雌激素受体α基因多态性及启动子区甲基化对儿童氟斑牙的影响

发布时间：2017-09-08 23:13

  本文关键词：雌激素受体α基因多态性及启动子区甲基化对儿童氟斑牙的影响

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【摘要】：目的 氟斑牙作为地方性氟中毒的特征性表现之一，对儿童危害深远，研究发现并不是所有氟病区的儿童都罹患氟斑牙，可能存在遗传易感性。本次研究通过分析ERα基因多态性及启动子区甲基化与儿童氟斑牙之间的关系，从遗传学和表观遗传学方面探讨氟斑牙发生机制，为从分子水平探讨氟斑牙发生机制提供基本依据。 研究对象和方法 1.研究对象的选择：分别在河南省开封、通许两地选择高氟村和对照村作为调查点，高氟村平均水氟浓度为2.44mg/L，对照村平均水氟浓度为0.37mg/L；随机抽取所选调查点本地生长的8~12岁儿童作为调查对象，分别为高氟组和对照组，依据氟斑牙检查结果将病区组又分为氟斑牙组和高氟区非患者组。其中氟斑牙组107人、高氟区非患者组100人及对照组78人，共285人。 2.氟斑牙的判定：由公共卫生执业医师和口腔执业医师按照Dean’s分级法判定。 3.血清钙的测定采用火焰原子分光光度计法；尿氟检测采用氟离子选择电极法。 4.雌激素受体α（ERα）基因rs3798577基因型分型采用Taqman探针法，Real-time PCR测定。 5. ERα基因启动子甲基化水平检测采用Real-time PCR测定 6.本次实验数据的录入和分析均采用SPSS12.0统计软件，甲基化率经对数转换之后符合正态分布，尿氟、血钙经对数转换后的甲基化率的分析均应用单因素方差分析和独立样本t检验； ERα rs3798577基因型和等位基因频率在不同组别儿童中的分布差异采用列联表χ2检验，OR值（比值比）和OR值的95%置信区间的计算采用Logistic回归，所有检验都以α＝0.05为检验水准，Hardy-Weinberg平衡状况应用χ2检验判定。 结果 1.在外环境的检测中，水氟浓度在两组中分布差异有统计学意义。高氟组水氟浓度明显高于对照组（t=-4.379, P0.05）。高氟组土壤中耕作层溶解氟和全氟明显高于对照组，差异具有统计学意义（分别P0.05）。其他氟含量指标如空气中氟含量（未检出），粮食中及蔬菜中氟含量，两组之间差异无统计学意义（分别P0.05），水中钙含量，两组之间差异无统计学意义（P0.05）。 2.高氟组儿童尿氟水平明显高于对照组（F=52.117, P0.001），高氟组尿氟超标儿童分布(71.0%)明显高于对照组儿童(11.5%)（P0.05）；血钙水平高氟组明显低于对照组儿童（F=8.503，P0.001）。 3. ERα rs3798577基因型在不同组别，不同性别和不同尿氟水平儿童间分布差异均无统计学意义（分别P0.05）。携带相同基因型不同组别儿童间血清钙水平，高氟组明显低于对照组（分别P0.05）。 4.不同组别、不同性别，不同氟斑牙分度，不同尿氟水平儿童间ERα基因启动子甲基化率差异均无统计学意义（分别P0.05）；随着氟斑牙严重程度的增高，儿童ERα基因启动子甲基化率有逐渐增高的趋势，在控制了尿氟变量之后，ERα基因启动子甲基化率与血清钙之间成负相关（r=-0.162，P=0.034）。 结论 1.研究未观察到儿童氟斑牙与ERα rs3798577基因多态性有关。 2.氟病区儿童血清Ca水平的改变与氟暴露关系更为密切，而与ERα基因rs3798577多态性和该基因启动子区甲基化联系不密切。 3..ERα基因启动子甲基化水平可能影响钙的代谢，从而对儿童氟斑牙产生影响。 4.未发现ERα基因rs3798577多态性与该基因启动子区甲基化交互作用与儿童氟斑牙有关。
【关键词】：雌激素受体 基因多态性 甲基化 氟斑牙 儿童
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R599
【目录】：

• 摘要4-7
• Abstract7-13
• 图表目录13-14
• 1 引言14-18
• 2 研究技术路线18-19
• 3 材料和方法19-30
• 3.1 调查点和调查对象19
• 3.1.1 调查点的确定19
• 3.1.2 调查对象的确定19
• 3.2 人体内外暴露及健康效应指标测定19-22
• 3.2.1 环境及生物样本的采集与保存19-20
• 3.2.2 试剂和仪器20
• 3.2.3 实验室指标检测20-22
• 3.2.4 儿童氟斑牙检查及结果判定22
• 3.3 ERα基因 rs3798577 多态性测定22-24
• 3.3.1 实验主要材料22
• 3.3.2 实验主要仪器22
• 3.3.3 试验方法22-24
• 3.3.4 ERα rs3798577 基因型判断24
• 3.4 ERα 基因启动子甲基化水平检测24-28
• 3.4.1 所需材料24-25
• 3.4.2 主要仪器25
• 3.4.3 引物的设计25-26
• 3.4.4 DNA 甲基化处理26-27
• 3.4.5 DNA 甲基化检测分析27-28
• 3.5 质量控制28
• 3.6 统计学方法28-30
• 4 结果30-39
• 4.1 高氟组与对照组环境样品检测结果的比较30
• 4.2 各组儿童基本情况、尿氟水平及氟斑牙患病情况30-32
• 4.3 儿童氟斑牙与 ERαrs3798577 基因多态性之间的关系32-36
• 4.3.1 ERαrs3798577Hardy-Weinberg 遗传平衡检验32-33
• 4.3.2 ERαrs3798577 基因多态性在不同组别中的分布比较33
• 4.3.3 ERαrs3798577 基因多态性在不同性别儿童中的分布比较33-34
• 4.3.4 ER 基因多态性在尿氟超标儿童中的分布34-35
• 4.3.5 血清 Ca 与 ERαrs3798577 基因多态性的关系35
• 4.3.6 携带相同基因型不同组别儿童间血清 Ca 水平比较35-36
• 4.4 儿童氟斑牙与 ERα 基因甲基化水平之间的关系36-39
• 4.4.1 氟暴露程度、氟斑牙患病程度及性别与 ERα 基因甲基化水平36-37
• 4.4.2 不同基因型 ERα 基因启动子甲基化水平比较37-38
• 4.4.3 氟暴露，， ERα rs3798577 基因多态性与 ERα基因启动子甲基化水平之间的关系38
• 4.4.4 ERα 基因启动子甲基化水平与血 Ca 水平相关分析38-39
• 5 讨论39-43
• 5.1 氟暴露对儿童氟斑牙和血清钙的影响39
• 5.2 儿童氟斑牙与 ERαrs3798577 基因多态性39-41
• 5.3 儿童氟斑牙与 ERα 基因启动子甲基化水平之间的关系41-43
• 6 结论43-44
• 参考文献44-49
• 氟斑牙发生机制和影响因素研究进展49-65
• 参考文献58-65
• 个人简历 在校期间发表的学术论文与研究成果65-66
• 致谢66

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 郭丽英;王强;;过量氟对大鼠切牙成釉细胞和成牙本质细胞中Bag-1表达的影响[J];同济大学学报(医学版);2006年03期

2 王凤华,李广生;食饵低钙对牙齿氟中毒影响的实验研究[J];中国地方病学杂志;1993年06期

3 刘连;徐园园;许洁;黄厚今;;氟对大鼠肝功及GSH-Px基因表达影响[J];中国公共卫生;2010年05期

本文编号：816890