SREBP-2-LDLr途径在IgAN儿童肾脏脂质沉积的作用机制研究

发布时间：2020-09-25 16:44

　　第一部分重庆医科大学儿童医院近15年住院的泌尿系统疾病谱变迁目的:了解重庆医科大学附属儿童医院15年来泌尿系统疾病谱的变化情况。方法:回顾性分析1993年1月1日至2007年12月31日泌尿系统疾病住院患儿资料。结果:泌尿系统疾病住院数逐年上升,男女比例=2.49:1,7~14岁患儿最多(3522例次,占50.14%);原发性肾小球疾病(PGD)所占比例最大,但比例呈下降趋势,继发性、遗传性肾小球疾病所占比例呈升高趋势;紫癜性肾炎、IgA肾病、间质性肾炎构成比呈显著上升趋势;孤立性血尿呈下降趋势;泌尿系先天畸形、肾/尿路积水、结石住院数呈现上升趋势。结论:重庆医科大学附属儿童医院泌尿系统疾病谱在15年中发生变迁。第二部分SREBP-2-LDLr途径在IgAN病人血清共培养系膜细胞脂质沉积中的作用初探目的:研究在不同IgAN患者血清环境中,系膜细胞增殖、脂质沉积情况,以及脂质沉积情况与LDLr、SREBP-2表达的关系。方法:IgAN患者血清与人肾脏系膜细胞(HMC)共培养,MTT法检测系膜细胞增殖情况,油红O染色检测系膜细胞内脂肪沉积情况,实时荧光定量RT-PCR技术检测系膜细胞内LDLr、SREBP-2 mRNA表达,免疫组织化学技术检测LDLr、SREBP-2蛋白表达,ELISA检测细胞培养上清IL-1β、TGF-β1含量。结果:肾综IgAN组脂质沉积明显高于非肾综和正常儿童组(P0.05);LDLr、SREBP-2 mRNA、蛋白表达也明显高于非肾综和正常儿童组(P0.05);肾综IgAN组24h细胞培养上清IL-1β、TGF-β1含量高于非肾综组和正常儿童组(P0.05);非肾综和正常儿童组之间无明显差别(P0.05)。结论:肾综型IgAN血清可造成肾脏系膜细胞大量脂质沉积,其可能通过刺激系膜细胞分泌IL-1β和TGF-β1等炎症因子而打破SCAP-SREBPs-LDLr反馈调节系统,上调SREBP-2、LDLr表达,从而大量摄取脂质造成脂质在细胞内沉积。第三部分SREBP-2-LDLr途径在IgAN儿童肾脏脂质沉积的作用目的:比较不同临床类型IgAN患儿肾脏apoB100、LDLr和SREBP-2的表达情况,寻找容易出现脂质沉积的IgAN临床类型,并探讨脂质沉积与SREBP-2-LDLr途径的关系。方法:收集11例肾综型IgAN、32例非肾综型IgAN及4例正常肾组织标本,免疫组化法检测各组肾组织内apoB100、LDLr、SREBP-2的表达。结果:肾综型IgAN apoB100阳性表达率高于非肾综型IgAN和正常对照组;apoB100阳性表达的病例LDLr、SREBP-2的表达高于apoB100非阳性表达的病例;LDLr、SREBP-2的表达与apoB100的表达呈显著正相关(r=0.671,r=0.562,P 0.05)。结论:肾病综合征型IgAN比非肾病综合征型IgAN更易存在脂质在肾组织的沉积,可能通过上调的SREBP-2-LDLr的表达,造成对脂质的大量摄取而使脂质沉积于肾组织内。
【学位单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2010
【中图分类】：R726.9
【部分图文】：

溶解曲线,和峰,油红,系膜细胞

图 2-2 油红 O 染色结果Figure 2-2 IOD value of stating with Oil Red O in HMCsaP＜0.05 vs 空白对照组；bP＜0.05 vs 正常儿童组；cP＜0.05 vs 非肾综 IgAN 组2.3 荧光定量 PCR 检测系膜细胞 SREBP-2、LDLr mRNA 表达以β-actin 为参照，定量分析各组 LDLr、SREBP-2mRNA 表达水平，结果显示各组有一定量的 LDLr、SREBP-2 表达，肾综 IgAN 组表达明显高于正常儿童组和非肾综IgAN组（P＜0.05），非肾综IgAN组和正常儿童组相比无显著差别（P>0.05），见表 2-4，图 2-4。（1）溶解曲线：如图 2-3 所示，提示 PCR 扩增特异性增高（Tm 值 SREBP2:82.5℃, LDLr:83℃, β-actin：83.5℃）

反馈调节系统,脂质,脂滴,内质网

LDLr 表达高于正常儿童组和非肾综 IgAN 组，这提示肾综型 IgAN 患者血清中可能存在其他因素将 SCAP-SREBPs-LDLr 反馈调节系统打破， SREBP-2、LDLr 高表达，大量内吞脂质，造成脂滴在细胞内大量沉积。

复合物,细胞核,反馈调节系统,脂质

能存在其他因素将 SCAP-SREBPs-LDLr 反馈调节系统打破， SREBP-2、LDLr 高表达，大量内吞脂质，造成脂滴在细胞内大量沉积。图 2-8 当胞内胆固醇水平降低时，SCAP-SREBPs 复合物从内质网（ER）转移至高尔基体（Golgi），SREBPs 裂解进入细胞核内，促进 LDLr 基因的转录。

【参考文献】