微滴式数字PCR定量分析新生儿的肠道菌群
发布时间：2021-09-29 23:02
目的:研究表明新生儿出生时已携带大量细菌,而分娩方式是影响其早期肠道菌群建立的重要因素。目前多数研究只分析了不同分娩方式对新生儿肠道菌群结构的影响,而对新生儿肠道菌群的定量研究较少,且没有关于产妇生育年龄与新生儿肠道菌群的关联性研究。方法:采集14份新生儿胎便样品,利用微滴式数字PCR技术对胎便中的细菌总数以及核心菌群的肠杆菌科、乳杆菌属、双歧杆菌属、拟杆菌属、梭菌属、普氏菌属、链球菌属、乳球菌属、肠球菌属和大肠杆菌进行定量研究。结果:不同分娩方式对新生儿肠道细菌总数存在显著性差异（P<0.05）,其中自然分娩新生儿肠道中肠杆菌科和乳杆菌属的绝对含量均显著高于剖腹产新生儿（P<0.05）。此外,高龄产妇所生新生儿肠道中链球菌属的绝对含量显著高于适龄产妇所生新生儿（P<0.05）。结论:产妇的分娩方式和生育年龄可能影响母婴菌群的传递。本研究采用的微滴式数字PCR技术具有高灵敏度,可用于新生儿肠道菌群的定量检测。
【文章来源】：中国食品学报. 2020,20(07)北大核心EICSCD
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
不同生育年龄产妇所生新生儿肠道菌群的绝对含量
本研究对14名足月新生儿胎便中的细菌总数进行定量研究，发现所有新生儿胎便中均存在细菌，不同分娩方式新生儿胎便中的细菌总数定量结果如图1所示，自然分娩和剖腹产新生儿每克胎便中的16S rRNA基因拷贝数取对数后分别为：5.49±0.20和5.23±0.14，不同分娩方式新生儿肠道总菌的绝对含量存在显著差异，且自然分娩新生儿肠道总菌的含量显著高于剖腹产新生儿（P<0.05）。2016年，Rocio等[18]利用DAPI染色法对143名不同分娩方式新生儿胎便中的细菌进行计数，结果同样发现自然分娩婴儿胎便中的细菌总数显著高于剖腹产婴儿。Huurre等[19]利用荧光原位杂交技术研究婴儿肠道微生物，结果发现1月龄自然分娩婴儿肠道细菌的细胞总数平均值为9.9×109细胞/g，而剖腹产婴儿肠道细菌的细胞总数平均值仅为3.1×109细胞/g，自然分娩婴儿肠道总菌的数量同样显著高于剖腹产婴儿；此外还发现自然分娩婴儿外周血中的免疫球蛋白IgA、IgG和IgM分泌细胞总数显著低于剖腹产婴儿，而这种抗体分泌细胞总数的差异可能是由于抗原过度暴露于脆弱的肠道中导致。事实上，共生菌与肠上皮组织相互作用形成黏膜屏障，在保护肠道免受损伤方面起主要作用。在正常平衡状态下，共生菌和病原体被特异性toll样受体识别，并且共生菌和病原体在随后的非炎症和炎症免疫反应之间存在差异。如果这种平衡被打破，那么肠上皮细胞可能以更快的速度增殖，使肠道防御屏障容易受到抗原的侵袭，这种抗原早期主要来源于食物和细菌[20]。因此，不同分娩方式可能通过影响婴儿肠道菌群的发育，从而对婴儿免疫功能产生影响。为进一步具体分析是哪种细菌使得不同分娩方式新生儿肠道菌群含量的显著差异，本试验利用染料法对肠道核心菌群肠杆菌科、乳杆菌属、双歧杆菌属、拟杆菌属、梭菌属、普氏菌属、链球菌属、乳球菌属、肠球菌属进行定量研究。此外，鉴于在新生儿期，定殖在肠道中的大肠杆菌是新生儿感染的主要来源，因此本研究还利用探针法对大肠杆菌进行了定量研究。
不同生育年龄产妇所生新生儿胎便中的细菌定量结果如图3所示：适龄产妇和高龄产妇所生新生儿每克胎便中的16S rRNA基因拷贝数取对数后分别为5.40±0.22和5.25±0.15。其它肠道核心菌群的定量结果如下：肠杆菌科为3.40±0.26和3.45±0.22；乳杆菌属为：3.59±0.42和3.40±0.08；双歧杆菌属为：3.74±0.42和3.73±0.38；拟杆菌属为：3.73±0.42和3.73±0.38；梭菌属为：2.93±1.03和3.54±0.93；普氏菌属为：4.09±0.44和4.81±0.73；链球菌属为：2.57±0.89和3.15±0.49；乳球菌属为：3.74±0.25和3.94±0.19；肠球菌属为：1.75±1.40和1.49±2.58；大肠杆菌为：3.17±0.25和3.23±0.32。图3 不同生育年龄产妇所生新生儿肠道菌群的绝对含量
【参考文献】：
期刊论文
[1]妊娠期B族链球菌感染现状及对母儿结局的影响[J]. 杨梦楠,花晓琳,金敏菲,周赟,顾盛奕,牟正骞,沈华祥. 现代妇产科进展. 2019(03)
[2]基于性别二分类的青海天峻藏民肠道菌群差异分析[J]. 谢丹,张沐诗,陈春,乌恩奇,赵焕虎,李树春. 中国微生态学杂志. 2018(12)
[3]不同分娩方式和喂养方式下婴儿肠道菌群的分布特征[J]. 刘誉,秦胜堂,马京梅,宋依临,冯烨,刘飞,杨慧霞. 中华围产医学杂志. 2018 (07)
[4]维持性血液透析终末期肾病患者肠道优势菌群多样性变化研究[J]. 金晓倩. 中国微生态学杂志. 2015(05)
博士论文
[1]初生婴儿肠道菌群与母体各部位菌群相关性研究[D]. 席晓霞.内蒙古农业大学 2017
[2]不同分娩方式婴儿肠道菌群对比分析[D]. 郭贺.中国人民解放军医学院 2014
本文编号：3414637
【文章来源】：中国食品学报. 2020,20(07)北大核心EICSCD
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
不同生育年龄产妇所生新生儿肠道菌群的绝对含量
本研究对14名足月新生儿胎便中的细菌总数进行定量研究，发现所有新生儿胎便中均存在细菌，不同分娩方式新生儿胎便中的细菌总数定量结果如图1所示，自然分娩和剖腹产新生儿每克胎便中的16S rRNA基因拷贝数取对数后分别为：5.49±0.20和5.23±0.14，不同分娩方式新生儿肠道总菌的绝对含量存在显著差异，且自然分娩新生儿肠道总菌的含量显著高于剖腹产新生儿（P<0.05）。2016年，Rocio等[18]利用DAPI染色法对143名不同分娩方式新生儿胎便中的细菌进行计数，结果同样发现自然分娩婴儿胎便中的细菌总数显著高于剖腹产婴儿。Huurre等[19]利用荧光原位杂交技术研究婴儿肠道微生物，结果发现1月龄自然分娩婴儿肠道细菌的细胞总数平均值为9.9×109细胞/g，而剖腹产婴儿肠道细菌的细胞总数平均值仅为3.1×109细胞/g，自然分娩婴儿肠道总菌的数量同样显著高于剖腹产婴儿；此外还发现自然分娩婴儿外周血中的免疫球蛋白IgA、IgG和IgM分泌细胞总数显著低于剖腹产婴儿，而这种抗体分泌细胞总数的差异可能是由于抗原过度暴露于脆弱的肠道中导致。事实上，共生菌与肠上皮组织相互作用形成黏膜屏障，在保护肠道免受损伤方面起主要作用。在正常平衡状态下，共生菌和病原体被特异性toll样受体识别，并且共生菌和病原体在随后的非炎症和炎症免疫反应之间存在差异。如果这种平衡被打破，那么肠上皮细胞可能以更快的速度增殖，使肠道防御屏障容易受到抗原的侵袭，这种抗原早期主要来源于食物和细菌[20]。因此，不同分娩方式可能通过影响婴儿肠道菌群的发育，从而对婴儿免疫功能产生影响。为进一步具体分析是哪种细菌使得不同分娩方式新生儿肠道菌群含量的显著差异，本试验利用染料法对肠道核心菌群肠杆菌科、乳杆菌属、双歧杆菌属、拟杆菌属、梭菌属、普氏菌属、链球菌属、乳球菌属、肠球菌属进行定量研究。此外，鉴于在新生儿期，定殖在肠道中的大肠杆菌是新生儿感染的主要来源，因此本研究还利用探针法对大肠杆菌进行了定量研究。
不同生育年龄产妇所生新生儿胎便中的细菌定量结果如图3所示：适龄产妇和高龄产妇所生新生儿每克胎便中的16S rRNA基因拷贝数取对数后分别为5.40±0.22和5.25±0.15。其它肠道核心菌群的定量结果如下：肠杆菌科为3.40±0.26和3.45±0.22；乳杆菌属为：3.59±0.42和3.40±0.08；双歧杆菌属为：3.74±0.42和3.73±0.38；拟杆菌属为：3.73±0.42和3.73±0.38；梭菌属为：2.93±1.03和3.54±0.93；普氏菌属为：4.09±0.44和4.81±0.73；链球菌属为：2.57±0.89和3.15±0.49；乳球菌属为：3.74±0.25和3.94±0.19；肠球菌属为：1.75±1.40和1.49±2.58；大肠杆菌为：3.17±0.25和3.23±0.32。图3 不同生育年龄产妇所生新生儿肠道菌群的绝对含量
【参考文献】：
期刊论文
[1]妊娠期B族链球菌感染现状及对母儿结局的影响[J]. 杨梦楠,花晓琳,金敏菲,周赟,顾盛奕,牟正骞,沈华祥. 现代妇产科进展. 2019(03)
[2]基于性别二分类的青海天峻藏民肠道菌群差异分析[J]. 谢丹,张沐诗,陈春,乌恩奇,赵焕虎,李树春. 中国微生态学杂志. 2018(12)
[3]不同分娩方式和喂养方式下婴儿肠道菌群的分布特征[J]. 刘誉,秦胜堂,马京梅,宋依临,冯烨,刘飞,杨慧霞. 中华围产医学杂志. 2018 (07)
[4]维持性血液透析终末期肾病患者肠道优势菌群多样性变化研究[J]. 金晓倩. 中国微生态学杂志. 2015(05)
博士论文
[1]初生婴儿肠道菌群与母体各部位菌群相关性研究[D]. 席晓霞.内蒙古农业大学 2017
[2]不同分娩方式婴儿肠道菌群对比分析[D]. 郭贺.中国人民解放军医学院 2014
本文编号：3414637
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