Sec10的表达水平与儿童中重度肾盂输尿管连接处梗阻的相关性研究

发布时间：2020-07-05 11:16

【摘要】：目的:明确Sec10在单侧先天性肾盂输尿管连接部梗阻患者输尿管组织中的表达情况,探讨其与儿童中重度肾盂输尿管连接处梗阻的相关性。实验材料与方法:1、实验标本来源:实验组标本来均源于在2015年1月-2018年12月期间在我院泌尿外科病房住院并进行手术治疗的因先天性肾盂输尿管连接处梗阻导致的单侧肾积水患儿。所有患儿术前均完善彩色B超、IVP以及CT平扫+增强+三维重建等检查,并经手术再次证实为肾盂输尿管连接处梗阻所导致的单侧先天性肾积水。经我院伦理委员会批准,告知患儿家属并签署知情同意书后,留取患儿术中所切除的输尿管标本。保留标本34例(n=34),根据SFU分级法将其进一步分为中度组(n=6)、重度组(n=28)。对照组为同期在本院泌尿外科行手术治疗的单侧肾母细胞瘤患儿,共10例(n=10),所有患者术前未进行化疗,所取的输尿管标本无肿瘤侵润。2、实验方法:(1)HE染色:对组织标本进行固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、制作石蜡切片、HE染色、脱水透明、封片,并在显微镜下观察。(2)免疫组织化学法:免疫组织化学法染色,实验步骤按试剂盒说明书进行。在免疫组化染色中,使用Pannoramic viewer软件系统分析镜下所采集图片,接着使用Quant center中的densito quant软件进行定量分析,然后进一步对每个组织进行分析,识别出强阳性,中度阳性,弱阳性及阴性的面积(单位:像素)以及阳性的百分比,最后再进行H-score的评分。(3)统计学分析:使用SPSS21.0统计软件进行统计学处理,连续变量采用均数±标准差表示,组间比较采用方差分析;分类变量使用构成比来表示,组间比较采用Fisher’s精确检验,P0.05为差异具有统计学意义。结果:1.临床基本资料:各组患儿性别、侧别、BMI之间的差异无统计学意义(P0.05)。2.HE染色结果:肾盂输尿管连接处梗阻组患儿的输尿管组织可见肌层纤维组织明显增生,肌层肥厚,排列紊乱、稀疏,其间可见大量增粗的胶原纤维,管腔明显狭窄。肾母细胞瘤对照组输尿管组织未见异常改变,无肿瘤细胞浸润。3.免疫组织化学染色结果:在中度组、重度组以及对照组的输尿管组织中均有Sec10的阳性表达。其中,肾母细胞瘤组Sec10的总阳性比率为98.30%,H-Score为146.90±9.94;中度组总阳性比率为99.62%,H-Score为153.92±11.85;重度组Sec10的总阳性比率为98.92%,H-Score为146.15±9.65,对三组间数据进行比较,差异没有统计学意义(P0.05)。4.相关性分析:Sec10的表达水平与肾盂输尿管连接处梗阻的疾病严重程度没有明显的相关性(r=-0.114,P=0.457)。结论:肾盂输尿管连接处梗阻患儿的输尿管组织与肾母细胞瘤患儿的输尿管组织的Sec10表达水平没有显著差异,并且其表达水平与肾盂输尿管连接处梗阻疾病的严重程度无明显相关性。提示Sec10的表达水平与肾盂输尿管连接处梗阻的发生可能相关性不大,故暂时不能将此指标作为诊断肾盂输尿管连接处梗阻的潜在生物标志物。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R726.9
【图文】：

流程图,数据分组,流程图,试剂

图 2.1 数据分组流程图2.5 实验方法及过程2.5.1 标本来源及保存经伦理委员会批准，告知患儿家属本课题的目的，患儿监护人书后，留取患儿术中所切除的输尿管标本，新鲜的离体组织标本在于-80℃冰箱储存备用。2.5.2 实验材料（1）主要实验试剂：试剂厂家货号无水乙醇国药集团化学试剂有限公司二甲苯国药集团化学试剂有限公司EDTA(PH9.0)抗原修复液 Servicebio G12PBS 缓冲液 Servicebio G003%双氧水 Servicebio G01

胶原纤维,肌纤维,患儿,肾母细胞瘤

手术治疗的10例（n=10）单侧肾母细胞瘤患儿，年龄在10月-6岁3月[（2.84±1.87）岁]。对各组患儿的性别、患病侧别、BMI进行比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。具体结果详见表 3.1。表 3.1 各组患儿一般资料组间比较分组（人数）性别（男/女）侧别（左/右）BMI(Kg/m2）M（P25,P75) 秩均值肾母细胞瘤组（n=10） 4/6 6/4 14.95(14.29,17.60) 26.75中度肾积水组（n=6） 3/3 4/2 14.67(14.23,15.44) 22.67重度肾积水组（n=28） 21/7 20/8 14.50(13.63,16.28) 20.95H - - 1.51P 0.102 0.892 0.47二、HE 染色结果先天性肾盂输尿管连接处梗阻所致单侧肾积水患儿的输尿管组织可见：肌层纤维组织明显增生，肌层肥厚，排列紊乱、稀疏，其间可见大量增粗的胶原纤维，管腔明显狭窄。肾母细胞瘤对照组输尿管（无肿瘤细胞浸润）未见异常改变，。（见图 2-1、图 2-2）

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