L-ficolin基因第八外显子多态性与儿童反复呼吸道感染相关性研究
发布时间：2020-12-14 05:43
目的:反复呼吸道感染（recurrent respiratory tract infection RRTI）是儿童期常见病,其发病与多种因素有关,而免疫功能状态尤受关注。近年固有免疫系统中的免疫分子L-ficolin与RRTI的关系研究日益增多。L-ficolin是脊椎动物和无脊椎动物体内广泛存在的寡聚蛋白,有调理素作用,它包括一个胶原样结构域和一个纤维素样结构域（fibrinogen-like domain,FBG）。通过纤维素样结构域L-ficolin可以和革兰氏阳性及阴性细菌[如化脓性链球菌、肺炎链球菌、鼠伤寒沙门氏菌、大肠埃希杆菌]等含有N-乙酰葡糖胺（N-acetylglucosamine GlcNAc）糖配基的微生物结合,激活MBL-相关丝氨酸蛋白酶-1、2（MBL-Associated Serine Proteases MASP-1,2）,经过甘露聚糖结合凝集素（mannan binding lectin MBL）途径激活补体系统,最终消灭病原体,是人体抵御感染第一道防线中的重要免疫分子。编码L-ficolin的基因（Ficolin 2 gene FCN2）位于9q34染...
【文章来源】：苏州大学江苏省
【文章页数】：39 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Ficolin和MBL结构示意图
51.2.2.1 碱基淬灭探针技术：碱基淬灭探针技术的设计方案见图2。探针5’或3’末端标记荧光基团6-羧基荧光素(6-carboxyfluorescein, FAM)。FAM标记在5’端时，探针3’端需用磷酸基团封闭（表2）。当PCR结束时，由于碱基淬灭探针与靶DNA序列在较低温度条件下（如30oC）杂交，FAM发出的荧光被邻近的碱基（A,T,C或G）淬灭（图2a）；当温度缓慢升高时，探针融解脱离靶DNA，从而导致荧光突然大量增加（图2b）。荧光增量变化最大时的温度即为解链温度（melting temperature TM）。靶序列基因未发生突变（野生型），与探针完全结合，解离时所需温度较高（TM值较大）；靶序列基因发生突变（突变型），与探针结合欠紧密，解离时所需温度较低（TM值较小）
值较大）；靶序列基因发生突变（突变型），与探针结合欠紧密，解离时所需温度较低（TM值较小），因此突变型基因的TM值与野生型基因的TM值明显不同，由此将不同基因型区分开来。根据温度-实际荧光增量变化值所绘图如图3，该图不能形象的反应上述变化，于是我们采用荧光强度对温度的一次负倒数[-d(F1)/dT]图 2 碱基淬灭探针技术检测 SNP 原理图光荧温度图 3 温度-荧光增量变化图
本文编号：2915924
【文章来源】：苏州大学江苏省
【文章页数】：39 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Ficolin和MBL结构示意图
51.2.2.1 碱基淬灭探针技术：碱基淬灭探针技术的设计方案见图2。探针5’或3’末端标记荧光基团6-羧基荧光素(6-carboxyfluorescein, FAM)。FAM标记在5’端时，探针3’端需用磷酸基团封闭（表2）。当PCR结束时，由于碱基淬灭探针与靶DNA序列在较低温度条件下（如30oC）杂交，FAM发出的荧光被邻近的碱基（A,T,C或G）淬灭（图2a）；当温度缓慢升高时，探针融解脱离靶DNA，从而导致荧光突然大量增加（图2b）。荧光增量变化最大时的温度即为解链温度（melting temperature TM）。靶序列基因未发生突变（野生型），与探针完全结合，解离时所需温度较高（TM值较大）；靶序列基因发生突变（突变型），与探针结合欠紧密，解离时所需温度较低（TM值较小）
值较大）；靶序列基因发生突变（突变型），与探针结合欠紧密，解离时所需温度较低（TM值较小），因此突变型基因的TM值与野生型基因的TM值明显不同，由此将不同基因型区分开来。根据温度-实际荧光增量变化值所绘图如图3，该图不能形象的反应上述变化，于是我们采用荧光强度对温度的一次负倒数[-d(F1)/dT]图 2 碱基淬灭探针技术检测 SNP 原理图光荧温度图 3 温度-荧光增量变化图
本文编号：2915924
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