急性白血病儿童不同化疗阶段NK细胞水平的研究

发布时间：2017-08-29 10:10

  本文关键词：急性白血病儿童不同化疗阶段NK细胞水平的研究

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【摘要】：目的： 采用流式细胞仪检测急性白血病患儿化疗前及不同化疗阶段外周血NK细胞活性及数量,探讨白血病患儿化疗后NK细胞免疫功能重建过程,为NK免疫治疗提供基础资料。 方法： 采用基于CD107a标记流式细胞仪检测NK细胞活性,同时检测NK细胞数量,对16例新发急性白血病患儿及46例完全缓解患儿外周血NK细胞活性及数量进行检测,以15例健康查体儿童作为正常对照组。16例初治急性白血病患儿包括11例急性淋巴细胞白血病(ALL)及5例急性非淋巴细胞白血病(ANLL)。46例完全缓解患儿包括ALL39例和ANLL7例,按照治疗时间分为三组,包括完全缓解第6-9月组(CR-A组)16例,完全缓解第1年-1年半组(CR-B组)14例,完全缓解第2年以上组(CR-C组)16例。分别采集外周血检测NK细胞活性及数量变化。有15例患儿同时应用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞活性,并与流式细胞仪检测法比较,分析两种检测方法的相关性。 结果： 新发白血病患儿的NK细胞数量及活性分别是(3.86±2.14)%,(5.07±2.79)%,正常对照组儿童NK细胞的数量及活性分别是(10.80±2.01)%,(19.27±1.64)%,新发白血病患儿的NK细胞数量及活性明显低于正常对照组(P均0.05)。新发白血病组中,ALL组的NK数量高于ANLL组(P0.05),而其NK活性低于ANLL组(P(?)0.05)。46例完全缓解组患儿NK细胞数量及活性分别是(7.01±2.76)%,(7.11±3.14)%,均高于新发白血病患儿(P均0.05)。新发白血病患儿的NK细胞数量为(3.86±2.14)%,完全缓解组患儿中,CR-A组、CR-B组、CR-C组患儿NK细胞数量分别为(5.97±2.19)%、(6.59±3.11)%、(8.36±2.42)%,CR-A组、CR-B组、CR-C组高于新发白血病组(P均0.05),CR-C组高于新发组、CR-A组、CR-B组(P均0.05),但CR-A组与CR-B组比较,差别无统计学意义(P0.05)。新发白血病患儿的NK细胞活性是(5.07±2.79)%,完全缓解组患儿中,CR-A组、CR-B组、CR-C组患儿NK细胞活性分别为(4.78±1.92)%、(7.11±2.27)%、(9.43±3.13)%,CR-A组与新发白血病组比较,差别无统计学意义(P0.05),CR-B组、CR-C组高于新发白血病组(P均0.05),CR-B组高于CR-A组和新发组(P均0.05)。CR-C组与CR-B组无统计学差异(P0.05),CR-C组的NK细胞数量及活性均低于正常对照组(P均0.05)。CD107a标记流式细胞仪检测法与LDH释放法检测法检测的NK细胞活性相关系数为0.754,两者之间呈正相关。 结论： 1.基于CD107a标记流式细胞仪检测NK细胞活性方法与LDH释放法呈正相关,是一种敏感性好,可靠易行的检测NK细胞活性的方法。2.新发白血病患儿NK细胞数量与活性低于正常对照,随着时间的延长逐渐升高,分别于完全缓解6-9月及完全缓解1年以后升高,但完全缓解2年以后仍低于正常。3.新发ANLL患儿NK细胞数量低于ALL患儿,但其活性高于ALL患儿。
【关键词】：急性白血病 NK细胞活性 CD107a 流式细胞仪 LDH释放法
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R733.71
【目录】：

• 中文摘要2-4
• Abstract4-9
• 引言9-10
• 第一章 材料与方法10-16
• 1.1 材料10-12
• 1.1.1 研究对象10-11
• 1.1.2 试剂材料11
• 1.1.3 实验仪器11-12
• 1.2 实验方法12-15
• 1.2.1 人红白血病K562细胞株的培养12
• 1.2.2 基于CD107a标记外周血NK细胞活性的检测12-13
• 1.2.2.1 标本采集与外周血单个核细胞(PBMCs)提取12-13
• 1.2.2.2 PBMCs与K562细胞共培养13
• 1.2.2.3 流式细胞仪分析NK细胞表面CD107a表达13
• 1.2.3 LDH释放法检测NK细胞活性13-15
• 1.3 结果处理15
• 1.4 统计学处理15-16
• 第二章 结果16-26
• 2.1 K562细胞生长观察16
• 2.2 基于CD107a标记的NK细胞活性检测方法与LDH释放法比较16-17
• 2.3 急性白血病新发组与正常对照组NK细胞数量的比较17-18
• 2.3.1 ALL新发组与ANLL新发组NK细胞数量的比较17-18
• 2.3.2 AL新发组与正常对照组NK细胞数量的比较18
• 2.4 急性白血病新发组与正常对照组NK细胞活性的比较18-19
• 2.4.1 ALL新发组与ANLL新发组NK细胞活性的比较18
• 2.4.2 AL新发组与正常对照组NK细胞活性的比较18-19
• 2.5 不同化疗阶段NK细胞数量的比较19-21
• 2.5.1 白血病初治期与缓解期NK细胞数量的比较19-20
• 2.5.2 白血病不同治疗时期NK细胞数量的比较20-21
• 2.5.3 完全缓解2年以上组与正常对照组NK细胞数量的比较21
• 2.6 不同化疗阶段NK细胞活性的比较21-26
• 2.6.1 白血病新发组与缓解组NK细胞活性的比较22-23
• 2.6.2 白血病不同治疗时期NK细胞活性的比较23-25
• 2.6.3 完全缓解2年以上组与正常对照组NK细胞活性比较25-26
• 第三章 讨论26-29
• 第四章 结论29-30
• 参考文献30-32
• 综述32-46
• 综述参考文献41-46
• 攻读学位期间研究成果46-47
• 致谢47-48

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前9条

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本文编号：752702