呼吸道合胞病毒感染Balb/c乳鼠引起肺部Th17/Treg细胞比例失衡介导肠道免疫损伤和肠道菌群紊乱的研究
发布时间：2021-08-31 22:04
目的:呼吸道合胞病毒（RSV）是引起婴幼儿急性下呼吸道感染最常见的病原体,并且所引起的机体免疫反应与胃肠道微生物组成及功能的变化也息息相关。为了进一步探索RSV感染的发病机理和对肠道菌群的影响,我们建立了一个与婴幼儿免疫水平相似,易受病毒感染的乳鼠肺部感染模型,检测Th17、Treg细胞、相关炎症因子和肠道菌群的变化。本研究可为RSV感染的致病机理和机体肺-肠轴之间的联系提供新的见解,为RSV感染患儿的治疗思路提供新的认识。方法:用RSV病毒液滴鼻感染7日龄Balb/c乳鼠建立肺部感染模型,实验设立正常对照组,PBS对照组和病毒感染组,收集各组乳鼠肺、小肠、结肠和直肠。（1）HE染色观察肺部的病理学改变;（2）实时荧光定量PCR法（Real-time PCR）检测各组肺、小肠,结肠组织中RSV-F蛋白,ROR-γt和Foxp3 m RNA的表达变化;（3）酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组肺、小肠和结肠组织上清液中IFN-γ,IL-17,IL-22,IL-10和RegⅢγ含量的变化情况;（4）高通量测序检测直肠组织中菌群的变化。结果:（1）HE染色结果显示与正常组相比,随着病毒感染...
【文章来源】：安徽医科大学安徽省
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同实验组乳鼠的体重变化情况
安徽医科大学硕士学位论文263.2RSV感染后乳鼠肺组织肉眼观及肺病理切片结果如图2所示正常组乳鼠（A）两肺成均匀的粉白色，表面光滑，无肿胀及出血灶；RSV感染组（B）乳鼠两肺色暗红，弹性较差，可见片状充血。随后我们对正常组（3A）和病毒感染1~7天（3B~3H）的乳鼠进行肺病理检测，结果发现正常组乳鼠肺泡结构完整，肺泡腔清晰，肺泡间隔均匀一致，无增厚，无充血及炎性细胞的浸润。感染组乳鼠肺泡结构紊乱，肺泡间隔增厚，肺泡腔及肺间质可见炎性细胞浸润，并且在感染后第三天（3D）肺部炎症最为显著，随后开始逐渐好转，结果见下图3。图2、乳鼠肺组织肉眼观A：正常组乳鼠肺组织；B：RSV感染组乳鼠肺组织Fig2:MacroscopicobservationoflungtissueinsucklingmiceA:Lungtissueofnormalgroup;B:lungtissueofRSVinfectedgroup
安徽医科大学硕士学位论文27图3：乳鼠肺病理切片结果（HE×100）A：正常组乳鼠肺病理切片；B~H：RSV感染后1~7天肺病理切片Fig3:Resultsofpathologicalsectionoflunginsucklingmice（HE×100）A:Pathologicalsectionsoflungsinnormalgroup,B~H:pathologicalsectionsoflungs1-7daysafterRSVinfection3.3Real-timePCR检测正常对照组与PBS对照组肺肠组织中ROR-γt与Foxp3的mRNA水平如图4所示，PBS对照组肺肠组织中ROR-γt和Foxp3的mRNA水平与正常对照组无明显差异，结果不具有统计学意义，故阴性对照设置成功，后续实验分析将以正常对照组与RSV感染组为主。
【参考文献】：
期刊论文
[1]肠道菌群与Treg细胞/Th17细胞平衡[J]. 陈永,张靓,管剑龙. 现代中西医结合杂志. 2018(31)
[2]Th17/Treg失衡与毛细支气管炎发病关系的研究进展[J]. 何潇,吴福玲. 山东医药. 2018(37)
[3]Th17/Treg失衡与肺部疾病发病机制的研究进展[J]. 张奕,张兰英,欧阳瑶. 中国医药导报. 2017(35)
[4]肠道菌群与相关疾病[J]. 曹蕾,吴健. 微生物与感染. 2017(05)
[5]肠道和呼吸道菌群与肺部疾病的研究新进展[J]. 陈益民,沙建平,刘社兰,赵娜. 中国微生态学杂志. 2017(10)
[6]微生物组学与肠道肿瘤[J]. 陈慧敏,房静远. 生命科学. 2017(07)
[7]肠道菌群与代谢疾病关系的研究进展[J]. 许爱梅,张方华,商永芳. 齐鲁医学杂志. 2017(02)
[8]肠道菌群失衡诱发肠易激综合征的机制[J]. 欧枢,贾玉杰. 中国微生态学杂志. 2017(06)
[9]从肠肺微生态研究大肠与肺的相关性[J]. 徐贝贝,王炳元. 中国临床医生杂志. 2016(12)
[10]呼吸道合胞病毒疫苗增强性疾病小鼠模型的建立与评价[J]. 贾然,陆路,梁小珍,孙志武,谭令兵,徐梦华,苏犁云,徐锦. 微生物与感染. 2016(03)
硕士论文
[1]小儿RSV感染临床特点及其证型规律间相关因素的初步探讨[D]. 郑彬茹.山东中医药大学 2016
本文编号：3375699
【文章来源】：安徽医科大学安徽省
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同实验组乳鼠的体重变化情况
安徽医科大学硕士学位论文263.2RSV感染后乳鼠肺组织肉眼观及肺病理切片结果如图2所示正常组乳鼠（A）两肺成均匀的粉白色，表面光滑，无肿胀及出血灶；RSV感染组（B）乳鼠两肺色暗红，弹性较差，可见片状充血。随后我们对正常组（3A）和病毒感染1~7天（3B~3H）的乳鼠进行肺病理检测，结果发现正常组乳鼠肺泡结构完整，肺泡腔清晰，肺泡间隔均匀一致，无增厚，无充血及炎性细胞的浸润。感染组乳鼠肺泡结构紊乱，肺泡间隔增厚，肺泡腔及肺间质可见炎性细胞浸润，并且在感染后第三天（3D）肺部炎症最为显著，随后开始逐渐好转，结果见下图3。图2、乳鼠肺组织肉眼观A：正常组乳鼠肺组织；B：RSV感染组乳鼠肺组织Fig2:MacroscopicobservationoflungtissueinsucklingmiceA:Lungtissueofnormalgroup;B:lungtissueofRSVinfectedgroup
安徽医科大学硕士学位论文27图3：乳鼠肺病理切片结果（HE×100）A：正常组乳鼠肺病理切片；B~H：RSV感染后1~7天肺病理切片Fig3:Resultsofpathologicalsectionoflunginsucklingmice（HE×100）A:Pathologicalsectionsoflungsinnormalgroup,B~H:pathologicalsectionsoflungs1-7daysafterRSVinfection3.3Real-timePCR检测正常对照组与PBS对照组肺肠组织中ROR-γt与Foxp3的mRNA水平如图4所示，PBS对照组肺肠组织中ROR-γt和Foxp3的mRNA水平与正常对照组无明显差异，结果不具有统计学意义，故阴性对照设置成功，后续实验分析将以正常对照组与RSV感染组为主。
【参考文献】：
期刊论文
[1]肠道菌群与Treg细胞/Th17细胞平衡[J]. 陈永,张靓,管剑龙. 现代中西医结合杂志. 2018(31)
[2]Th17/Treg失衡与毛细支气管炎发病关系的研究进展[J]. 何潇,吴福玲. 山东医药. 2018(37)
[3]Th17/Treg失衡与肺部疾病发病机制的研究进展[J]. 张奕,张兰英,欧阳瑶. 中国医药导报. 2017(35)
[4]肠道菌群与相关疾病[J]. 曹蕾,吴健. 微生物与感染. 2017(05)
[5]肠道和呼吸道菌群与肺部疾病的研究新进展[J]. 陈益民,沙建平,刘社兰,赵娜. 中国微生态学杂志. 2017(10)
[6]微生物组学与肠道肿瘤[J]. 陈慧敏,房静远. 生命科学. 2017(07)
[7]肠道菌群与代谢疾病关系的研究进展[J]. 许爱梅,张方华,商永芳. 齐鲁医学杂志. 2017(02)
[8]肠道菌群失衡诱发肠易激综合征的机制[J]. 欧枢,贾玉杰. 中国微生态学杂志. 2017(06)
[9]从肠肺微生态研究大肠与肺的相关性[J]. 徐贝贝,王炳元. 中国临床医生杂志. 2016(12)
[10]呼吸道合胞病毒疫苗增强性疾病小鼠模型的建立与评价[J]. 贾然,陆路,梁小珍,孙志武,谭令兵,徐梦华,苏犁云,徐锦. 微生物与感染. 2016(03)
硕士论文
[1]小儿RSV感染临床特点及其证型规律间相关因素的初步探讨[D]. 郑彬茹.山东中医药大学 2016
本文编号：3375699
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/eklw/3375699.html
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