Tet2介导的DNA去甲基化在肾脏发育及肾脏疾病中的调控作用
发布时间：2021-01-22 16:35
肾脏疾病是影响儿童健康的重要疾病,其发病机制多复杂,易于复发,治疗棘手。近年来的研究发现,5-羟甲基胞嘧啶（5-hmC）介导的表观遗传学参与了多种生物学过程,但有关Tet2介导的DNA去甲基化在肾脏发育及肾脏疾病中的调控作用研究甚少。目的:既往研究表明5-hmC介导的表观遗传学调控在肾脏疾病中可能发挥重要作用,因此我们希望通过相关实验进一步研究该DNA去甲基化修饰参与肾脏发育及肾脏疾病的发生发展。方法:1.采用免疫荧光染色分别观察小鼠肾脏细胞、体外培养足细胞中5-hmC及Tet2的表达水平以及进一步qRT-PCR检测不同发育阶段野生型小鼠肾脏Tetl、Tet2和Tet3的表达水平。2.Tet2敲除后,采用dot blot检测肾脏不同发育阶段中5-hmC含量变化以及进一步研究Tet2敲除后,通过非靶标代谢组学分析及经IPA生物反应路径分析软件分析检测Tet2敲除对肾脏形态和功能方面的影响。3.最后与临床有机结合,通过免疫荧光染色观察5-hmC在人体肾脏中的表达以及qRT-PCR检测临床肾病综合征患者肾穿组织中Tetl、Tet2 mRNA的变化。结果:1.本实验验证了 5-hmC广泛存在于...
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．小鼠肾脏组织中５－ｈｍＣ染色（上图１?ＯＯｘ，下图２００ｘ）??
体外培养足细胞株，进行足细胞细胞多重免疫荧光染色。采用足细胞特异性??抗体Ｓｙｎａｐｔｏｐｏｄｉｎ作为足细胞的鉴定。Ｓｙｎａｐｔｏｐｏｄｉｎ主要分布在足细胞胞衆，呈放??射状分布。免疫荧光染色显示体外培养的足细胞基因组ＤＮＡ中含有５ｈｍＣ（图３）。??结果表明ＤＮＡ甲基化存在于足细胞中。??ＤＡＰＩ??５ｈｍＣ?Ｓｙｎａｐｔｏｐｏｄｉｎ?Ｍｅｒｇｅ??ｍｍｍｍ??■■■??图３．体外培养足细胞中５－ｈｍＣ染色（上图２００ｘ，下图６００ｘ）??２８??
正文结果??化成熟，胞质形状不规则、向四周伸展，有大量较细较长的足突形成，细胞呈“树??枝”状（图２Ｂ）。??■■??图２足细胞的培养，Ａ３３°Ｃ允许条件下培养生长的细胞１００Ｘ；?Ｂ３７°Ｃ非允许??条件下培养生长的细胞１００Ｘ??１．３体外培养足细胞中５－ｈｍＣ染色??体外培养足细胞株，进行足细胞细胞多重免疫荧光染色。采用足细胞特异性??抗体Ｓｙｎａｐｔｏｐｏｄｉｎ作为足细胞的鉴定。Ｓｙｎａｐｔｏｐｏｄｉｎ主要分布在足细胞胞衆，呈放??射状分布。免疫荧光染色显示体外培养的足细胞基因组ＤＮＡ中含有５ｈｍＣ（图３）。??结果表明ＤＮＡ甲基化存在于足细胞中。??ＤＡＰＩ??５ｈｍＣ?Ｓｙｎａｐｔｏｐｏｄｉｎ?Ｍｅｒｇｅ??ｍｍｍｍ??■■■??图３．体外培养足细胞中５－ｈｍＣ染色（上图２００ｘ，下图６００ｘ）??２８??
【参考文献】：
期刊论文
[1]IgA肾病组蛋白H3K4三甲基化和DNA甲基化基因修饰的相关性[J]. 齐素文,涂植光,戴勇,睢维国. 中国病理生理杂志. 2012(02)
[2]Ligands of Peroxisome Proliferator-activated Receptor Inhibit Homocysteineinduced DNA Methylation of Inducible Nitric Oxide Synthase Gene[J]. Yideng JIANG~(1*), Jianzhong ZHANG~1, Jiantuan XIONG~1, Jun CAO~1, Guizhong LI~1, and Shuren WANG~2 1 Department of Pathology, Ningxia Medical College, Yinchuan 750004. China;2 Department of Pathophysiology, West China College of Preclinical and Forensic Medical Sciences, Sichuan University, Chengdu 610041, China. Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 2007(05)
[3]Different Effects of Homocysteine and Oxidized Low Density Lipoprotein on Methylation Status in the Promoter Region of the Estrogen Receptor α Gene[J]. Yushan HUANG~1;Kejun PENG~2;Juan SU~1;Yuping HUANG~3;Yizhon XU~1;and Shuren WANG~1 ~1Department of Pathophysiology,West China School of Preclinic Medical Sciences & Forensic Medicine,Sichuan University,Chengdu 610041.China;~2Department of Laboratory Medicine,Chengdu Medical College,Chengdu 610500,China;~3Department of Biochemistry and Molecular Bilogy,Gannan Medical College,Ganzhou 341000,China. Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 2007(01)
[4]IgA肾病患者甘露糖结合蛋白基因多态性的功能研究[J]. 龚如军,刘志红,刘栋,黎磊石. 南京大学学报(自然科学版). 2001(05)
本文编号：2993557
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．小鼠肾脏组织中５－ｈｍＣ染色（上图１?ＯＯｘ，下图２００ｘ）??
体外培养足细胞株，进行足细胞细胞多重免疫荧光染色。采用足细胞特异性??抗体Ｓｙｎａｐｔｏｐｏｄｉｎ作为足细胞的鉴定。Ｓｙｎａｐｔｏｐｏｄｉｎ主要分布在足细胞胞衆，呈放??射状分布。免疫荧光染色显示体外培养的足细胞基因组ＤＮＡ中含有５ｈｍＣ（图３）。??结果表明ＤＮＡ甲基化存在于足细胞中。??ＤＡＰＩ??５ｈｍＣ?Ｓｙｎａｐｔｏｐｏｄｉｎ?Ｍｅｒｇｅ??ｍｍｍｍ??■■■??图３．体外培养足细胞中５－ｈｍＣ染色（上图２００ｘ，下图６００ｘ）??２８??
正文结果??化成熟，胞质形状不规则、向四周伸展，有大量较细较长的足突形成，细胞呈“树??枝”状（图２Ｂ）。??■■??图２足细胞的培养，Ａ３３°Ｃ允许条件下培养生长的细胞１００Ｘ；?Ｂ３７°Ｃ非允许??条件下培养生长的细胞１００Ｘ??１．３体外培养足细胞中５－ｈｍＣ染色??体外培养足细胞株，进行足细胞细胞多重免疫荧光染色。采用足细胞特异性??抗体Ｓｙｎａｐｔｏｐｏｄｉｎ作为足细胞的鉴定。Ｓｙｎａｐｔｏｐｏｄｉｎ主要分布在足细胞胞衆，呈放??射状分布。免疫荧光染色显示体外培养的足细胞基因组ＤＮＡ中含有５ｈｍＣ（图３）。??结果表明ＤＮＡ甲基化存在于足细胞中。??ＤＡＰＩ??５ｈｍＣ?Ｓｙｎａｐｔｏｐｏｄｉｎ?Ｍｅｒｇｅ??ｍｍｍｍ??■■■??图３．体外培养足细胞中５－ｈｍＣ染色（上图２００ｘ，下图６００ｘ）??２８??
【参考文献】：
期刊论文
[1]IgA肾病组蛋白H3K4三甲基化和DNA甲基化基因修饰的相关性[J]. 齐素文,涂植光,戴勇,睢维国. 中国病理生理杂志. 2012(02)
[2]Ligands of Peroxisome Proliferator-activated Receptor Inhibit Homocysteineinduced DNA Methylation of Inducible Nitric Oxide Synthase Gene[J]. Yideng JIANG~(1*), Jianzhong ZHANG~1, Jiantuan XIONG~1, Jun CAO~1, Guizhong LI~1, and Shuren WANG~2 1 Department of Pathology, Ningxia Medical College, Yinchuan 750004. China;2 Department of Pathophysiology, West China College of Preclinical and Forensic Medical Sciences, Sichuan University, Chengdu 610041, China. Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 2007(05)
[3]Different Effects of Homocysteine and Oxidized Low Density Lipoprotein on Methylation Status in the Promoter Region of the Estrogen Receptor α Gene[J]. Yushan HUANG~1;Kejun PENG~2;Juan SU~1;Yuping HUANG~3;Yizhon XU~1;and Shuren WANG~1 ~1Department of Pathophysiology,West China School of Preclinic Medical Sciences & Forensic Medicine,Sichuan University,Chengdu 610041.China;~2Department of Laboratory Medicine,Chengdu Medical College,Chengdu 610500,China;~3Department of Biochemistry and Molecular Bilogy,Gannan Medical College,Ganzhou 341000,China. Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 2007(01)
[4]IgA肾病患者甘露糖结合蛋白基因多态性的功能研究[J]. 龚如军,刘志红,刘栋,黎磊石. 南京大学学报(自然科学版). 2001(05)
本文编号：2993557
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/eklw/2993557.html
最近更新
教材专著
