他克莫司对嘌呤霉素损伤足细胞的保护作用研究

发布时间：2020-08-27 23:33

【摘要】：目的观察他克莫司对嘌呤霉素诱导的足细胞损伤的影响,探讨他克莫司通过调节足细胞自噬,发挥保护足细胞作用的研究。方法体外培养小鼠肾小球足细胞,嘌呤霉素作用足细胞建立足细胞损伤模型,实验分为空白组、溶媒组、模型组和FK506组。处理12h、24h和48h后,显微镜下观察足细胞形态并拍照,CCK-8(cell counting kit-8)法检测足细胞活力,western blot检测LC3蛋白以及Nephrin蛋白表达量。结果1.细胞形态及数目改变:在12h、24h、48h时间点,溶媒组与空白组比较,细胞面积及数目基本一致。模型组与空白组比较,各时间点细胞面积及数目均减少。FK506组各时间点细胞面积及数目均高于模型组。2.细胞活力改变:处理48小时后,溶媒组与空白组比较,足细胞活力无明显差异(P0.05)。模型组与空白组比较,足细胞活力明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。FK506组足细胞活力明显高于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。3.蛋白表达改变:处理48小时后,western blot检测各组足细胞相关蛋白,溶媒组LC3以及Nephrin蛋白表达量与空白组基本一致,差异无统计学意义(P0.05)。模型组Nephrin蛋白表达较空白组减少,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值降低,差异有统计学意义(P0.05)。FK506组对比模型组,Nephrin蛋白表达增加,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论FK506可以增加足细胞Nephrin蛋白表达,减轻PAN(嘌呤霉素)所致的足细胞损伤,其机制可能与上调足细胞自噬有关。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R726.9
【图文】：

第 4 章 实验结果第 4 章 实验结果4.1 足细胞形态的变化种板后 12h 时各组细胞形态的变化：空白组及溶媒组足细胞的胞体大，胞质丰富，足突量多，且结构明显，细胞间连接紧密。模型组足细胞胞体面积缩小，且足突结构可见回缩，细胞间连接较空白组细胞连接疏松。FK506 组足细胞数目多于模型组，细胞足突较模型组丰富，细胞间连接紧密。（如图 4.1.1）

细胞足突较模型组丰富，细胞间连接紧密。（如图 4.1.1）图 4.1.1 12 小时各组细胞形态学(倒置显微镜，x 200)24h 时各组细胞形态的变化：空白组及溶媒组足细胞的细胞密度明显增加，胞体大，胞质丰富，足突量多，且结构明显，细胞间连接紧密。模型组足细胞的细胞密度低于其他组，胞体面积缩小，且足突结构可见回缩，细胞间连接较空白组细胞连接疏松。FK506 组的细胞密度大于模型组，小于空白组，细胞足突较模型组丰富，细胞间连接紧密。（如图 4.1.2）空白组 溶媒组 模型组 KF506 组

图 4.2 各组足细胞活力足细胞活力对比，溶媒组与空白组比较无统计学差异，PP < 0.05；FK506 组与空白组比较，&P < 0.05；FK506 组与足细胞蛋白表达情况胞中 Nephrin 蛋白的表达 blot 检测 FK506 与 PAN 共同作用足细胞 48 小时表达，结果显示，溶媒组与空白组比较，足细胞 N

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本文编号：2806760