婴儿双歧杆菌介导HSV-tk/GCV对裸鼠肾细胞癌的治疗作用及对NF-kB活性影响

发布时间：2020-12-26 18:02

　　目的:证实婴儿双歧杆菌（Bifidobacterium infantis，BI）介导单纯疱疹病毒胸苷激酶（Herpes simplex virus thymidine kinase, HSV-TK）/丙氧鸟苷（Ganciclovir, GCV）自杀基因系统对裸鼠肾癌的治疗作用，检测其诱导裸鼠肾癌组织细胞的凋亡及对NF-KB信号通路的影响。方法:裸鼠皮下荷瘤肾癌模型采用引瘤后原代细胞培养注射细胞悬液法建立，并随机分为BI-pGEX-TK/GCV组（重组质粒组）、BI-pGEX-5X-1/GCV组（空质粒组）、BI/GCV组（空双歧杆菌组）和生理盐水/GCV对照组（生理盐水组）。分别经尾静脉注射BI-pGEX-TK、BI-pGEX-5X-1、BI和生理盐水，同时腹腔注射GCV，4周后，称取裸鼠重量及肿瘤质量。各组肿瘤细胞凋亡情况采用TUNEL法检测，各组肿瘤组织Rel A、Caspase-3mRNA及蛋白表达水平运用qRT-PCR、Western blotting技术检测。结果:（1）BI-pGEX-TK/GCV组荷瘤裸鼠体重明显高于其余三组（p=0.006<0.01），肿瘤组织质量... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

各组荷瘤裸鼠肾癌组织病理切片HE×200

C: empty bifidobacterium infantis group D: normal saline group图 2 各组荷瘤裸鼠肿瘤组织凋亡 TUNEL 染色×200Fig.2 TUNEL assay in nude mice RCC model ×2002.4 荷瘤裸鼠肾癌组织中 Rel A、Caspase-3 mRNA 表达水平各组 Rel A、Caspase-3 Ct 值见表 3，相对表达量根据公式 2-△ △ Ct计算。重质粒组 Rel A mRNA 表达量明显低于其余三组（p<0.05），空质粒组、空双歧杆组、生理盐水组之间比较，Rel A mRNA 表达量无统计学差异（p>0.05）；重组粒组 Caspase-3 mRNA 表达量明显高于其余三组（p<0.05），空质粒组、空双歧菌组、生理盐水组之间比较，Caspase-3 mRNA 表达量无统计学差异(P>0.05)。3)表 3 荧光定量 PCR 各组 Ct 值Tab.3 Ct value of qRT-PCR of each groupGene BI-TK BI-pGEX-5X-1 BI NS

【参考文献】：
期刊论文
[1]婴儿双歧杆菌介导HSV-TK/GCV自杀基因治疗系统对大鼠膀胱癌组织细胞凋亡及Fas/FasL表达的影响[J]. 喻备,王亚荣,殷祥瑞,唐伟.  中国医科大学学报. 2012(10)
[2]mtHSP70/HSV-tk重组沙门菌抗小鼠黑色素瘤的作用[J]. 曾曙光,刘启才,王素文,彭细毛,章锦才,张积仁.  南方医科大学学报. 2012(01)
[3]两歧双歧杆菌在荷瘤鼠模型中的靶向定植及对巨噬细胞的免疫激活[J]. 江虹锐,鲁志刚,马玉彦,刘宁.  肿瘤. 2009(08)
[4]3种建立人肾癌皮下荷瘤裸鼠模型方法比较[J]. 郑宏祥,毛立军,郝林,梅冬冬,孙方浩,陈家存,孙晓青,郑骏年.  徐州医学院学报. 2007(04)
[5]Antitumor effect of cytosine deaminase/5-fluorocytosine suicide gene therapy system mediated by Bifidobacterium infantis on melanoma[J]. Cheng YI~2,Ying HUANG~3,Zhi-ying GUO~3,Shu-ren WANG~(3,4)~2Cancer Center,West China Hospital,Sichuan University Chengdu,610041,China;~3Department of Pathophysiology,West China School ofPreclinical and Forensic Medicine,Sichuan University,Chengdu 610041,China.  Acta Pharmacologica Sinica. 2005(05)



本文编号：2940197