经典Wnt通路在糖皮质激素抑制气道上皮损伤后修复中的作用

发布时间：2017-09-15 19:13

  本文关键词：经典Wnt通路在糖皮质激素抑制气道上皮损伤后修复中的作用

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【摘要】：第一部分：建立0VA诱导的小鼠哮喘模型目的：建立OVA诱导的小鼠哮喘模型。方法：将脱敏饮食喂养3W的BABL/C小鼠随机分为对照组(PBS组)和哮喘组(OVA组),每组12只。哮喘组在第1,14天腹腔注射200μlOVA(卵清蛋白)致敏液致敏,第21-30天1%OVA溶液超声雾化激发。对照组在相同时间,采用同种方法给予同剂量的PBS。通过观察和肺功能检测两组小鼠在不同浓度(0,3.125,6.25,12.5,25,50mg/ml)乙酰甲胆碱(MCH)激发中的表现和气道反应性,HE染色分析肺组织病理改变,肺泡灌洗液(BALF)细胞计数和分类计数等评价哮喘模型是否建立成功。结果：与对照组比较,哮喘组在乙酰甲胆碱(MCH)激发中出现口唇黏膜发紫,扭体,躁动等症状,肺功能显示有明显的气道高反应,并随着MCH浓度的升高,反应不断加重,HE染色显示肺组织明显的病理炎症改变,BALF细胞数量增多和嗜酸粒细胞分类计数升高,两组具有明显统计学差异。结论：成功建立OVA诱导的BABL/C小鼠哮喘模型第二部分：糖皮质激素通过调控Wnt通路抑制气道上皮损伤后修复目的：探讨糖皮质激素抑制哮喘小鼠气道上皮损伤后修复的Wnt通路研究。方法：体内实验将BABL/C小鼠分为4组；PBS组,PBS+DEX组,OVA组,OVA+DEX组。在OVA雾化的28-30天,PBS+DEX组和OVA+DEX组分别经腹腔注射给予5mg/kg地塞米松(DEX),PBS组和OVA组则给予相同剂量的PBS。免疫组化检测显示各组小鼠气道上皮损伤情况,Q-PCR检测肺匀浆中Wnt通路相关分子；Wnt7b、LRP6、CyclinD1以及钙粘素E-cadherinl的表达量。体外实验检测人支气管上皮细胞(16HBE)经糖皮质激素处理后PCR检测上皮细胞中Wnt7b、LRP6、CyclinD1的表达量,进而检测了16HBE的细胞周期。结果：体内糖皮质激素治疗后,OVA+DEX组小鼠气道上皮E-cadherinl表达量下降,上皮组织损伤明显,修复延迟,PCR检测肺组织中Wnt7b、LRP6、CyclinD1表达量升高,与OVA组+PBS组比较有明显统计学差异。体外实验中,16HBE经糖皮质激素处理后, 处理组16HBE细胞周期GdGl增加,G2/M减少,PCR检测Wnt7b、LRP6、CyclinD1表达量升高,与PBS处理组比较有明显统计学差异。结论：体内外实验证实Wnt通路在糖皮质激素抑制哮喘小鼠气道上皮损伤后修复发挥重要作用。
【关键词】：OVA 小鼠 哮喘 哮喘 糖皮质激素 Wnt通路
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R725.6
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-14
• 参考文献13-14
• 第一部分：建立OVA诱导的小鼠哮喘模型14-21
• 1 材料与方法14-17
• 2 结果17-19
• 3 讨论19-20
• 参考文献20-21
• 第二部分：糖皮质激素通过调控Wnt通路抑制气道上皮损伤后修复21-38
• 1 材料与方法21-26
• 2 结果26-35
• 3 讨论35-36
• 参考文献36-38
• 全文总结38-39
• 文献综述39-43
• 参考文献41-43
• 致谢43-44
• 攻读硕士学位期间的研究成果及发表的学位论文44

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本文编号：858370