miR-193a-3p、miR-200a-3p、miR-141-3p对大鼠H9C2心肌细胞中TGF-β2基因表达的影响

发布时间：2021-02-21 00:49

　　目的转化生长因子β（TGF-β）信号通路在心血管系统发育中具有重要作用。microRNA（miRNA）可通过与靶基因mRNA的3’端非编码区（3’-UTR）互补结合,负性调节靶mRNA的表达,参与基因转录后调控。miRNA通过调控TGF-β信号通路在心脏发育及心血管疾病中的作用尚不明确,本研究旨在探讨miR-193a-3p、miR-200a-3p、miR-141-3p对大鼠H9C2心肌细胞中TGF-β2表达的影响。方法1.生物信息学方法预测与TGF-β2基因可能存在靶向关系的miRNA。2.构建野生型和突变型TGF-β2基因3’-UTR载体,分别与miR-193a-3p mimics、miR-200a-3p mimics、miR-141-3p mimics共转染,采用双荧光素酶报告基因检测荧光素酶活性。3.miR-193a-3p mimics、miR-200a-3p mimics、miR-141-3p mimics分别转染至大鼠H9C2心肌细胞,RT-PCR检测转染效率及对TGF-β2 mRNA表达的影响,Western blot检测对TGF-β2蛋白表达的影响。结果1.生物信息学方法... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：41 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

pmiR-RB-REPORTTM报告基因载体结构意图

3' UGUAGCAAUGR5' ...CUGGAAGAA3' UGUAGCAA200a-3p、miR-141-3p 与 TGF示:iR-193a-3p mimics 组野生型其预测靶位点进行突变后，(图 3.1.2)。该结果表明，m点（第 1184-1191 位）结合**

.3 miR-141-3p 荧光素酶活性检测结野生型载体；TGF-β2 MUT1：突变型载体体 2(314-319) ； TGF-β2 MUT3：突变型载阴性对照； miR-141-3p ： miR-141-3p 过iR-200a-3p 对 TGF-β2WT 的报行突变后，突变型载体 TGF-β1 位）、TGF-β2 MUT3（第 97-1显的回复(图 3.1.4)。该结果表明点均没有明显的相互作用。


本文编号：3043597