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新生期母婴分离致大鼠海马细胞凋亡的信号机制

发布时间:2017-06-27 18:08

  本文关键词:新生期母婴分离致大鼠海马细胞凋亡的信号机制,由笔耕文化传播整理发布。


【摘要】:目的建立新生期母婴分离大鼠模型,观察母婴分离对大鼠海马神经元细胞发育过程中凋亡的影响和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、小窝蛋白-1(Caveolin-1)的表达,初步探讨新生期母婴分离导致大鼠成年后行为发育异常的可能机制。 方法新生Wistar大鼠48只,随机分为分离组(N)和对照组(C),每组24只,N组和C组每组又分为三个亚组,,各8只。N组于出生后第2~21d每天与母鼠分离3小时(8:00~11:00am),C组不做任何处理,生后一直与母鼠同笼。在出生后第7d、14d和21d断头处死大鼠并取其大脑,固定后作冠状面石蜡切片。采用原位末端标记法(TUNEL)检测各组海马区神经元细胞凋亡情况,免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(streptavidin-peroxidase,SP)法检测组织半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和小窝蛋白-1(Caveolin-1)的表达。应用Image-Pro Plus (IPP)6.0图像分析系统对免疫组化图像作半定量分析。 结果⑴以出现棕黄色颗粒作为阳性判断标准, TUNEL阳性凋亡细胞和Caspase-3的表达主要发生在海马锥体细胞;Caveolin-l主要于海马神经胶质细胞。⑵TUNEL法检测凋亡结果:C组与N组海马TUNEL阳性细胞均以7d时最多,C组与N组均随日龄增加TUNEL阳性细胞逐渐减少,同一时间点与对照组比较, N组(凋亡指数Apoptotic intex,AI:7d:22.62±0.68vs18.38±2.26;14d:12.23±0.97vs9.51±1.44;1d:8.14±0.93vs5.60±0.63)明显增多(P0.01),差异具有统计学意义(P0.01)。(3)Caspase-3蛋白在大鼠海马组织中的表达:C组与N组海马Caspase-3蛋白表达均以7d时最多,随日龄增加而逐渐减少;同一时间点与对照组比较(7d:0.29±0.03vs0.24±0.01;14d:0.22±0.01vs0.18±0.02;21d:0.16±0.01vs0.13±0.01)明显增加(P0.01),差异具有统计学意义(P0.01);Caspase-3的表达分布与TUNEL染色基本一致。(4) Caveolin-1蛋白在大鼠海马组织中的表达:对照组与分离组海马Caveolin-1蛋白表达均随日龄增加而逐渐增多,同一时间点与对照组比较(7d:0.13±0.01vs0.12±0.01)无明显减少,差异无统计学意义(P>0.05);(14d:0.19±0.01vs0.22±0.01;21d:0.24±0.01vs0.29±0.01)明显减少,差异具有统计学意义(P0.01)。 结论新生期母婴分离可导致大鼠发育过程中海马神经元细胞凋亡和Caspase-3蛋白表达增多,小窝蛋白(Caveolin-1)表达减少,这可能与生命早期母婴分离导致成年后的行为发育异常有关。
【关键词】:母婴分离 海马神经元 凋亡 半胱氨酸蛋白酶-3 小窝蛋白-1
【学位授予单位】:泸州医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R722.12
【目录】:
  • 摘要5-7
  • Abstract7-9
  • 前言9-11
  • 材料与方法11-17
  • 结果17-21
  • 讨论21-30
  • 结论30-31
  • 附图31-34
  • 参考文献34-42
  • 英文缩写及中英文对照42-43
  • 致谢43-44
  • 攻读硕士学位期间发表和撰写的论文44-45

【参考文献】

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  本文关键词:新生期母婴分离致大鼠海马细胞凋亡的信号机制,由笔耕文化传播整理发布。



本文编号:490725

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