大鼠带瓣血管冻存时间对其活性与Bax、Bcl-2基因表达的影响

发布时间：2020-10-16 05:03

　　 背景：先天性心脏病发病率占存活婴儿的6‰-8‰,其中复杂先天性心脏病占0.5‰-2‰。大量复杂先天性心脏病例需生物或人工材料,如同种带瓣血管,异种带瓣血管及其他类型的带瓣血管等,重建成右(左)室流出道得到纠治。同种带瓣血管因其结构自然,中心血流、抗反流、免疫原性低、不易形成血栓、不易附着细菌等优点,在复杂先天性心脏病治疗的应用范围越来越广。有活性的同种带瓣血管与无活性的人工带瓣血管及其他类型的血管相比,因其具有一定程度的细胞生长能力,远期瓣膜失功几率低,钙化狭窄发生几率低及血管的使用寿命时间长等特点,因此保存同种带瓣血管的活性是实验研究的方向。保存同种带瓣血管的活性关键是在带瓣血管的获取、处理、降温、保存及复温过程中尽量减少带瓣血管细胞的坏死和凋亡。作为促进细胞凋亡的Bax基因与抑制细胞凋亡的Bcl-2基因,已经有研究证实Bax基因表达可以促进在缺血再灌注损伤模型中心肌细胞的凋亡；而在诱导大鼠心肌凋亡的研究中Bcl-2基因的表达则减少了心肌细胞的凋亡。以往很多研究是通过检测葡萄糖代谢率等方法检测带瓣血管的活性,这些方法均是从细胞代谢水平来检测带瓣血管活性而不是基因与蛋白水平的检测方法,因此我们探讨在基因与蛋白水平检测带瓣血管经冻存不同时间后的活性。 目的：研究在大鼠带瓣血管低温保存不同时间活性及Bax和Bcl-2基因的表达情况,探讨基因检测是否能成为同种带瓣血管活性指标。 方法：80只wistar大鼠分为四组：新鲜血管20例(A组),冻存3个月血管20例(B组),冻存6个月血管20例(C组),冻存9个月血管20例(D组)。应用葡萄糖代谢法检测带瓣血管的代谢情况,链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(streptavidin peroxidase, SP)免疫组织化学法检测样本中的Bax、Bcl-2蛋白的表达情况。 结果： 1、光镜检查各组带瓣血管的三层结构均存在,弹性存在。A组和B组血管的内皮细胞层完整,连接紧密,脱落不明显,细胞核清楚可见,纤维层排列紧密,C组及D组内皮层出现局部分层,局部的细胞脱失,细胞连接不紧密,纤维层排列紧密。 2、各组间葡萄糖代谢率结果差别无统计学意义(P0.05)。 3、大鼠带瓣血管的Bax蛋白阳性率随着冻存时间的延长而增加,血管的Bcl-2蛋白阳性率与冻存时间长短无关。 结论： 1、经液氮保存3、6、9个月后的大鼠带瓣血管与新鲜的大鼠带瓣血管葡萄糖代谢率结果无显著性差异(P0.05),提示经冻存后带瓣血管活性存在。 2、在经冻存后带瓣血管Bax蛋白表达随时间的延长而增加统计学有显著性差异,提示随着冻存时间的延长,细胞凋亡增加,推测Bax基因可以做为检测同种带瓣血管活性的指标之一。 3、在各组中Bcl-2蛋白的阳性表达无显著性差异,提示Bcl-2基因表达的存在或高表达有可能是细胞能耐受冻存打击的原因之一。
【学位单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2010
【中图分类】：R725.4
【部分图文】：

(x’=7.033，P=0.008);C组与D组比较，差异无统计学意义(x’=3.135P=O.077);经线性趋势性检验，随冻存时间的延长，Bax蛋白的阳性表达率逐渐增高(xZ=12.927，P=0.000)。见表3，图1，附图5一8。表3各组大鼠带瓣血管Bax蛋白表达比较组别例数阳性数阳性率(%)尸值蘸蘸 蘸黝 黝蘸 蘸… …撇撇 撇绷缘继粼 粼溪策桨 桨姗姗东麓熬熬 熬 {{{{{lll}}}!!!{{{{{鬃鬃鬓薰馨馨熬翼馨 馨纂 纂黝纂 纂蘸 蘸瓢 瓢罐罐罐暴暴蘸蘸 蘸鬓籍蒸彝 彝翼 翼纂鬓鑫鬓 鬓姗 姗 姗 姗姗薰 薰薰委派袋派忍翠扮扮潇砚砚吸冲溺淤召终终冬紧定淡淡 淡 淡淡图1各组中Bax蛋白表达阳性率比较 Fig1ThePOsitiven欢 ecomP幼 sonofBaxProteinexPressionineachgrouP 4.Bcl一2蛋白在各组带瓣血管表达情况Bd一2蛋白在A组、B组、C组和D组的阳性表达率分别为25%、30%、20%和35%，经统计学处理，4组间阳性率比较，差异无统计学意义
【参考文献】

相关期刊论文 前8条

1 李建玲,朱建华,荆照政,陈主初,肖志强;毒蝇碱型乙酰胆碱受体经Ras-ERK-1/2信号通路上调Bcl-2和磷酸化Bad表达[J];生物化学与生物物理学报;2003年01期

2 张利萍;马会杰;布会敏;王妹玲;李茜;齐钊;张翼;;白藜芦醇甙减轻缺血/再灌注诱发的大鼠心肌细胞凋亡(英文)[J];生理学报;2009年04期

3 徐磊,赵晏,张鹏,黄庆恒,任沪平;液氮保存对人同种瓣组织代谢及活性的影响[J];西安医科大学学报;2002年01期

4 武忠;史敏科;邵峻;王强;陈保俊;曹彬;王东进;;液氮深低温保存同种带瓣管道移植治疗复杂先天性心脏病17例[J];中国组织工程研究与临床康复;2008年18期

5 王荣平,张殿堂,殷桂林;同种带瓣管道的研究进展[J];医学理论与实践;1999年03期

6 孙彦隽,刘锦纷,张海波,鲁亚南,丁文祥;冷冻速率对猪主动脉冷冻保存效果的影响[J];中华胸心血管外科杂志;2003年06期

7 赖应龙;同种瓣的生物活性与耐久性[J];中国胸心血管外科临床杂志;2002年04期

8 杨学辉,刘彦信,郑德先;Bcl-2抑制CD3∈分子介导的T淋巴细胞凋亡[J];中国医学科学院学报;1999年06期

本文编号：2842801