儿童幽门螺杆菌抗生素耐药相关基因的研究

发布时间：2017-04-16 23:04

  本文关键词：儿童幽门螺杆菌抗生素耐药相关基因的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究背景：幽门螺杆菌(helicobacter pylori, Hp)不仅是成人慢性胃炎、十二指肠溃疡、胃癌、胃黏膜相关淋巴组织瘤等疾病的重要致病因素,而且与儿童慢性胃炎、十二指肠炎、消化性溃疡的发生发展密切相关。Hp感染是一个全球性的问题,全世界人群感染率为50%。根除Hp已被证明可以减少胃癌的发病率,提高溃疡愈合。但由于治疗中抗生素的不合理应用导致抗生素的耐药,成为根除治疗Hp失败的主要原因。针对Hp目前广泛使用的治疗方案包括标准三联疗法,包括克拉霉素,阿莫西林、灭滴灵这三种主要的抗生素。最近的研究表明,潜在的抗生素耐药性主要是由于Hp的遗传基因突变。因此,检测耐药的Hp的基因突变,可以避免儿童抗生素滥用以及之后的多次耐药。本研究旨在初步了解儿童Hp耐药情况,并对一些抗生素的耐药基因进行研究。既往的耐药研究中大多采用基于培养基的敏感性测试,但它们不能确定具体的基因型。随着快速基因测序技术的发展,应用PCR来检测Hp,更具有指导意义。本论文采用PCR的方法,研究儿童Hp耐药菌株和敏感菌株之间的遗传基因突变情况,以明确克拉霉素,灭滴灵和左氧氟沙星耐药Hp菌株的基因信息。目的：研究儿童Hp耐药株耐药特性与相关基因突变的联系,为儿童耐药Hp的进一步研究提供一定的理论依据。方法：从儿童胃黏膜样本中分离培养80株Hp为出发菌株,用PCR的方法分别扩增敏感和耐药株的相关耐药基因,其中克拉霉素耐药株扩增23 S rDNA上约280bp片段；灭滴灵耐药株扩增rdxA和frxA基因部分序列,左氧氟沙星耐药株扩增gyrA和gyrB基因部分序列。通过DNA测序和生物信息学分析相关基因的突变情况,研究基因突变与耐药特性的内在联系。结果：80例Hp菌株中,克拉霉素耐药29株,耐药比例达到36.2%,相关耐药基因23S rDNA突变呈无规则状态,A2056G. T 2095 C和T 2157C三个突变点出现频率最高,分别达到90%、93%和100%,但是在敏感株中同样出现了这些点突变。灭滴灵耐药58株,耐药比例72.5%,相关基因rdxA出现以G47A和T184G为主的突变点,个别菌株中出现G60A、C273T和C49T突变点,敏感株中同样出现了T184G突变点,但未见G47A的突变点；frxA基因在敏感株和耐药株中均出现了A48G突变点。左氧氟沙星耐药12株,耐药比例为15%,耐药株gyrA基因出现的D91Y突变未在敏感株中发现,而在敏感株和耐药株中均出现了N87K突变和无义突变。结论：克拉霉素耐药Hp的23 S rDNA突变呈无规则状态；灭滴灵耐药Hp的rdxA基因出现的G47A突变可能与耐药相关；左氧氟沙星耐药Hp的gyrA基因出现的D91Y的突变可能与耐药相关。
【关键词】：幽门螺杆菌 灭滴灵 克拉霉素 左氧氟沙星 耐药 基因
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R725.7
【目录】：

• 致谢4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 中英文缩略词表10-11
• 主要仪器设备11-13
• 1 前言13-15
• 2 对象与方法15-21
• 2.1 研究对象15
• 2.2 要试剂15
• 2.3 实验方法15-21
• 3 结果21-35
• 3.1 克拉霉素耐药基因23SrDNA突变情况21-24
• 3.2 灭滴灵耐药株rdxA和frxA基因突变情况24-30
• 3.3 左氧氟沙星耐药株gyrA和gyrB基因突变情况30-35
• 4 讨论35-37
• 5 结论37-38
• 参考文献38-42
• 综述42-54
• 参考文献48-54
• 作者简历及在学期间所取得的科研成果54

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 卢华君;赵忠艳;陈旺强;朱欢;朱小舟;潘彤彤;;儿童感染幽门螺杆菌的耐药性及治疗分析[J];中国全科医学;2015年31期

2 冯青;刘伟;苏楠;吴新荣;;纯阳正气胶囊抑制幽门螺杆菌作用研究[J];医药导报;2014年03期

3 Hafez Fakheri;Zohreh Bari;Mohsen Aarabi;Reza Malekzadeh;;Helicobacter pylori eradication in West Asia:A review[J];World Journal of Gastroenterology;2014年30期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 刘宇;荆花胃康胶丸及其拆方抗耐药幽门螺杆菌作用和机制研究[D];北京中医药大学;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前4条

1 徐艳秋;不同剂量抗生素治疗幽门螺杆菌的临床观察及经济学评价[D];石河子大学;2013年

2 薛国辉;幽门螺杆菌甲硝唑耐药相关rdxA基因突变特征及应用探讨[D];南昌大学医学院;2013年

3 朱晓艳;中医辨证用药联合“四联疗法”对慢性胃炎伴幽门螺杆菌感染的临床疗效观察[D];南京中医药大学;2014年

4 张新宇;序贯疗法治疗儿童幽门螺杆菌感染的依从性及其疗效分析[D];苏州大学;2014年

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本文编号：311853