哮喘小鼠血管内皮细胞生长因子和抑瘤素M的表达及布地奈德的干预作用

发布时间：2017-08-08 20:35

  本文关键词：哮喘小鼠血管内皮细胞生长因子和抑瘤素M的表达及布地奈德的干预作用

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【摘要】：目的：探讨哮喘小鼠气道和肺组织中VEGF及OSM的表达；观察VEGF和OSM是否参与了哮喘小鼠气道重塑过程；吸入布地奈德是否会对二者的表达有影响。 方法：选取健康6-8周龄雌性清洁级BALB/C、鼠45只,随机分成3组,每组15只：(1)：空白对照组(CTRL组)：致敏及激发均用生理盐水；(2)哮喘模型组(OVA组)：先予以卵清蛋白和氢氧化铝混悬液腹腔注射致敏,再予以卵清蛋白溶液雾化吸入激发；(3)布地奈德干预组(BUD组)：致敏后每次OVA雾化激发前予以布地奈德雾化吸入。末次激发后24h内取出小鼠肺脏,并予以HE染色、Masson染色观察小鼠气道及肺组织病变情况；用图形分析软件分析各组小鼠气道平滑肌层厚度变化情况,免疫组化及RT-PCR检测VEGF及OSM的蛋白和mRNA表达。 结果：1.肺组织病理学变化：HE染色显示：OVA组与CTRL组及BUD组相比：气道上皮明显增厚,平滑肌细胞增生、肥大,可见上皮细胞坏死、脱落,血管增生,气道及血管周围有较多炎性细胞浸润,肺泡间隔杂乱无章,肺泡壁可见断裂；BUD组上述改变较OVA组轻；CTRL组气道上皮未见增厚,气道周围未见炎性细胞浸润,各级气管及支气管结构完整；三组小鼠肺组织中血管计数及气道平滑肌厚度两两比较均有统计学差异(P0.05)。Masson染色：OVA组气道及血管周围可见较多胶原纤维沉积；BUD组血管及气道周围胶原纤维沉积较OVA组减少,CTRL组无上述改变。 2.免疫组化检测三组小鼠VEGF及OSM的表达：OVA组VEGF蛋白的表达与BUD组、CTRL组比较均增高,且差异有统计学意义(P0.05)；BUD组与CTRL组比较,VEGF蛋白表达增高,其差异有统计学意义(P0.05); OVA组OSM蛋白的表达与BUD组、CTRL组相比较均增高,差异有统计学意义CP0.05), BUD组与CTRL组比较,OSM蛋白表达增高,其差异有统计学意义(P0.05)。 3.RT-PCR检测三组小鼠VEGF及OSM mRNA的表达：OVA组气道及肺组织中VEGF mRNA和OSM mRNA的表达水平均高于CTRL组和BUD组,其差异有统计学意义(P0.05)。 4.相关性分析结果：小鼠气道及肺组织中OSM和VEGF的蛋白表达呈正相关(r=.83,P0.05)。 结论：1.VEGF和OSM在哮喘小鼠的气道和肺组织中表达增高,布地奈德干预可使其表达降低。 2.VEGF和OSM参与哮喘的气道重塑过程,两者呈直线相关。 3.布地奈德干预可以通过减少VEGF和OSM的表达影响哮喘气道重塑。
【关键词】：哮喘 血管内皮细胞生长因子 抑瘤素M 布地奈德
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R725.6
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 目录10-12
• 符号说明12-13
• 1 前言13-15
• 2 材料与方法15-23
• 2.1 实验材料15-16
• 2.1.1 实验动物15
• 2.1.2 主要试剂15-16
• 2.1.3 主要实验仪器和设备16
• 2.2 实验方法16-21
• 2.2.1 实验动物分组16
• 2.2.2 哮喘模型的建立16-17
• 2.2.3 肺组织标本的制备17
• 2.2.4 肺组织脱水、包埋及切片17
• 2.2.5 HE染色观察小鼠肺组织的病理变化17-18
• 2.2.6 Masson染色观察各组小鼠肺组织病理变化18
• 2.2.7 免疫组化检测小鼠气道及肺组织中VEGF、OSM的表达18-19
• 2.2.8 RT-PCR测定小鼠肺组织中VEGF、OSM的表达19-21
• 2.3 统计学分析21-23
• 3 结果23-29
• 3.1 哮喘小鼠模型的建立以及小鼠气道及肺组织病理改变23-24
• 3.1.1 各组小鼠一般情况23
• 3.1.2 小鼠气道及肺组织HE染色、Masson染色23-24
• 3.2 免疫组化检测三组小鼠气道和肺组织VEGF、OSM蛋白的表达24-26
• 3.3 RT-PCR检测三组小鼠气道及肺组织VEGF和OSM的mRNA表达26-27
• 3.4 相关性分析结果27-29
• 4 讨论29-37
• 4.1 小鼠哮喘模型的制备29-30
• 4.2 VEGF与哮喘气道重塑30-32
• 4.2.1 VEGF的结构30
• 4.2.2 在哮喘中的作用机制30-32
• 4.3 OSM与哮喘气道重塑32-35
• 4.3.1 OSM的结构32-33
• 4.3.2 在哮喘中的可能作用33-35
• 4.4 VEGF与OSM在哮喘气道重塑中的作用35
• 4.5 布地奈德对哮喘VEGF及OSM表达的影响35-37
• 5 结论37-39
• 参考文献39-45
• 综述45-55
• 参考文献50-55
• 攻读学位期间主要的研究成果55-56
• 致谢56

【参考文献】

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1 刘鑫;梅全慧;刘希;莫万勇;黄艳;;VEGF、HIF-1α在大鼠慢性哮喘模型中的表达及地塞米松的干预效应[J];重庆医学;2010年22期

2 王s，

本文编号：641949