白血病儿童骨髓基质细胞对白血病细胞的保护作用及细胞粘附分子VLA-4抗体对其保护作用影响的研究

发布时间：2024-03-20 23:36

　　目的:本实验通过研究BMSC对白血病细胞的保护作用,通过检测VLA-4抗体干预后白血病细胞凋亡率的改变,研究VLA-4抗体对BMSC保护作用的影响;通过检测抗凋亡基因Survivin、Bcl-2的表达变化,进一步阐明可能机制,为深入研究儿童白血病及其临床治疗提供理论依据。 方法:一、收集白血病儿童骨髓标本,并进行分离培养,提取BMSC与白血病细胞并用倒置相差显微镜观察细胞形态;实验选第2代的BMSC和第4⁶代的白血病细胞。二、采用荧光染色、流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,研究BMSC对白血病细胞的保护作用及VLA-4抗体对其保护作用影响;三、应用RT-PCR法研究各组白血病细胞Survivin、Bcl-2基因的表达情况,从基因水平来说明BMSC、VLA-4抗体、化疗药物三者之间的关系以及它们对白血病细胞凋亡的影响。 结果:一、体外单独培养原代白血病细胞生存时间较短,生长状态欠佳;在BMSC存在情况下,其生存时间延长,状态比较好。二、BMSC组的凋亡率低于白血病细胞组(P<0.05);抗体组、抗体加药物组白血病细胞凋亡率较BMSC组明显增高(P<0....

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图2-1原代细胞的形态观察a：分离的单个核细胞（200×）；b：分离出的白血病细胞（200×）

图2-1原代细胞的形态观察a：分离的单个核细胞（200×）；b：分离出的白血病细胞（200×）Fig2-1Themorphousofprimarygenerationcellsa:mononuclearcellswerejustbesegregate....

图2-2骨髓基质细胞的形态观察a：原代BMSC（200×）；b：第二代BMSC（200×）

图2-1原代细胞的形态观察a：分离的单个核细胞（200×）；b：分离出的白血病细胞（200×）Fig2-1Themorphousofprimarygenerationcellsa:mononuclearcellswerejustbesegregate....

图2-3BMSC和白血病细胞共培养a：刚分离的白血病细胞；b：共培养2天；c：共培养5天；d：共培养12天

-12-图2-3BMSC和白血病细胞共培养a：刚分离的白血病细胞；b：共培养2天；c：共培养5天；d：共培养12天。（a、b、c：200×，d：400×）Fig2-3Theco-cultureofBMSCandleukemiccellsa:....

图3--I共培养l压各组白血病细胞流式细胞仪结果

组别AnnexinⅤ+/PI-AnnexinⅤ+/PI+AnnexinⅤ+/PI+andAnnexinⅤ+/PI-白血病细胞组10.51±1.98☆7.27±0.78☆17.78±2.17☆BMSC组4.99±1.663.27±1.228.26±1.22上....

本文编号：3933475