拮抗组胺H 2 受体对新生小鼠缺氧缺血性脑白质损伤的保护作用及机制研究
发布时间：2021-12-23 08:38
新生儿缺氧缺血性脑病会导致新生儿终身认知和神经行为功能障碍,脑白质损伤是其重要的病理学特征,但目前尚无有效的治疗手段来促进脑白质区的髓鞘再生、减轻神经损伤。有研究表明组胺H2受体（H2R）在脑白质损伤相关的实验性变应性脑脊髓炎中发挥作用,并且其在胚胎发育后期就开始表达,提示H2R可能参与新生儿缺氧缺血性脑病中的脑白质损伤。本课题将利用药理学、条件性H2R基因敲除小鼠(Hrh2fl/fl)、病毒介导的过表达或干扰表达等手段,探究H2R在新生小鼠缺氧缺血性脑白质损伤中的作用。本课题首先考察H2R拮抗剂对新生小鼠缺氧缺血引起的脑白质损伤、以运动和认知能力的影响,发现H2R拮抗剂对新生小鼠缺氧缺血后的脑白质脱髓鞘没有明显影响,但能促进髓鞘再生,改善小鼠在转棒、新事物识别和莫里斯水迷宫等实验中的运动功能和认知障碍,并且以上作用可以被H2R激动剂所逆转。进一步发现H2R拮抗剂可以显...
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
2R拮抗剂增加了新生小鼠缺氧缺血性脑白质损伤后的轴突髓鞘化比例
浙江大学硕士学位论文3实验结果21在莫里斯水迷宫实验中发现，缺氧缺血性脑白质损伤手术组在水迷宫实验的前期训练探索过程中的潜伏期明显长于假手术组小鼠，给予两种H2R拮抗剂的小鼠其潜伏期明显缩短，与假手术组相比均无显著性差异，而联合给予H2R激动剂amthamine可以逆转这种改善作用（图3C）。在测试期，给予H2R拮抗剂的小鼠穿越目标象限次数与在目标象限内探索的时间百分比均显著高于手术组和联合给予Amth组（图3D、E）。各组小鼠的平均游泳速度相似（图3F），表明小鼠的游泳运动能力并未受影响。综上表明，H2R拮抗剂还可以减轻新生小鼠缺氧缺血性脑白质损伤后的运动协调能力和认知功能的障碍，而这种改善作用可以被H2R激动剂所逆转。图3.H2R拮抗剂缓解了新生小鼠缺氧缺血性脑白质损伤后运动和认知功能障碍。Neonatemiceweresubjectedtounilateralcommoncarotidarteryligationplusinhalationalhypoxia.Afterhypoxiaandischemia(HI),micewereadministratedwithH2Rantagonistscimetidine(Cim,20mg/kg/d)orzolatidine(Zol,10mg/kg/d)ortogetherwithagonistamthamine(Amth,5mg/kg/d).(A)Motorcoordinationevaluatedbylatencytofallfromarotatingcylinderat28dafterHI.(B-F)Cognitivebehaviorwasevaluatedbydiscriminationindexinobjectrecognitiontest(B)andMorriswatermazetest(C-F)from28dto35dafterHI.(C)Latencytoreachtheplatformduringtheacquisitiontrial.(D)Crossingnumberand(E)thepercentofsearchingtimeinthequadrantSW(target
浙江大学硕士学位论文3实验结果22quadrant)intheprobetrial.(F)Averagespeedintheprobetrial.n=8-10miceforeachgroupinbehaviorexperiments.Alldataareexpressedasmeans±SEM.**P<0.01vs.Sham;#P<0.05,##P<0.01vs.HI+Saline;&P<0.05,&&P<0.01vs.HI+Cim.3.3H2R拮抗剂促进缺血缺氧性脑白质损伤后少突胶质细胞的分化白质损伤后，在髓鞘再生的早期阶段，邻近的少突胶质前体细胞OPCs被大量募集增殖，并向损伤区或脱髓鞘部位迁移，进而分化为成熟少突胶质细胞包绕轴突，促进神经功能恢复[37,38]。因此，OPCs的增殖、迁移和分化是髓鞘再生过程中的重要节点。为了进一步研究H2R拮抗剂的作用机制，我们用特异性膜表面硫酸软骨素蛋白NG2标记少突胶质细胞前体细胞（OPCs），O4标记分化阶段的少突胶质细胞，DAPI标记细胞核。结果发现缺血缺氧术后第7天，脑白质胼胝体中NG2标记的OPCs数量较假手术组显著增加，给予H2R拮抗剂后对OPCs数量没有明显改变（图4A、B）。在术后第14天观察O4标记的分化阶段少突胶质细胞（图4C、D），结果发现，缺氧缺血手术后分化阶段少突胶质细胞明显减少，给予H2R拮抗剂能够显著增加分化的少突胶质细胞数量，而该结果可以被H2R激动剂amthamine逆转。以上结果提示H2R拮抗剂可以通过促进少突胶质细胞分化，进而促使髓鞘再生、白质修复。图4.H2R拮抗剂通过调节少突胶质细胞的分化阶段促进髓鞘再生。Neonatemiceweresubjectedtounilateralcommoncarotidarteryligationplusinhalationalhypoxia.Afterhypoxiaandischemia(HI),micewereadministratedwithH2R
【参考文献】：
期刊论文
[1]Histamine Excites Rat GABAergic Ventral Pallidum Neurons via Co-activation of H1 and H2 Receptors[J]. Miao-Jin Ji,Xiao-Yang Zhang,Xiao-Chun Peng,Yang-Xun Zhang,Zi Chen,Lei Yu,Jian-Jun Wang,Jing-Ning Zhu. Neuroscience Bulletin. 2018(06)
[2]Clobenpropit改善大鼠海马局部脑血流的作用（英文）[J]. 陈忠. Acta Pharmacologica Sinica. 2001(04)
本文编号：3548158
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
2R拮抗剂增加了新生小鼠缺氧缺血性脑白质损伤后的轴突髓鞘化比例
浙江大学硕士学位论文3实验结果21在莫里斯水迷宫实验中发现，缺氧缺血性脑白质损伤手术组在水迷宫实验的前期训练探索过程中的潜伏期明显长于假手术组小鼠，给予两种H2R拮抗剂的小鼠其潜伏期明显缩短，与假手术组相比均无显著性差异，而联合给予H2R激动剂amthamine可以逆转这种改善作用（图3C）。在测试期，给予H2R拮抗剂的小鼠穿越目标象限次数与在目标象限内探索的时间百分比均显著高于手术组和联合给予Amth组（图3D、E）。各组小鼠的平均游泳速度相似（图3F），表明小鼠的游泳运动能力并未受影响。综上表明，H2R拮抗剂还可以减轻新生小鼠缺氧缺血性脑白质损伤后的运动协调能力和认知功能的障碍，而这种改善作用可以被H2R激动剂所逆转。图3.H2R拮抗剂缓解了新生小鼠缺氧缺血性脑白质损伤后运动和认知功能障碍。Neonatemiceweresubjectedtounilateralcommoncarotidarteryligationplusinhalationalhypoxia.Afterhypoxiaandischemia(HI),micewereadministratedwithH2Rantagonistscimetidine(Cim,20mg/kg/d)orzolatidine(Zol,10mg/kg/d)ortogetherwithagonistamthamine(Amth,5mg/kg/d).(A)Motorcoordinationevaluatedbylatencytofallfromarotatingcylinderat28dafterHI.(B-F)Cognitivebehaviorwasevaluatedbydiscriminationindexinobjectrecognitiontest(B)andMorriswatermazetest(C-F)from28dto35dafterHI.(C)Latencytoreachtheplatformduringtheacquisitiontrial.(D)Crossingnumberand(E)thepercentofsearchingtimeinthequadrantSW(target
浙江大学硕士学位论文3实验结果22quadrant)intheprobetrial.(F)Averagespeedintheprobetrial.n=8-10miceforeachgroupinbehaviorexperiments.Alldataareexpressedasmeans±SEM.**P<0.01vs.Sham;#P<0.05,##P<0.01vs.HI+Saline;&P<0.05,&&P<0.01vs.HI+Cim.3.3H2R拮抗剂促进缺血缺氧性脑白质损伤后少突胶质细胞的分化白质损伤后，在髓鞘再生的早期阶段，邻近的少突胶质前体细胞OPCs被大量募集增殖，并向损伤区或脱髓鞘部位迁移，进而分化为成熟少突胶质细胞包绕轴突，促进神经功能恢复[37,38]。因此，OPCs的增殖、迁移和分化是髓鞘再生过程中的重要节点。为了进一步研究H2R拮抗剂的作用机制，我们用特异性膜表面硫酸软骨素蛋白NG2标记少突胶质细胞前体细胞（OPCs），O4标记分化阶段的少突胶质细胞，DAPI标记细胞核。结果发现缺血缺氧术后第7天，脑白质胼胝体中NG2标记的OPCs数量较假手术组显著增加，给予H2R拮抗剂后对OPCs数量没有明显改变（图4A、B）。在术后第14天观察O4标记的分化阶段少突胶质细胞（图4C、D），结果发现，缺氧缺血手术后分化阶段少突胶质细胞明显减少，给予H2R拮抗剂能够显著增加分化的少突胶质细胞数量，而该结果可以被H2R激动剂amthamine逆转。以上结果提示H2R拮抗剂可以通过促进少突胶质细胞分化，进而促使髓鞘再生、白质修复。图4.H2R拮抗剂通过调节少突胶质细胞的分化阶段促进髓鞘再生。Neonatemiceweresubjectedtounilateralcommoncarotidarteryligationplusinhalationalhypoxia.Afterhypoxiaandischemia(HI),micewereadministratedwithH2R
【参考文献】：
期刊论文
[1]Histamine Excites Rat GABAergic Ventral Pallidum Neurons via Co-activation of H1 and H2 Receptors[J]. Miao-Jin Ji,Xiao-Yang Zhang,Xiao-Chun Peng,Yang-Xun Zhang,Zi Chen,Lei Yu,Jian-Jun Wang,Jing-Ning Zhu. Neuroscience Bulletin. 2018(06)
[2]Clobenpropit改善大鼠海马局部脑血流的作用（英文）[J]. 陈忠. Acta Pharmacologica Sinica. 2001(04)
本文编号：3548158
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/eklw/3548158.html
