Smad/c-Jun氨基末端激酶与尿道下裂发生相关性和调控机制研究

发布时间：2021-12-24 18:24

　　目的：尿道下裂（hypospadias）是一种常见的泌尿生殖系统畸形，在不同种族，新生儿发病率大约在1/（200～300），并呈逐年上升趋势。目前手术矫治是其唯一的治疗方法，但是，任何一种矫治方式均会伴有显著的并发症以及造成患儿可能的精神心理阴影。为此，本研究拟从尿道下裂患者和尿道下裂动物实验研究两个方面来探讨Smad和JNK信号与尿道下裂发生的相关性和调控机制；为进一步防治尿道下裂奠定科学基础。方法：1．临床研究：收集重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科病房行尿道修复术尿道下裂患儿（32例）术中切除的包皮组织，分为轻中型尿道下裂组（16例），重型尿道下裂组（16例）。同时设立正常对照组：为我院泌尿外科门诊行包皮环切术儿童（32例）术中切除的包皮组织，各组取材均为阴茎远端包皮组织，尿道下裂轻中型组、重型组与正常对照组年龄匹配。分别应用实时定量聚合酶链反应（q-PCR）、免疫组织化学和蛋白质免疫印迹法（western blotting）检测各组包皮组织中Smad和JNK信号的表达水平。2．动物实验研究1).建立尿道下裂动物模型：SD孕鼠40只，完全随机分成4组：大豆油对照组和邻苯二甲酸二（2... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：92 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

Smad7标准曲线建立Fig.1.1.StandardcurveofSmad7

3 例（9.3%），冠状沟和沟下型 6 例（18.8%），阴茎体型 7 例（21.9%）；剩下 16例为重型尿道下裂，包括阴茎根型 11 例（34.4%），阴囊型和会阴型 5 例（15.6%）。2.2 Smad7/3/2 在包皮组织中的表达2.2.1 荧光实时定量 PCR 标准曲线的建立调整反应体系、反应时间和退火温度，建立合格的标准曲线（图 1.1～1.3），建标准曲线时底物 cDNA 模板可以用正常包皮的也可以用尿道下裂包皮组织的。本研究，统一用正常儿童包皮组织 cDNA 建立标准曲线。评价合格的 q-PCR 需要满足：a. PCR扩增效率在90%-110%范围；b. R2（说明两数值之间的相关程度）>0.99，说明两个数值之间相关的可信度很好；c. 溶解曲线呈高耸单峰，说明扩增体系好，无非特异性扩增，引物设计的特异性较好。本研究设计的引物及其相关扩增参数均符合上述条件，均可以作为目的基因 PCR 检测的参数。

q-PCR分析正常儿童包皮和尿道下裂患儿包皮中Smad7，Smad3，Smad2mRNA的表

【参考文献】：
期刊论文
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[2]大鼠孕期染邻苯二甲酸二丁酯对子代神经干细胞增殖分化的影响[J]. 罗芬兰,蔡文琴,张吉强.  第三军医大学学报. 2010(11)
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本文编号：3550973