应用Q-PCR及病毒测序分析儿童呼吸道腺病毒感染病毒学及临床特征

发布时间：2021-11-24 21:11

　　研究背景:腺病毒是导致呼吸系统疾病的重要病原之一,在全世界范围内分布广泛。在导致儿童呼吸道感染的病原中,腺病毒至少占5%-10%。在儿童肺炎中,腺病毒肺炎约占4%-10%,新生儿和幼儿感染腺病毒的肺炎发生率达20%以上。腺病毒引起的肺部及全身炎症反应较其他病毒更重,腺病毒肺炎儿童中,14%-60%的腺病毒肺炎患儿出现肺部相关后遗症。迄今为止,已发现90余种腺病毒血清型。文献表明:不同国家或地区、不同时期流行的腺病毒型别存在差异。目前对腺病毒感染也缺乏精准的检测手段,腺病毒型别与疾病严重程度的相关性也不十分明确。目的:（1）建立人腺病毒荧光定量PCR（qPCR）检测方法;（2）分析深圳地区儿童呼吸道疾病中腺病毒感染的发生情况与亚型分布;（3）分析腺病毒感染患儿的病毒学特征与临床特征以及两者的相关性。研究对象和方法:（1）招募因急性呼吸道感染在深圳市第三人民医院就诊的门诊或住院儿童（≤14岁）;（2）建立腺病毒qPCR检测方法,并对患儿样本进行腺病毒检测;（3）对腺病毒阳性的样本,用Hep-2细胞进行病毒分离,对分离的病毒株和未能培养成功的原始样本进行Hexon基因PCR扩增测序,并系统发... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

人腺病毒梯度浓度标准品qPCR扩增曲线

14CPE>90%（图3.3B）。144例阳性样本共计132例成功分离病毒。图3.2人腺病毒qPCR扩增标准曲线AB图3.3正常Hep-2细胞和感染腺病毒后Hep-2细胞（放大倍数40×10）3.3人腺病毒Hexon基因PCR产物鉴定将Hexon基因的PCR产物进行核酸电泳鉴定，以一个电泳图为例，“1-23”为待测样本，“C”为阴性对照，目的条带的大小符合预期，阴性对照没有扩增（图3.4）。144例阳性样本中，共141份成功完成Hexon基因扩增。图3.4Hexon基因（1000bp）琼脂糖凝胶电泳

14CPE>90%（图3.3B）。144例阳性样本共计132例成功分离病毒。图3.2人腺病毒qPCR扩增标准曲线AB图3.3正常Hep-2细胞和感染腺病毒后Hep-2细胞（放大倍数40×10）3.3人腺病毒Hexon基因PCR产物鉴定将Hexon基因的PCR产物进行核酸电泳鉴定，以一个电泳图为例，“1-23”为待测样本，“C”为阴性对照，目的条带的大小符合预期，阴性对照没有扩增（图3.4）。144例阳性样本中，共141份成功完成Hexon基因扩增。图3.4Hexon基因（1000bp）琼脂糖凝胶电泳


本文编号：3516761