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肺表面活性物质相关蛋白A1在甲醇酵母中的表达与纯化

发布时间:2020-12-17 14:36
  呼吸窘迫综合征(RDS)是导致早产儿死亡的主要因素并与一定的遗传背景有关。PS替代治疗是唯一有效的治疗手段。与RDS同样,肺表面活性物质(PS)的功能或成分的改变与其它呼吸系统疾病相关;如成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、特异性肺纤维化(IPF)和肺部感染。目前临床使用的PS主要为动物肺组织和人羊水中提取物,价格昂贵,不能满足临床的需要,因此人工合成磷脂和基因工程产物生产PS将是获得PS的最佳途径。 PS是由肺Ⅱ型细胞合成与分泌的一种脂蛋白复合物,肺表面活性物质相关蛋白(SP-A)是PS中含量最丰富的蛋白质,有多种生理功能。SP-A基因定位于染色体10q21-23,由两个功能基因SP-A1、SP-A2和一个假基因组成,两种基因在核苷酸水平有94%的同源性,基因产物有97%的同源性。SP-A单体由248个氨基酸组成,相对分子量约为26~38kDa。 甲醇酵母作为单细胞真核生物,既具有大肠杆菌或酿酒酵母的繁殖快、易于培养和便于基因工程操作的特性,又具有高等真核表达系统的蛋白质折叠和翻译后加工功能。并且外源蛋白质表达水平高,还能分泌外源蛋白质到培养夜中,便于蛋白质的纯化。因此,最近... 

【文章来源】:南方医科大学广东省

【文章页数】:72 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

肺表面活性物质相关蛋白A1在甲醇酵母中的表达与纯化


图I超晗比较圈8%SDSPAGE厦液:2扭涟液:

限制性酶切


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酵母染色体,重组子,体重,质粒


图2pPIe:生.SK/sP一人z和pple3.SK的民RI户192.PCRofpPIC:亏.SK/5尸一AlandpPIC3.SK1.8DNAm全一rk。改;2.:3spa重组子Reeombinantp一,IC:,.SK/SP一AI;4.5空载体重组子pPIC3.砍;6,7质粒pPIC3.SK/SP一AI2,4.6PrimerofAOXI:3.5,7PrimerofSP一AIgene图3酵母染色体拷贝整合菌株的筛选.,.

【参考文献】:
期刊论文
[1]人肺表面活性物质结合蛋白A基因组克隆及亚克隆[J]. 姬毅,封志纯,黄建生,任大明.  中国儿童保健杂志. 2000(01)



本文编号:2922211

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