儿童营养不良血清低分子量蛋白质谱图研究

发布时间：2020-08-05 08:32

【摘要】：目的：蛋白质-热能营养不良(protein-energy malnutrition, PEM)是由于缺乏能量和(或)蛋白质所致的一种营养缺乏症,主要见于3岁婴幼儿。PEM临床表现：体重不增以致减轻是营养不良的最初表现。病程持久时身长(高)也是低于正常。皮下脂肪层不充实或完全消失。其顺序依次为腹部,其次为胸-背-腰部,然后上肢-下肢-臀部,最后额-颈-面颊部。皮下脂肪大量消失时,皮肤变得干燥、苍白、松弛及出现皱纹、失去弹性、肠型可见。肌肉发育不良,肌张力低下,或偶尔增高。运动发育迟缓,智力落后,体温降低,心音低钝、节律不齐、血压偏低、呼吸表浅。远期可影响智力及运动素质的发展。因此,儿童期的PEM应引起足够重视。迄今,没有明确的实验室参数能早期诊断P E M。蛋白质组学(Proteomics),是近年来发展起来的一门新兴学科,通过分析研究健康与疾病状态的组织、细胞群和亚细胞结构线粒体中蛋白质的变化,其以细胞内全部蛋白质的存在及其活动方式为研究对象,研究细胞在不同的生理或病理条件下表达蛋白的异同,分析蛋白质的结构功能和蛋白质之间的相互关系,并从而找出功能蛋白质和特异蛋白质,进一步阐明疾病的发病机制,并在深入研究的基础上针对靶点定向合成有效的治疗药物。本实验采用蛋白芯片结合表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(surface enhanced laser desorption/ionization-time of flight-mass spectrometry, SELDI-TOF-MS)技术检测PEM治疗前及PEM治疗后组中表达具有显著差异的蛋白质尤其是低分子量蛋白或多肽,希望找到能对PEM早期诊断具有参考意义的血清蛋白,为早期诊断PEM和PEM治疗提供参考依据,使患儿能够尽早得到治疗。本研究旨在探讨蛋白组学在PEM中的应用价值,找出差异蛋白,为治疗提供可选择的方法。方法：应用SELDI-TOF-MS技术来分析检测结合在蛋白质芯片上的血清蛋白质,共获得68例标本的血清低分子量蛋白表达指纹图谱,其中56例为PEM血清蛋白表达指纹图谱,12例为PEM治疗后血清蛋白表达指纹图谱。结果：在分子质量/电荷比值(质荷比,mass electron ratio,M/Z)为2000-20000范围,PEM与PEM治疗组间有显著统计学意义(p＜0.01)的蛋白质峰有5个,在治疗前后蛋白表达量((?)±S)依次是5314.4(42.23±4.09；27.35±4.51)、6417.8(10.05±2.76；30.05±4.23)、6616.9(20.02±3.42；34.03±6.23)、7742.8(57.45±9.72；39.57±4.15)、10216.5(47.45±9.63；31.75±2.73),其中M/Z为5314.4(42.23±4.09；27.35±4.51)、7742.8(57.45±9.72；39.57±4.15)、10216.5(47.45±9.63；31.75±2.73)在PEM组中高表达；而M/Z为6417.8(10.05±2.76；30.05±4.23)、6616.9(20.02±3.42；34.03±6.23)在PEM治疗组中高表达。结论：1、通过本次试验得出PEM有蛋白质代谢紊乱；2、PEM患儿治疗前后蛋白有所改变,PEM患儿可能由于体内蛋白质的表达缺损或不平衡造成某些蛋白含量较正常儿童高,经过治疗补充所需蛋白质其蛋白趋于平衡；3、利用芯片联合质谱技术研究PEM蛋白代谢特征可能为PEM的分子诊断、生物治疗、病理机制研究开辟新途径。
【学位授予单位】：泸州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R723
【图文】：

的时间不同，蛋白质的质荷比(叨Z)与离子飞行时间的平方成正比。蛋白质的相对含量带有正电荷的蛋白质离子束在到达检测器的一瞬间，电子倍增将产生的瞬时电流转换成蛋白质的相对含量。(如图3)

不同芯片上Nmix特征蛋白质峰间具有较强的重复性(图4)。让让少响响如心‘犯小..·.-一一丫 ...、、乡次如.，，山 ---111扁少杯 杯 杯卜 卜 卜 卜瓜 瓜瓜局认人瓜痴瘾 J{{{左 左 左互 互 ....

量为 5314.4Da、6417.8Da、6616.9Da、7742.8Da、10216.SDa，其差异低分子量蛋白质质谱峰强度值(表l)，强度值变化趋势(图4)，典型样本低分子量蛋白质质谱指纹图(图5).表l两组中五个差异低分子量蛋白质质谱峰强度值比较(x贷)分组例数 5314.4Da6417.8Da 66169Da7742.8DaIOZ16.SDa治疗前5642.23士4.0910.05士2.7620.02士3.4257.45士9.7247.45士9.63治疗后1227.35士4.51▲30.05士4.23▲34.03士6.23▲39.57士4.15▲31.75土273▲▲:与治疗前相比，P<刀.oj

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本文编号：2781295