add3基因沉默与轮状病毒共同作用致小鼠胆道闭锁作用机制的探讨

发布时间：2020-10-21 22:04

　　 目的:研究add3基因在BA发病过程中的表达变化,探究add3基因在BA发生中的作用机制方法:饲养并繁殖SPF级别Balb/c小鼠,配对并记录雌鼠出现阴栓时间,实验组于孕12.5天经尾静脉注射add3-si RNA。小鼠出生12小时内,取新生鼠肝脏组织检测基因沉默效果。出生后新生小鼠腹腔注射RRV诱导BA发生,分别取7、14、21天肝脏组织进行HE、masson染色,western blot检测α-SMA、穿孔素、TNF-α表达情况与对照组进行比较。细胞实验进一步探究机制,提取小鼠胆管上皮细胞行add3基因沉默后,使用RRV病毒感染细胞,再与小鼠NK细胞共培养,检测NK细胞活性标志物并与对照组比较。结果:动物实验,对小鼠进行基因沉默后腹腔注射RRV,发现add3基因沉默的小鼠与野生型小鼠相比,TNF-α、穿孔素表达水平下降,21天时,小鼠肝脏纤维化程度更重。通过细胞实验发现add3基因沉默后被RRV感染的胆管上皮细胞与NK细胞共培养,NK细胞分泌的活性物质减少,杀伤能力减弱。结论:小鼠在体实验,RRV诱导add3基因沉默小鼠肝纤维化程度较非基因沉默小鼠更重。在体和离体实验中,add3基因沉默后,NK细胞在RRV感染发生后,分泌的活性物质减少。add3可能参与NK细胞免疫突触形成的过程,通过与NK细胞的相互作用,导致BA的发生。
【学位单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R725.7
【部分图文】：

a7天小鼠图片

b14天小鼠图片

图 1-1c 21 天小鼠图片表 1-1 小鼠 BA 发生率和 21d 生存率组名 小鼠总数 BA 数BA 发生率%21d 生存率%A 20 0 0 100B 8 0 0.00% 87.5%*C 20 14 70%* 35.0%*D 26 23 88.5%*△15.4%*△
【参考文献】

相关期刊论文 前1条

1 汪光蓉;张国元;杨健;唐中;唐恩洁;朱道银;;小干扰RNA(siRNA)对小鼠乙型肝炎病毒复制和表达影响的实验研究[J];中国现代医学杂志;2008年02期

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1 彭飞;新生小鼠NK细胞对Mφ细胞调控不足致胆道闭锁的机理研究[D];华中科技大学;2014年

本文编号：2850647