【摘要】：婴幼儿血管瘤(Infantile Hemangiomas, IH,下文简称为血管瘤)是儿童最常见的肿瘤之一,60-80%的病变累及颌面部。它是一种非常特殊的肿瘤,包括血管生成和血管退化两种病理生理过程,根据其主要临床病理特点可分为快速增生期、退化期和退化完成期。最近有研究发现,增生期血管瘤内有大量的髓系细胞(myeloid cells),部分血管瘤内皮细胞共表达髓系细胞标志物,如CD14,CD45, CD32, CD15及CD83；我们的前期研究发现部分血管瘤内皮细胞共表达巨噬细胞标志物CD68；另有研究发现血管瘤组织中大量存在CD8阳性的细胞毒性T细胞,并且免疫调节剂2,3-吲哚胺二氧化酶(Indoleamine 2,3-dioxygenase, IDO)高表达于增生期血管瘤组织中,而在消退的过程中逐渐表达减少。所有这些研究都表明免疫及免疫介导的炎性过程在血管瘤的发生发展过程中可能起到重要的作用。 新发现的生物活性肽——同种异体移植炎症因子1 (allograft inflammatory factor-1, AIF-1)不仅是巨噬细胞激活的标志物,更是免疫反应的重要调控因子。因此,我们推测AIF-1有在血管瘤发生发展中起到重要的调控作用,本研究旨在探讨AIF-1在血管瘤发生发展中的表达及其可能的作用机制。研究内容分为以下三部分： 第一部分 同种异体移植炎症因子1(AIF-1)在婴幼儿血管瘤中的表达及定位的研究 目的：检测AIF-1在血管瘤组织及对照组织(包括脉管畸形、化脓性炎性肉芽肿、胎盘、舌鳞状细胞癌及正常皮肤)中的表达,以及对比AIF-1在血管瘤病理过程中各个时期的表达差异；方法：用免疫组织化学S-P法对19例血管瘤组织及对照组织(包括26例脉管畸形、24例化脓性炎性肉芽肿、3例胎盘、10例舌鳞状细胞癌及5例正常皮肤)的连续切片进行AIF-1及CD34染色,并对血管瘤组织进行AIF-1及CD34的免疫荧光双染；结果：19例血管瘤组织中有17例(89%)中可检测到AIF-1的表达,AIF-1表达于血管瘤内皮细胞的胞浆中,而24例化脓性炎性肉芽肿、26例静脉畸形、5例正常皮肤、10例舌癌及5例胎盘的血管中均未见AIF-1的表达；并且AIF-1在血管瘤组织三个时期均高表达,无显著性差异(P0.05)；结论：AIF-1特异性地表达于血管瘤内皮细胞,而化脓性炎性肉芽肿、静脉畸形、正常皮肤的血管、胎盘及恶性肿瘤新生血管均不表达AIF-1,提示AIF-1可以作为血管瘤内皮细胞特殊的生物学标志物。 第二部分 同种异体移植炎症因子1(AIF-1)促进内皮细胞激活及其机制的研究 目的：本部分研究旨在通过探讨AIF-1对内皮细胞的作用,来探讨AIF-1对血管瘤发生发展中可能存在的作用及其机制；方法：构建AIF-1的表达质粒pcDNA3.1(-)-AIF-1转染正常血管内皮细胞系HUV-EC-Cs,建立AIF-1过表达的内皮细胞株；通过MTT、流式细胞周期实验检测内皮细胞的增殖,内皮细胞划痕及迁移实验检测内皮细胞的迁移能力,成管实验及鸡胚尿囊膜成血管实验检测内皮细胞的分化能力、半定量的RT-PCR、Real time PCR及ELISA实验方法检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, b-FGF)、金属蛋白酶组织抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinase 1, TIMP-1)、单核细胞趋化蛋白1 (monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1)及粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor, G-CSF)的mRNA和蛋白水平；结果：正常内皮细胞不表达AIF-1,转染后AIF-1的表达显著增加；MTTT及流式细胞周期实验显示内皮细胞表达AIF-1后增殖能力显著增强(p0.05),停留于静止期(G0／G1)的细胞比例明显减少,而处于DNA合成期(S)及分裂期(G2／M)的细胞比例明显增加；细胞划痕及迁移实验同样证实AIF-1能促进内皮细胞迁移；同时,成管实验及鸡胚尿囊膜成血管实验显示AIF-1能促进血管生成；并且,AIF-1可以上调内皮细胞bFGF的表达,而对VEGF、TIMP-1、MCP-1及G-CSF的表达无影响； 结论：AIF-1有可能是通过上调bFGF的表达来促进内皮细胞增殖、迁移及血管生成,从而影响血管瘤的发生发展。 第三部分 在婴幼儿血管瘤中同种异体移植炎症因子1(AIF-1)上游调控因素的研究 目的：探讨AIF-1在血管瘤中表达的原因；方法：用bFGF、VEGF、胰岛素样生长因子2 (insulin-like growth factor 2, IGF 2)及低氧刺激血管内皮细胞,作用24h或48h后,运用RT-PCR的方法检测AIF-1的表达；结果：bFGF、VEGF、IGF 2的浓度及低氧均不能诱导AIF-1的表达,并且不依赖于浓度及作用时间； 结论：在血管瘤发生发展过程中起重要作用的生长因子并不影响AIF-1的表达。
【学位授予单位】：武汉大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R732.2
【共引文献】
相关期刊论文 前10条
1 王利;;同种移植炎症因子的结构和功能研究[J];安徽农业科学;2009年17期
2 蔡育;赵怡芳;;婴幼儿血管瘤中葡萄糖转运蛋白-1表达的研究进展[J];国际口腔医学杂志;2007年02期
3 付康;赵燕英;刘收;钟雅;陈正望;;同种异体移植炎性因子-1:一种多功能的炎性蛋白质[J];医学分子生物学杂志;2007年01期
4 李发芳;陈正望;;新生物活性肽—daintain/AIF-1在乳腺癌中的表达[J];湖北大学学报(自然科学版);2005年04期
5 赵燕英;王建和;付康;陈正望;陆婕;;细胞因子Daintain/AIF-1的纯化及其单克隆抗体的制备与鉴定[J];华中农业大学学报;2007年01期
6 殷敏智;张忠德;吴湘如;奚政君;储谦;;婴儿性血管瘤24例临床病理分析[J];临床与实验病理学杂志;2007年04期
7 ;Characterization and expression analysis of an allograft inflammatory factor-1 homologue in yellow grouper (Epinephelus awoara)[J];Acta Oceanologica Sinica;2008年06期
8 郭伶俐;邢新;;特殊类型血管瘤的临床和生物学特征[J];中国美容整形外科杂志;2007年06期
9 黄欣媛;陈正望;;Daintain/AIF-1:一个疾病相关的多功能炎症因子[J];现代生物医学进展;2010年14期
10 颜冬菁;盖文丽;赵燕英;黄欣媛;陈正望;陆婕;;小鼠Daintain/AIF-1基因启动子的克隆及其荧光素酶报告基因载体的构建[J];现代生物医学进展;2011年06期
相关博士学位论文 前10条
1 颜冬菁;Daintain在巨噬细胞RAW264.7中的功能研究[D];华中科技大学;2011年
2 李涛;Daintain/AIF-1对乳腺癌细胞MDA-MB-231,MCF-7生理功能的影响[D];华中科技大学;2011年
3 林菁艳;去神经后疼痛大鼠术后早期镇痛的脊髓背角结构可塑性体视学研究[D];重庆医科大学;2011年
4 赵忠芳;普萘洛尔治疗血管瘤分子机制的初步研究及临床应用[D];新疆医科大学;2011年
5 王伟;炎症因子Daintain/AIF-1在动脉粥样硬化中的功能研究[D];华中科技大学;2011年
6 黄欣媛;炎症因子Daintain/AIF-1对胰腺β细胞功能影响的研究[D];华中科技大学;2011年
7 李桦;毛细管电泳分离检测某些疾病特征性物质和手性药物研究[D];武汉大学;2004年
8 杨伟峰;益生菌CMS-H002和CMS-H003菌株治疗小鼠急性溃疡性结肠炎的研究[D];中南大学;2007年
9 郭伶俐;腺病毒介导碱性成纤维细胞生长因子对人脐静脉内皮细胞生物学行为的影响及血管瘤动物模型建立的初步研究[D];第二军医大学;2007年
10 魏艇;血管生成素-1、血管生成素-2及Tie2受体在人体血管瘤裸小鼠移植模型中的表达[D];四川大学;2007年
相关硕士学位论文 前10条
1 章均;血管病变的病理机理及HIFU治疗的实验研究[D];重庆医科大学;2004年
2 郑艳利;Wistar大鼠口腔粘膜癌变过程的实验研究[D];郑州大学;2007年
3 高云;死亡受体及配体中反义同源盒序列的筛选、鉴定及活性研究[D];第二军医大学;2007年
4 王伟;AIF-1原核载体的构建及表达纯化[D];华中科技大学;2006年
5 赵燕英;Daintain/AIF-1的纯化及其单克隆抗体的制备与鉴定[D];华中科技大学;2006年
6 王茹兮;大炎肽/同种异体移植炎症因子-1对MDA-MB-231乳腺癌细胞的增殖作用[D];华中科技大学;2007年
7 黄欣媛;Daintain/AIF-1酵母双杂交诱饵表达载体的构建及初步鉴定[D];华中科技大学;2007年
8 黄祖根;耳廓动静脉畸形治疗中选择性介入栓塞的作用研究[D];福建医科大学;2009年
9 姚伟;稳定抑制β-catenin的RNAi真核载体的构建及其对人神经母细胞瘤细胞株体内外增殖作用的研究[D];复旦大学;2012年
10 雍熙;平阳霉素治疗血管瘤临床研究—单中心21年治疗回顾性分析[D];川北医学院;2014年
本文编号：
2758374
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/eklw/2758374.html
