氢气对氧化损伤肠上皮细胞的保护作用及机制的研究
本文关键词：氢气对氧化损伤肠上皮细胞的保护作用及机制的研究
更多相关文章： 氢气 Nrf2-ARE信号通路 氧化应激反应 抗氧化 新生儿坏死性小肠结肠炎
【摘要】：目的探讨氢气对氧化损伤肠上皮细胞的保护作用及其分子机制,旨为临床上新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)的防治提供可能的治疗靶点。方法以人和大鼠肠上皮细胞Caco-2细胞株与IEC-6细胞株为研究对象,根据是否采用抗霉素A和氢气处理,将上述细胞分为3组:抗霉素A(-)/H2(-);抗霉素A(+)/H2(-);抗霉素A(+)/H2(+),分别为对照组(antimycin A 0μg/ml,H2 0mM)、抗霉素A组(antimycinA 30μg/ml,H2 0mM)及氢气组(antimycinA 30μg/ml,H2 0.6mM)。利用Western Blot、Real-time PCR、流式细胞仪、酶联免疫吸附法实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)等研究方法检测各组以下指标:(1)氧自由基(O2-?、H2O2和?OH)水平;(2)线粒体膜电位;(3)氧化代谢产物丙二醛(MDA)和8-羟基鸟嘌呤(8-OH-G);(4)细胞凋亡率和乳酸脱氢酶(LDH)活性;(5)促炎症因子(IL-6、TNF-α、IL-1β)、抗炎症因子(IL-10)、转录因子核因子-E2相关因子2(Nrf2)及其下游靶基因(HO-1、SOD、Cat、GPx)表达;(6)磷酸化Nrf2蛋白表达。结果与抗霉素A组比较,氢气可以显著降低由抗霉素A诱导的氧化损伤,表现为降低细胞内氧自由基水平(O2-?、H2O2和?OH分别为抗霉素A组的0.236倍、0.456倍和0.124倍),使线粒体膜电位升高,显著降低细胞内氧化代谢产物的含量,而且降低细胞的凋亡率(对照组、抗霉素A组、氢气组细胞凋亡率分别为5.8%、60.1±5.89%、23.7±3.48%)及乳酸脱氢酶(LDH)活性。另外,氢气处理可以降低甲萘醌和Fenton反应诱导的肠上皮细胞的凋亡率及乳酸脱氢酶活性。最后,氢气处理可以增加转录因子Nrf2磷酸化水平,并且氢气组中炎症因子的含量较抗霉素A组显著下降。在抗霉素A组中,Nrf2下游基因HO-1,SOD,Cat,GPx的表达都有所升高,而氢气的处理使转录因子Nrf2下游靶基因表达显著增强。结论氢气能够降低抗霉素A诱导的肠上皮细胞的氧化损伤,表现为降低了细胞内活性自由基含量,修复线粒体膜电位,降低氧化代谢产物,抑制细胞凋亡并降低细胞内乳酸脱氢酶活性。氢气的这一保护作用可能是通过调控Nrf2-ARE信号通路实现的。
【关键词】：氢气 Nrf2-ARE信号通路 氧化应激反应 抗氧化 新生儿坏死性小肠结肠炎
【学位授予单位】：上海交通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R722.1
【目录】：
- 中文摘要6-8
- ABSTRACT8-10
- 全文缩略语中英文对照10-11
- 第一部分 氢气对肠上皮细胞受氧化应激后生成氧化代谢产物的影响以及对细胞凋亡和活性的作用11-28
- 前言11-13
- 实验材料与方法13-17
- 实验结果17-27
- 结论27-28
- 第二部分 氢气对肠上皮细胞内Nrf2-ARE信号通路的调控28-47
- 前言28-30
- 实验材料和方法30-39
- 实验结果39-46
- 结论46-47
- 第三部分 讨论47-50
- 参考文献50-54
- 附录：综述54-64
- 参考文献59-64
- 致谢64-66
- 在学期间发表的学术论文66
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘力,庄志雄,马涧泉;DNA氧化损伤的修复及其与致癌的关系[J];中华劳动卫生职业病杂志;1999年03期
2 杨冬梅,于涛,陶恒沂;细胞外超氧化物歧化酶在有关氧化损伤疾病中的作用[J];中华航海医学与高气压医学杂志;2005年03期
3 农清清;蓝勇波;竹内亨;张志勇;何敏;;不同方法检测微囊藻毒素-LR致DNA氧化损伤[J];中国热带医学;2008年09期
4 葛一蒙;;浅谈几种中药对肝氧化损伤的保护作用[J];黑龙江科技信息;2013年02期
5 黄碧霞;阮迪云;林淑钦;陈树喻;施丽君;;铅致氧化损伤中的锌代谢变化[J];微量元素;1991年01期
6 钟进义,孙丰运,张燕滨;硒对DNA氧化损伤的防护作用研究[J];中国公共卫生;1997年09期
7 宫芸芸;氧化损伤与癌症的发生和预防[J];国外医学(卫生学分册);2000年01期
8 朱茂祥,杨陟华,龚诒芬,陆颖,曹珍山;辐射诱发细胞内活性氧增高与DNA氧化损伤研究[J];辐射研究与辐射工艺学报;2001年04期
9 井军虎;李立宇;;氧化损伤在慢性阻塞性肺疾病中的作用机制研究进展[J];实用心脑肺血管病杂志;2010年12期
10 柳虎军;王晓辉;罗石猛;;线粒体与氧化损伤[J];疾病监测与控制;2013年11期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈芝兰;吕美玲;庄国强;汪海林;;对氧化损伤敏感的细菌传感器的研究[A];中国化学会第27届学术年会第02分会场摘要集[C];2010年
2 李芸;罗云敬;王云海;钟儒刚;;过亚硝酸根对DNA氧化损伤及其抑制作用研究[A];第二届全国环境化学学术报告会论文集[C];2004年
3 孙鲜策;朴丰源;刘爽;;抗坏血酸对染砷小鼠肝脏氧化损伤拮抗作用[A];中国环境诱变剂学会第14届学术交流会议论文集[C];2009年
4 黄琰霞;牛膺筠;吴松兆;宋丽莉;尤怡;魏晓月;王永淑;;人视网膜色素上皮细胞氧化损伤线粒体机制的探讨[A];中华医学会第十二届全国眼科学术大会论文汇编[C];2007年
5 倪文庆;黄越;王宵玲;张竞文;吴库生;;电子垃圾拆解区新生儿多种重金属暴露及其DNA氧化损伤[A];中国毒理学会第六届全国毒理学大会论文摘要[C];2013年
6 陈昊;吴雄飞;;缺氧、氧化损伤后培养人肾小管上皮细胞能量代谢及细胞骨架改变的实验研究[A];“中华医学会肾脏病学分会2004年年会”暨“第二届全国中青年肾脏病学术会议”论文汇编[C];2004年
7 杨捚;洪峰;张爱华;;燃煤氟污染与砷对暴露人群肝功能及氧化损伤交互作用[A];中国毒理学会第六届全国毒理学大会论文摘要[C];2013年
8 霍艳英;段瑞峰;苟巧;胡迎春;李刚;吴德昌;周平坤;;抑癌基因PTEN对细胞内氧化损伤防御体系的影响及机制[A];中国毒理学会第二届全国中青年学者科技论坛会议论文集[C];2007年
9 廖伟棠;刘伟;纪e，
本文编号：902737
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/eklw/902737.html
