗HIBD提供更深层次的理论依据。方法 1．制备HIBD模型：新生7日龄Wistar大鼠行颈正中切口，分离结扎左颈总动脉给予低氧(8％氧气+92％氮气)处理2小时，制成HIBD模型。观察动物行为变化，后于相应时点取材光镜下观察脑组织病理改变。 2．Caspase-3 mRNA表达测定：将7日龄Wistar大鼠随机分为假手术对照组、HIBD6h、24h、3d、5d组，每组5只动物，应用RT-PCR方法测定。 3．FDP神经保护机制的研究：将7日龄Wistar大鼠随机分为HIBD对照组、盐水组、FDP治疗组，于缺氧缺血后立即给药，其中FDP组又分为大、中、小剂量组，每组5只动物，应用RT-PCR观察24小时后caspase-3mRNA的表达变化。结果 1．动物模型行为表现：实验前各组新生鼠行为能力正常；HIBD组：进入低氧环境后5-10min出现躁动不安、翻滚，随后逐渐出现肌肉颤动、头颤、翻身不能，甚至抽搐与意识障碍(如嗜睡)，严重于低氧过程中死亡，行为障碍一般在HI后很快消失；假手术组：未见行为异常表现。天津医界延才学硕全研芜生学少沦丈 2.HE染色及光镜检查结果: 假手术组:脑组织结构及细胞层次清楚，神经元形态正常，无脑水肿; HIBD6h:出现轻度脑水肿，神经元胞体轻度皱缩，胞浆呈均匀粉红色，胞核固缩; HIBD24树72h:脑水肿程度加重，神经元排列紊乱，胞体极度皱缩，胞浆深染，核浓缩，伴胶质细胞增生; HIBD5d:脑水肿减轻，胶质细胞增生明显，可见嗜神经现象。 3.CasPase一3 mRNA动态变化:假手术对照组即有相对高水平caspase一3 mRNA表达，HIBD6h其表达明显增高(与对照组比较有显著性差异， P0 .01)，24h达高峰，此后逐渐下降，HIBD5d其表达仍维持较高水平 (与对照组比较具有显著性差异，P0.01)。 4.FDP的神经保护机制研究:盐水组和HIBD组caspase一3基因表达无显著性差异(P0.05)，FDP小剂量组与盐水组和HIBD对照组相比easpase一3 基因表达亦无显著性差异(P0.05)，FDP大、中剂量组其表达均有不同程度的下调，同以上三组比较均有显著性差异(P0.05)，FDP大、中剂量组相比无显著性差异(P.05)。结论 1，通过对HIBD后动物行为能力观察及其脑组织病理学检查，证实新生鼠 HIBD模型制作成功。 2.缺氧缺血可诱导新生鼠脑组织caspase一3 mRNA表达，其过度表达在 HIBD后神经元凋亡的调控中起一定的作用，针对caspase一3的治疗对策为围产期缺氧缺血性脑损伤打开了新视窗。 3.FDP的神经保护机制可能与下调脑组织caspase一3基因表达有关，从而起到抗凋亡作用。为FDP对HIBD的临床治疗提供了更深层次的理论依据。
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R722.121

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