ABCB11和ATP8B1基因突变在低GGT进行性肝内胆汁淤积症中的意义

发布时间：2020-10-01 19:06

　　 肝内胆汁淤积性肝病是儿童期肝病的重要类型,大部分预后良好,但也有少数会持续进展为肝硬化和肝功能衰竭。进行性家族性肝内胆汁淤积症(Progressive Familial Intrahepatic Cholestasis,PFIC)是导致部分肝内胆汁淤积患儿肝病持续进展的重要原因之一。临床上根据GGT水平是否升高可分为正常或低GGT和伴GGT水平升高两种临床表型。近年来,基于分子医学的进步已明确表现为正常或低GGT的PFIC至少又可分为两种:由ATP8B1基因突变引起的PFIC1和由ABCB11基因突变引起的PFIC2。此外,这两种基因也分别是引起良性再发性肝内胆汁淤积症(Benign Recurrent Intrahepatic Cholestasis,BRIC)1型和2型的致病基因。PFIC1和PFIC2的临床表现类似,如新生儿期或婴儿期起病,临床表现为黄疸、瘙痒、生长发育迟缓,血生化表现为结合胆红素、转氨酶、胆汁酸升高,GGT始终在正常范围等。且这两种疾病发展均较迅速,大多数患儿在成人之前会发展为肝硬化和肝功能衰竭。目前基因分析是鉴别这两种疾病最好的方法。 ATP8B1基因位于人类染色体18q21-22,编码P4P型ATP酶,即FIC1蛋白,该蛋白在人体的多个器官包括肝脏、胰腺和小肠等均有表达。ATP8B1基因突变所致的FIC1蛋白缺陷引起PFIC1的机制目前还不清楚。ABCB11基因位于人类染色体2q24-31,编码ATP依赖性胆盐输出泵(Bile Salt Export Pump,BSEP),该蛋白是将胆盐由肝细胞排入毛细胆管的主要载体,是形成胆汁流的重要驱动力,在人类尚未发现替代途径存在。ABCB11基因突变导致的BSEP蛋白缺陷会使胆盐分泌障碍,淤积于肝细胞内的胆汁酸会对肝脏产生毒害作用。ATP8B1和ABCB11基因突变引起的PFIC在美国、欧洲、阿拉伯地区及我国台湾均有病例报道,但在中国大陆还未曾见过报道。在中国大陆肝内胆汁淤积症患儿中是否存在ATP8B1和ABCB11基因突变还不清楚。本研究的目的是明确这两种基因突变在中国大陆临床表现为低GGT进行性肝内胆汁淤积患儿中是否存在并明确其突变特征。 第一部分 ABCB11基因突变在低GGT进行性肝内胆汁淤积症中的意义目的明确ABCB11基因突变在中国大陆低GGT进行性肝内胆汁淤积症中是否存在及其突变特征。 方法2004.1至2007.7,复旦大学附属儿科医院儿童肝病中心诊治的24例临床表现为低GGT进行性肝内胆汁淤积患儿为研究对象。通过PCR和直接测序的方法对这部分患儿ABCB11基因27个参与蛋白编码的外显子及邻近序列进行检测。通过复习病史分析患儿的肝脏病理和临床表现。 结果7例患儿检测到ABCB11基因突变,共12个突变位点。其中包括3个无义突变、6个错义突变、2个剪切位点突变和1个发生在内含子区的突变,且这12个突变均是文献上未曾见报道的新突变。这24例患儿中16例曾做过肝穿刺活检,其中4例检测到ABCB11基因突变,且这4例患儿均表现出肝细胞巨细胞样变。12例没有检测到ABCB11基因突变的患儿中3例表现出肝细胞巨细胞样变。结论ABCB11基因突变是导致本组患儿发生低GGT进行性肝内胆汁淤积症的重要原因,且突变特征与国外不同。肝细胞巨细胞样变是ABCB11基因突变患儿区别于其他患儿的主要肝脏病理表现。肝脏病理学检查有助于诊断PFIC2,确诊还需进行基因检测。 第二部分 ATP8B1基因突变在低GGT进行性肝内胆汁淤积症中的意义 目的明确在中国大陆临床表现为低GGT进行性肝内胆汁淤积患儿中是否存在ATP8B1基因突变及其突变特征。 方法2004.1至2007.7,复旦大学附属儿科医院儿童肝病中心诊治的24例临床表现为低GGT进行性肝内胆汁淤积患儿为研究对象。其中5例因检测到存在ABCB11基因纯合或复合杂合突变而排除在外,对剩余19例无或仅存在一个ABCB11基因突变位点忠儿的ATP8B1基因所有参与蛋白编码的外显子及邻近序列进行PCR扩增并直接测序。复习病史比较ABCB11基因突变患儿及ATP8B1基因突变患儿的肝脏病理表现。 结果共在9例患儿中检测到10种ATP8B1基因突变类型。除错义突变1694N和无义突变R952X外其余均为新发现的突变类型。在9例ATP8B1基因突变患儿中4例检测到P209T和IVS6+5T＞G连锁突变,其中2例纯合子,2例杂合子。9例检测到ATP8B1基因突变的患儿中5例曾做过肝脏病理学检查,淤胆但不伴肝细胞的巨细胞样变是这些患儿的共同病理特征。 结论在中国大陆临床表现为低GGT进行性肝内胆汁淤积患儿中存在ATP8B1基因突变。连锁突变P209T和IVS6+5T＞G是该组研究对象的热点突变类型。与ABCB11基因突变患儿相比,ATP8B1基因突变患儿的肝脏病理很少出现肝细胞巨细胞变。 总结 1.ABCB11和ATP8B1基因突变是导致本组患儿发生低GGT进行性肝内胆汁淤积症的重要原因。 2.本组患儿的ABCB11和ATP8B1基因突变特征与国外人群不同,有其自己的突变特点。 3.P209T和IVS6+5T＞G连锁突变是该组研究对象ATP8B1基因的热点突变类型。 4.肝脏病理学检查有助于区分PFIC1和PFIC2。
【学位单位】：复旦大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2009
【中图分类】：R725.7
【部分图文】：

ACCACCACCTGTGr\.图1一14B:::戈 戈土土 {{{八八工工人、 、卜 卜 卜卜、、 、 、.、尸~~~图1一14C图1一14A为例20患儿基因测序图，3875位点出现杂合序列，即箭头示双峰C/A;B为其一母亲基因测序图，3875位点亦出现杂合序列，即箭头示双峰C/A;C为其父亲基因测序图，3875位点序列正常，即箭头示为C。讨论ABcBll基因突变呈世界性分布。在东南亚，日本【”，和中国台湾地区【“，曾有过该基因突变引起低GGT性进行性肝内胆汁淤积症的病例报道。在占世界人口1/5的中国大陆该基因突变所致的PFIC是否存在及其突变特征仍不清楚。本研究首次在中国大陆低GGT进行性肝内胆汁淤积患儿中检测到ABCBn基因突变

基因编码区的8种突变在ATPSBI基因中所处的位置

形成微腺管状结构，门管区纤维增生伴众多纤维间隔形成。图2一15例6(HE染色，放大倍数10*20)肝细胞弥漫性胆汁淤积伴毛细胆管扩张胆栓形成，门管区轻度炎症。讨论口前为止，已报道的ATPSBI基因突变类型已达70余种，不同种族之间甚至同一种族不同患者之间其突变类型也各不相同l3，’7一’91。chen等【’9]曾在4例发生AfPSBI基因突变的台湾患儿中发现5种突变类型，但除1694N外其余均有别于在西方人群中发现的突变类型。在中国大陆也存在低GGT进行性淤胆患儿，但还未见关于ATPSBI基因突变的报道

【引证文献】

相关硕士学位论文 前2条

1 韩洁;43例妊娠期肝内胆汁淤积症患者的并发症、妊娠结局的分析[D];山西医科大学;2012年

2 晏晓敏;ABCB11/BSEP相关性进行性家族性肝内胆汁淤积症的研究[D];华中科技大学;2012年

本文编号：2831882