缺氧缺血脑损伤恢复期神经细胞的凋亡机制及N-乙酰半胱氨酸的治疗作用

发布时间：2021-01-19 01:20

　　第一部分凋亡在三日龄大鼠缺氧缺血脑损伤恢复期的作用以及远期预后目的:围产期损伤后神经细胞持续凋亡是新生儿缺氧缺血性脑损伤（hypoxicischemic brain injury,HIBI）远期预后不良的机制之一,目前对于损伤后恢复期神经细胞凋亡的作用和机制研究较少。本研究通过3日龄大鼠缺氧缺血脑损伤模型,评估大脑损伤的细胞类型和凋亡基因在损伤后的持续表达,并通过免疫组织学、影像学和行为学评估大鼠成年期预后。方法:通过结扎右侧颈总动脉合并缺氧（6-7%）2.5小时,建立3日龄SD大鼠缺氧缺血脑损伤模型（HI组n=52,对照组n=41）。应用Oligo GEArray^?凋亡基因芯片比较脑损伤后12小时与损伤后7天凋亡基因表达的差异;应用免疫组织化学染色检测肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）及其死亡受体、Caspase-3在脑组织中的表达;大鼠成年后在42日龄进行大脑磁共振成像检查,44日龄采用Morris水迷宫测试其学习和空间记忆能力,48日龄进行MBP染色评估大脑髓鞘化。结果:①3日龄大鼠缺氧缺血脑损伤后,未成熟的神经元和少突胶质细胞均发生损伤。损伤后恢... 

【文章来源】：复旦大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

大鼠在42口龄时头部MRI和皮质与纹状体区域描记法

HI组皮质和皮层下白质较稀疏，结构开始紊乱，细胞数量减少，核固缩细胞显著增多(胞质不完整，细胞形态异常，核深染圆形);拼服体失去规则纤维结构形态，细胞数量稀疏，胞核形态异常(见图1一3)。损伤后7口，右侧大脑半球相比左侧明显萎缩(见图1一ZB)，损伤侧皮层(绿色区域)显著小于对侧皮层(蓝色区域)，损伤侧可见巨大的梗塞灶;低倍镜视野下，脉络丛萎缩，结构紊乱，细胞数减少;与对照组比较，脑室带内细胞数量明显减少(图1一ZD)。H工组动物右侧与左侧比较，均有皮质变薄，细胞稀疏，排列紊乱。部分标本可见脑室扩大

01190GEArray⑧凋亡基因芯片共检测128个凋亡基因。在HI后12小时，HI组与对照组比较有9个基因上调，13个基因下调;在HI后7天有7个基因上调和7个基因下调(见表1一4，图1一4)。与HI后12小时比较，手术后7天基因表达上调基因包括Caspase凋亡途径相关的Caspase一1、2、3、6;与募集Caspase结构域相关的Apaf一1、Bel一10、CaspsapZ、Caspase一1和2、Nol一3、pyeard;与线粒体凋亡途径相关的Bel一2家族Bakl、Beenl、Bid3、Bnipl;DNA破坏诱导凋亡的Chekl;死亡诱导效应因子Cide一A;TNF胞内段相关死亡域Dap一3、TRADD、Myd88;TNF相关因子Tank;TNF及其受体家族的Tnfrsfllb(osteoprotegerin)、Tnfrsf21(DR6)、Tnfsf10(TRAIL)、Tnfsf13(APRIL);以及抗凋亡的Cflar、Dadl。下调的基因包括Bag3、Card6、Caspase一8、Dapkl、Mapksip、Tnfrsflb(TNF一RZ)，Tnfrsfs(CD30)。凋亡基因表达强度分布见图1一4。如图所示，损伤后7天与12小时凋亡表达强度有很大的差异，没有观察到凋亡基因在两个时间点均上调，仅Bcl家族的Bok基因在


本文编号：2986049