Bax抑制肽对缺氧缺血脑损伤新生鼠抑制神经细胞凋亡的作用

发布时间：2017-08-31 01:28

  本文关键词：Bax抑制肽对缺氧缺血脑损伤新生鼠抑制神经细胞凋亡的作用

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【摘要】：目的：通过检测脑组织内凋亡阳性神经细胞数目及caspase-3蛋白量,探讨Bax抑制肽对缺氧缺血脑损伤新生鼠抑制神经细胞凋亡的作用及有效治疗时间窗。 方法：选取日龄Wister新生大鼠182只做为研究对象,随机分为假手术组(n=14)、对照组(n=84)和实验组(n=84)。对照组与实验组通过结扎左侧颈总动脉以及置于8%的氮氧混合气中2小时建立缺氧缺血性脑损伤(hypoxia-ischemic brain damage, HIBD)模型,假手术组仅游离左侧颈总动脉,不结扎不低氧处理。实验组和对照组分别经左侧侧脑室注射5ug Bax-抑制肽(5ul)和生理盐水(5ul)。根据HIBD模型建立后注射Bax抑制肽和生理盐水的时间不同,将实验组和对照组分为Oh、6h、12h.24h、48h、72h六个亚组(n=14)。假手术组不注射任何药物。所有实验动物均于HIBD模型建立后7天处死,进行脑组织病理检测、TUNEL法检测凋亡阳性神经细胞数目、蛋白免疫印迹法检测Caspase-3蛋白含量。 结果：①左侧海马区脑组织HE染色：与假手术组比较,实验组和对照组脑组织病理损伤明显。实验组与对照组在Oh、6h、12h、24h、48h亚组比较,病理损伤程度较轻,在72h亚组比较无明显差异。①TUNEL染色左侧海马区脑组织凋亡阳性神经细胞数目：实验组与对照组在Oh、6h、12h、24h、48h各亚组比较,凋亡阳性神经细胞数目明显减少,差异有统计学意义；在72h亚组比较无统计学差异。实验组的各亚组之间依次比较,HIBD模型后越早注射Bax抑制肽,凋亡阳性神经细胞数目越少,且差异有统计学意义。③蛋白免疫印迹法检测左侧海马区脑组织caspase-3蛋白含量：实验组和对照组在Oh、6h、12h、24h、48h各亚组比较,caspase-3含量明显减少,差异有统计学意义；在72h亚组比较无统计学差异。实验组各亚组之间依次比较,HIBD模型后越早注射Bax抑制肽,脑组织内caspaso-3含量越少,差异有统计学意义。 结论：①新生鼠缺氧缺血脑损伤后海马区脑组织内凋亡阳性神经细胞数目和caspase-3蛋白含量均明显增加；②Bax-抑制肽可明显减少缺氧缺血脑损伤新生鼠脑组织凋亡阳性神经细胞数目和降低caspase-3蛋白含量,可抑制缺氧缺血后脑组织神经细胞凋亡；③缺氧缺血后48小时内是Bax抑制肽治疗缺氧缺血脑损伤的有效治疗时间窗,且越早应用治疗效果越好。
【关键词】：缺氧缺血 脑 Bax抑制肽 抑制凋亡 新生鼠
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R722.1
【目录】：

• 摘要2-4
• Abstract4-7
• 引言7-9
• 第1章 材料与方法9-14
• 1.1 材料9-10
• 1.1.1 实验动物9
• 1.1.2 实验药品和试剂9-10
• 1.1.3 主要实验仪器及设备10
• 1.2. 方法10-14
• 1.2.1 实验动物的分组与处理10-11
• 1.2.2 标本采集11
• 1.2.3 制备脑组织切片11-12
• 1.2.4 HE染色12
• 1.2.5 TUNEL染色12-13
• 1.2.6 Western blot检测13-14
• 第2章 数据采集及处理14-15
• 2.1 数据采集14
• 2.2 统计学处理14-15
• 第3章 结果15-18
• 3.1 新生鼠缺血缺氧性脑损伤(HIBD)模型建立15
• 3.2 脑组织外观15
• 3.3 新生大鼠脑组织HE染色病理改变15
• 3.4 TUNEL染色检测凋亡阳性神经细胞数目15-16
• 3.5 Western blot检测Caspase-3蛋白量16-18
• 第4章 讨论18-22
• 第5章 结论22-23
• 附图表23-26
• 参考文献26-29
• 综述29-39
• 参考文献36-39
• 攻读学位期间成果39-40
• 致谢40-41

【参考文献】

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1 曾娅莉;黄文芳;卢贤瑜;;细胞凋亡时线粒体钙离子信号调节因素研究进展[J];国际检验医学杂志;2006年06期

2 蒋犁,汤云珍,黄晓明,陈平圣,胡向阳;实验性新生儿缺氧缺血脑损伤模型鼠脑细胞凋亡动态变化[J];实用儿科临床杂志;2000年04期

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本文编号：762658