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孕酮干预对幼年大鼠反复惊厥后大脑皮质IL-18表达的影响

发布时间:2020-11-20 09:17
   目的:研究新生期反复惊厥对大鼠大脑皮质白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)表达的影响,以及孕酮干预后大脑皮质IL-18表达的变化,探讨其间可能存在的相关性。 方法:生后7天(Postnatal day 7,PN-7d)的Sprague-Dawley(SD)大鼠共96只,随机分成3组,每组32只,每组大鼠再随机分成四个时间点。惊厥组和孕酮干预组(简称干预组)每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作1次,每次持续30分钟,连续6天;孕酮干预组大鼠在致惊厥后再给予肌肉注射孕酮(16mg/kg);对照组同样操作但不吸入三氟乙醚,不给予肌肉注射孕酮。分别于PN-13d(末次惊厥后1天,afterrecurrent seizure day 1,ARS-1d)、PN-15d(末次惊厥后3天,ARS-3d)、PN-19d(末次惊厥后7天,ARS-7d)及PN-75d取每组大鼠各8只,取脑组织,分别采用免疫组织化学染色方法和Western-Blot方法观察大鼠大脑皮质中IL-18的表达。 结果:①免疫组织化学染色结果显示:IL-18主要在细胞胞浆中表达,在对照组大鼠中,大脑皮质有少量IL-18蛋白表达。惊厥组大脑皮质IL-18蛋白的表达较对照组在ARS-1d开始升高,在ARS-7d达到高峰,后逐渐下降,在PN-75d大脑皮质IL-18蛋白表达较对照组仍升高,惊厥组大鼠大脑皮质IL-18蛋白的表达与对照组比较显著上升,有统计学意义(P<0.05)。孕酮干预组各时间点大鼠大脑皮质IL-18蛋白的表达较惊厥组明显下降,有统计学意义(P<0.05)。②Western-Blot结果揭示:ARS-1d及ARS-3d大脑皮质细胞胞浆IL-18蛋白结果无显示。ARS-7d、PN-75d大脑皮质IL-18蛋白表达能用Western-Blot测出,结果显示:ARS-7d及PN-75d惊厥组大脑皮质细胞胞浆IL-18蛋白的表达较对照组明显上升,有统计学意义(P<0.05)。孕酮干预组大脑皮质IL-18蛋白的表达较惊厥组显著性下降,有统计学意义(P<0.05)。 结论:(1)反复惊厥可使大鼠大脑皮质IL-18的表达增加。 (2)孕酮可降低反复惊厥后大脑皮质炎症因子IL-18的表达,提示孕酮对幼鼠惊厥性脑损伤有保护作用。
【学位单位】:中南大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2009
【中图分类】:R720.597
【部分图文】:

曲线,回归方程,标准品,标准曲线


smg/而、2.smg/llil、1.25m岁nil,在?=280nm测定各标准品吸光度(A280nm),制作蛋白浓度标准曲线,建立回归方程,依次测定各样品A280nm,经回归方程求出相应蛋白浓度(图2)。

大脑皮质,光密度值,大鼠


从S一ldARS一3dARS一7dP卜75d图3大鼠大脑皮质IL一1昧达的累积光密度值Fig.3TbeAODoflls户rO贻in加“城惫口la旅权沉ofratsstem,Blot结果S一ld及ARS一d的大脑皮质胞浆中的IL~18不能用此法测出。检测到几.18的表达,惊厥组大脑皮质的几一18表达较对照组显义(尸叱0.01)。用孕酮干预后的大鼠,大脑皮质IL一18的表达较统计学意义(见表2)。表2各组大鼠大脑皮质胞浆中118蛋白表达的灰度值(护吕,万士S,%T曲k泛Tb。孚恻v目ucsofT址。甲吹裂以班of几.18Pr砒inin“成加址。滩让沃ARS.ldAR冬3dAR孚7d

灰度值,蛋白表达,大脑皮质,大鼠


从S一ldARS一3dAI石ee7dPN‘75d图4大鼠大脑皮质几.18蛋白表达的灰度值Fig.4T七e沙叮v日训路oflls林de加in“沈加公c创血沈ofrais
【参考文献】

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