化疗对急性淋巴细胞白血病患儿肠道菌群代谢物影响的初步研究

发布时间：2020-09-18 18:03

　　目的:利用体外批量发酵模型模拟人体肠道,研究急性淋巴细胞白血病患儿(ALL)化疗期间肠道菌群对多种低聚寡糖的酵解情况。通过气相色谱仪检测粪便以及寡糖发酵后短链脂肪酸含量,探讨急性淋巴细胞白血病不同化疗时期肠道菌群紊乱与菌群代谢的相互关系,为早期急性淋巴细胞白血病患儿化疗时口服益生菌或者益生元提供临床依据。资料与方法:30例初诊未治急性B淋巴细胞白血病患儿,平均年龄5.12±2.82岁,男女之比为2:1,收集时期为CCCG-2015-ALL方案VDLP诱导疗程,根据粪便采集点分为化疗前组、化疗中组(骨髓抑制期:中性粒细胞0.5x109/L)、化疗后组(骨髓恢复期:中性粒细胞0.5x109/L,血小板80x109/L)。另外根据化疗中有无益生菌干预将该30例初诊未治ALL患儿分为益生菌干预组16例(其中,口服酪酸梭菌三联活菌散剂8例,口服复合乳酸菌胶囊6例,口服双歧杆菌三联活菌散剂2例,口服益生菌时间均为VDLP整个疗程,口服剂量为1/2成人剂量),益生菌未干预组14例。正常对照组为于我院儿保科体检正常儿童12例,平均年龄1.79±0.96岁,男女之比为1:1。收集并处理其粪便标本后,接种于分别含有FOS(低聚果糖)、MOS(低聚甘露糖)、INU(菊粉)、XYI(木糖醇)以及YCFA(不含任何碳水化合物)低聚糖培养基中发酵24小时后检测气体产生量,同时采集上清液测定短链脂肪酸(SCFAs)含量,应用SPASS 22.0对数据进行统计学分析。结果:一、未发酵粪便中,各组短链脂肪酸(SCFAs)含量比较1.ALL患儿三组未发酵粪便短链脂肪酸(SCFAs)含量与正常对照组比较化疗前组(n=30)总酸、乙酸、丙酸、丁酸含量均比正常对照组高,但无统计学差异(P0.05)。化疗中组(n=14)中,丙酸含量明显高于正常对照组(P0.05),化疗后组(n=14),总酸、乙酸、丙酸含量明显高于正常对照组(P0.05)。2.益生菌未干预组(n=14)未发酵粪便短链脂肪酸三组自身比较益生菌未干预组(n=14)未发酵粪便总量、乙酸、丙酸、丁酸含量在化疗前组、化疗中组、化疗后组中呈现先下降后上升趋势,经两两比较后,丁酸在化疗前组及化疗后组均明显高于化疗中组(P0.05),余短链脂肪酸两两比较后未见统计学差异(P0.05)。3.益生菌干预组(n=16)未发酵粪便短链脂肪酸(SCFSs)含量三组自身比较益生菌干预组(n=16)未发酵粪便总酸、乙酸、丙酸含量在化疗前组、化疗中组以及化疗后组三组中呈现不断上升趋势,而丁酸在三组中呈现先下降、后上升趋势,各短链脂肪酸含量在三组两两比较无计学差异(P0.05)。4.益生菌干预组(n=16)和益生菌未干预组(n=14)未发酵粪便短链脂肪酸(SCFAs)变化量比较益生菌干预组(n=16)在化疗前至骨髓抑制期总酸、乙酸及丁酸增加量(即化疗中组-化疗前组)较益生菌未干预组(n=14)明显增多(P0.05);骨髓抑制期至骨髓恢复期以及整个化疗期间短链脂肪酸(SCFAs)含量在两组中比较未见统计差异(P0.05)。二、粪便发酵后,各组短链脂肪酸(SCFAs)含量及产气比较1.ALL患儿三组粪便发酵后短链脂肪酸(SCFAs)含量以及气压值与正常对照组比较1.1短链脂肪酸(SCFAs):化疗前组和正常对照组相比,FOS培养基中,化疗前组总酸乙酸、丙酸含量明显低于正常对照组(P0.05),INU培养基中,化疗前组总酸和乙酸含量明显低于正常对照组(P0.05);化疗中组和正常对照组相比,YCFA培养基中,化疗中组乙酸和丁酸含量明显高于正常对照组(P0.05),XYI培养基中,化疗中组总酸含量明显低于正常对照组(P0.05),丁酸含量明显高于正常对照组(P0.05);化疗后组和正常对照组比较,YCFA培养基中,化疗后组乙酸含量明显高于正常对照组(P0.05)。1.2产气:化疗前组所有培养基气压值均较正常对照组低,经统计学分析,FOS、MOS、INU培养基中气压值明显低于正常对照组(P0.05);化疗中组几乎所有培养基(除FOS外)产生的气体量均较正常对照组低,经统计学分析,仅有MOS培养基气压值明显低于正常儿童组(P0.05);化疗后组与正常对照组所有培养基中气压值和正常对照组相比,均无统计学(P0.05)。2.益生菌未干预组(n=14)粪便发酵后短链脂肪酸(SCFAs)含量和产气三组自身比较2.1短链脂肪酸(SCFAs):INU培养基丁酸含量在化疗中组明显大于化疗前组(P0.05),XYI培养基丙酸含量化疗中组明显小于化疗前组(P0.05),余培养基中短链脂肪酸(SCFAs)两两相比均无统计学意义(P0.05)。2.2产气:FOS、MOS、INU培养基化疗前组、化疗中组、化疗后组气压值呈上升趋势,而YCFA以及XYI培养基气压值在三组中呈现上升后下降趋势。经统计学分析,FOS、INU培养基化疗中组气压值明显大于化疗前组(P0.05),化疗后组气压值明显大于化疗前组(P0.05);MOS培养基化疗后组气压值明显大于化疗前组和化疗中组(P0.05);余培养基气压值两两比较,均无统计学差异(P0.05)。3.益生菌干预组(n=16)粪便发酵后短链脂肪酸(SCFAs)含量和产气三组自身比较3.1短链脂肪酸(SCFAs):益生菌干预组YCFA、FOS、MOS、XYI培养基总酸、乙酸、丙酸、丁酸含量化疗前组、化疗中组、化疗后组均呈上升趋势。化疗中组与化疗前组相比:YCFA培养基总酸、MOS培养基丙酸、INU培养基总酸、INU培养基乙酸、INU培养基丁酸化疗中组含量均明显高于化疗前组(P0.05);化疗后组和化疗前组相比:YCFA培养基总酸、YCFA培养基乙酸、YCFA培养基丙酸、MOS培养基乙酸、MOS培养基丙酸、MOS培养基丁酸、XYI培养基总酸、XYI培养基乙酸化疗后组含量均明显高于化疗前组(P0.05);化疗后组和化疗中组相比:各培养基中各种短链脂肪酸含量均未见明显差异(P0.05)。3.2产气:化疗中组与化疗前组相比:FOS、MOS以及INU培养基气压值化疗中组明显高于化疗前组(P0.05);化疗后组和化疗前组相比:仅MOS培养基气压值化疗后组明显大于化疗前组(P0.05);化疗后组和化疗中组相比:各培养基产气量均未见明显统计学差异(P0.05)。4.益生菌干预组(n=16)和益生菌未干预组(n=14)粪便发酵后短链脂肪酸(SCFAs)以及产气变化量比较4.1短链脂肪酸(SCFAs):益生菌干预组YCFA培养基丙酸、XYI培养基总酸和丙酸化疗前至骨髓抑制期增加量(即化疗中组-化疗前组)明显高于益生菌未干预组(P0.05)。益生菌干预组YCFA培养基和XYI培养基整个疗程(即化疗后组-化疗前组)总酸、丙酸增加量明显高于益生菌未干预组(P0.05)。骨髓抑制期至骨髓恢复期短链脂肪酸变化量两组未见统计学差异(P0.05)。4.2产气:化疗前至骨髓抑制期、骨髓抑制期至骨髓恢复期以及整个疗程气压值变化量益生菌干预组和益生菌未干预组两组未见统计学差异(P0.05)。三、MOS培养基丁酸在各个组中量均较其他培养基高(化疗中组XYI除外),化疗前组MOS培养基丁酸量明显高于FOS培养基和INU培养基(P0.05),化疗中组MOS培养基丁酸量明显高于YCFA培养基(P0.05)。结论:1.ALL患儿化疗前粪便短链脂肪酸(SCFAs)含量较正常儿童高,经发酵后几乎所有培养基化疗前粪便短链脂肪酸(SCFAs)含量较正常儿童低,提示急性淋巴细胞白血病可造成肠道菌群紊乱或者肠道粘膜受损。2.ALL患儿粪便中短链脂肪酸(SCFAs)含量随着化疗进行呈先下降后上升趋势,经发酵后几乎所有培养基短链脂肪酸(SCFAs)含量随着化疗进行呈上升趋势,提示化疗可对肠道菌群造成影响。3.益生菌干预组未发酵粪便随着化疗的进行,短链脂肪酸(SCFAs)增加量较益生菌未干预组多,且经发酵后,所有培养基益生菌干预组短链脂肪酸(SCFAs)增加量较益生菌未干预组多,提示口服益生菌可在肠道内存活,并且可能会促进某种有益菌群生长。4.正常对照组、化疗前组、化疗中组、化疗后组中,丁酸在MOS(低聚甘露糖)中产生的丁酸均高于其他低聚糖培养基,提示以MOS(低聚甘露糖)作为发酵底物,可以产生更多的对人体有益的丁酸。5.测定粪便及低聚糖体外发酵模型中的SCFAs及气体含量可能有助于提供早期为急性淋巴细胞白血病患儿口服益生菌或者益生元的临床依据。
【学位单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R733.71

【参考文献】