肺炎链球菌耐药性和遗传背景研究
发布时间:2020-08-06 15:14
【摘要】: 肺炎链球菌是儿科各种感染性疾病的常见致病菌,随着抗生素的广泛使用,肺炎链球菌耐药现象日益严重,尤其是近一、二十年耐药率上升最为迅速:一方面耐青霉素肺炎链球菌呈全球性广泛分布,对非β内酰类抗生素的耐药率也非常高,增加了临床治疗的难度;另一方面,耐青霉素肺炎链球菌在地区分布上又存在不均衡性,在有的地区间差异非常巨大。鉴于肺炎链球菌是各种社区获得性感染的常见致病菌,国外多数国家都有专门的多中心机构对该菌进行耐药性监测和分子流行病学研究,国内则无专门的研究机构,相关报道也少,仅北京、上海和广州等地区有过横断面研究的文献记载。中国是一个幅员辽阔的大国,各地卫生条件相差悬著,而肺炎链球菌的耐药模式、致病性和克隆流行等方面,各地区均有各自的特点。本研究的目的是了解本地区肺炎链球菌(儿童株)的耐药模式和流行特征,为临床防治提供科学依据。 研究方法 研究对象为浙江大学儿童医院2001年8月至2002年7月鉴定的323株肺炎链球菌,包括243株致病株和80株携带株。(1)用Kirby-Bauer琼脂扩散法检测9种抗生素对菌株的药敏结果,同时用浓度梯度法(E test法)检测青霉素、头孢噻肟和红霉素对菌株的最低抑菌浓度(MIC),结合两者结果进行耐药模式分析,药敏判断标准为美国临床实验室标准化委员会制定的标准(NCCLS M100-S9版)。(2)根据肺炎链球菌BOX元件A亚单位重复序列的环状结构,设计出一条BOXA引物,对青霉素耐药株、同一病人不同次培养分离到的肺炎链球菌、以及同一标本中分离到的表型不同的菌株、不同病人分离到的特殊表型的菌株,用BOX-PCR技术对A亚单位进行扩增,产物经2%琼脂糖电泳后,以标准株ATCC49619为参照进行BOX分型,最后根据BOX图谱即菌株遗传背景的相似情况进行克隆相关性判断。 浙江大学硕士论文 肺炎链球菌耐药性和遗传背景研究 结果323株菌株中,青霉素敏感株136株,占42.1儿 青霉素中介株130 株,占 40.2%,青霉素耐药株 57株,占门.7%。青霉素的*C范围为 0.012一4.0 u g/ml,其中 MIC < 2.0 u g加l共 317株,占 98%,MIC 7 3.0 u m八l共 6株, 占 1.9%。头抱噬厉的 MIC分布范围为 0.008-2.0 u g/ml,其中 316株菌株对头 抱嚼厉敏感,MIC < 0.5 u g/ml,占 97.8%;7株菌株对头抱嚷厉中介,MIC范围 为 0.75六.0 u g加,占 2.2儿 未发现对头抱噶厉耐药的菌株。90.7%的菌株对红 霉素耐药,红霉素MIC范围为 0.047mm/m17256um/ml,73.9%的菌株为 MIC7 256 u g加l的高水平耐药株。肺炎链球菌对四环素、复方新诺明的耐药率也分别 高达87.6%和48.6儿 氯霉素的耐药率为14.9巩 对三种以上不同种类抗生素联 合耐药的多重耐药株占 61.0儿 多数对红霉素、四环素和甲氧节ie/磺胺甲基异 恶哇联合耐药。99.帐的菌株对利福平敏感。未发现对万古霉素和氧氟沙星耐药 的菌株。BOX-PCR分析耐青霉素肺炎链球菌临床株,共分离到A、B、B;、B;、 Q屯乙龟乙。龟D龟DI龟 乙龟D3龟D4龟L21乙 巳龟 巳龟F电巳龟厂龟G丸H龟1下J龟L等不 同 BOX型或亚型,未发现高度集中分布的 BOX图谱;而在 19株耐青霉素健康携 带株中,73.7%(14/19)的菌株BOX图谱为C型。同一标本中分离到的表型不同 的6组肺炎链球菌中,4组菌落形态明显不同而耐药模式相同菌株间其BOX图谱 两两相同;1组菌落形态相似而耐药模式不同的2株菌株分别为D型和F型。1 组菌落形态明显不同、耐药模式也不同的 2株菌株的 BOX图谱彼此相同。同一病 人中2次以上分离到肺炎链球菌的共5例,其中1例连续5次分离到肺炎链球 菌,前4次BOX图谱均相同,为E;型,最后1次BOX图谱与前四次相差2条DNA 条带,为 C型;其余 4例病人多次分离到肺炎链球菌,其 BOX图谱均相同。 结论 杭仆]地区肺炎链球菌耐药现象比较严重,青霉素不敏感株的比倒高, 但 98.1y的菌株 MIC < 2.0 u s加,这些菌株仍可用大剂量青霉素治疗。菌株对头 抱嚷厉的敏感率高,对红霉素耐药率高而且耐药程度严重,对甲氧千唉/磺胺甲 基异恶哇的耐药率也较高,且多重耐药现象严重。BOX-PCR分析显示,本地区耐 青霉素肺炎链球菌无高度集中分布的BOX图谱,结合高水平耐药株少,推坝fi地区 起源的可能性大。同一病人可同时或在不同的病程阶段受不同克隆的肺炎链球菌 感染或定植。对于肺炎链球菌遗传背景研究,BOX-PCR是一种方便、价廉而实用 的方法。
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R725
【图文】:
.……(二C)C二C:吧二,C,《:MIC月g/ml图1一3青霉素对肺炎链球菌的Eteot法MIC分布图.头抱邃肪的MIC范围为0.008一2.0林g/ml,其中316株菌株对头袍邃肪敏感,MIC‘0.5林g/m1,占97.8%,7株菌株对头饱邃肪中介,MIC范围为。.75一2.0林g/m1,占2.2%,未发现对头袍邃肪耐药的菌株。红霉素MIC范围为0.047抖g/ml一>256“g/ml
本文编号:2782588
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R725
【图文】:
.……(二C)C二C:吧二,C,《:MIC月g/ml图1一3青霉素对肺炎链球菌的Eteot法MIC分布图.头抱邃肪的MIC范围为0.008一2.0林g/ml,其中316株菌株对头袍邃肪敏感,MIC‘0.5林g/m1,占97.8%,7株菌株对头饱邃肪中介,MIC范围为。.75一2.0林g/m1,占2.2%,未发现对头袍邃肪耐药的菌株。红霉素MIC范围为0.047抖g/ml一>256“g/ml
【参考文献】
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2 杨帆!200040上海,张婴元!200040上海,Lesley McGee,Avril Wasas,Keith Klugman,吴卫红!200040上海,周乐!200040上海,朱德妹!200040上海,汪复!200040上海;上海市791名健康儿童222株肺炎链球菌携带株研究[J];中华医学杂志;2001年10期
本文编号:2782588
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