miR-146a对新生大鼠缺氧缺血性脑病的作用及其机制

发布时间：2021-05-11 19:47

　　目的:探讨microRNA （miR）-146a对新生大鼠缺氧缺血性脑病（HIE）的影响及分子机制。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、HIE组、HIE+NC agomir组（新生HIE大鼠静脉注射NC agomir）和HIE+miR-146a agomir组（新生HIE大鼠静脉注射miR-146a agomir）4组,每组8只。利用实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测脑组织中miR-146a mRNA表达水平,苏木精-伊红（HE）染色检测脑损伤程度,酶联免疫吸附测定（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）、白介素-1β（IL-1β）的表达水平;将小胶质细胞均匀地分为4组:对照组、LPS组（LPS 10 mg/L诱导活化小胶质细胞4 h）、LPS+NC mimic组（用NC mimic转染LPS诱导活化的小胶质细胞）、LPS+miR-146a mimic组（用miR-146a mimic转染LPS诱导活化的小胶质细胞）。qPCR检测BV2细胞中miR-146a和Smad4 mRNA表达水平,MTT法检测BV2细胞活性,ELISA检测BV... 

【文章来源】：广西医科大学学报. 2020,37(07)

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 动物及细胞
    1.2 试验试剂
    1.3 试验仪器
    1.4 方法
        1.4.1 分组及新生HIE大鼠模型制备
        1.4.2 qPCR检测脑组织中miR-146a和Smad4 mRNA表达水平
        1.4.3 苏木精-伊红（HE）染色观察脑组织损伤情况
        1.4.4 ELISA检测TNF-α、iNOS、IL-1b水平
        1.4.5 BV2细胞的处理
        1.4.6 qPCR检测BV2细胞中miR-146a和Smad4mRNA表达水平
        1.4.7 MTT法检测BV2细胞活性
        1.4.8 ELISA检测BV2细胞中TNF-α、iNOS、IL-1b水平
        1.4.9 双荧光素酶报告验证miR-146a和Smad4的靶向关系
        1.4.1 0 Western blot检测BV2细胞中Smad4水平
    1.5 统计学方法
2 结果
    2.1 miR-146a过表达对TNF-α、iNOS、IL-1β水平及对脑组织的影响
    2.2 miR-146a过表达对BV2细胞存活率的影响
    2.3 miR-146a过表达对BV2细胞中炎症因子的影响
    2.4 HIE中miR-146a和Smad4的靶向关系
3 讨论



本文编号：3181999