预缺血处理介导紧密连接蛋白Claudins对肾脏的保护作用

发布时间：2017-10-07 16:02

  本文关键词：预缺血处理介导紧密连接蛋白Claudins对肾脏的保护作用

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【摘要】：目的探讨急性肾损伤过程中肾脏紧密连接蛋白Claudins的表达和分布变化,并证实预缺血处理对肾脏的保护作用可能与介导Claudins的表达和分布相关。方法1、实验分组:230只C57BL/6小鼠随机分为对照组、假手术组、模型组、假预缺血干预组及预缺血干预组,除对照组外,其余各组再依据再灌注后时间点(0h,3h,6h,12h,24h,48h,3d,5d,7d)各分为9个亚组;2、动物模型:采用夹闭小鼠双侧肾蒂30 min的方法建立缺血再灌注肾损伤模型为模型组;假手术组仅分离暴露小鼠双侧肾蒂,不夹闭;假预缺血干预组仅游离双侧肾蒂但不夹闭,4d后按上述方法建立缺血再灌注肾损伤模型;预缺血干预组首先行双侧肾蒂夹闭15min后再灌注,4d后按上述方法建立缺血再灌注肾损伤模型。3、实验方法:全自动生化检测仪检测各组小鼠血清中的尿素氮及肌酐水平;HE染色观察肾脏病理,肾小管间质病理损伤评分法评估肾组织病理损伤程度。采用RT-PCR及免疫组化方法检测各组小鼠肾组织cldn-2、-10、-17的表达水平。结果1、肾功能变化及肾脏病理评分:血清尿素氮、肌酐水平及肾脏病理评分随再灌注时间推移逐渐上升,至24h达峰值,随后逐渐下降;预缺血干预组的血清尿素、肌酐水平及肾脏病理评分表达趋势同模型组,但均显著低于模型组各相同时点水平(P0.05)。2、肾脏cldn-2的表达变化:模型组cldn-2的蛋白质及m RNA表达水平在再灌注后逐渐下调,6h至24h下降最快,至24h达最低值,约为基线值的2.5倍,随后逐渐回升;预缺血干预组cldn-2亦逐渐下调,6h至24h下降趋势较为平缓,至24小时达最低值,之后逐渐上调,但各时间点cldn-2的蛋白质及m RNA表达水平显著高于模型组同时间点。3、cldn-10的表达变化:模型组cldn-10的蛋白质及m RNA表达水平在再灌注后逐渐下调,至24h表达最低,之后逐渐上调。预缺血干预组cldn-10的蛋白质及m RNA的表达趋势同模型组,但表达水平明显高于模型组同时间点。4、cldn-17的表达变化:模型组cldn-17的蛋白质及m RNA表达水平在再灌注后急剧上调,再灌注后24h达到高峰,然后逐渐下调,预缺血干预组cldn-17的表达水平表达趋势同模型组,但均显著低于模型组时间点。结论cldn-2、cldn-10、cldn-17参与了急性肾损伤的病理进程,同时介导了预缺血保护肾脏的机制。
【关键词】：紧密连接蛋白 预缺血 缺血再灌注 急性肾损伤 小鼠
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R726.9
【目录】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-13
• 引言13-15
• 第一部分 紧密连接蛋白在缺血再灌注肾损伤模型鼠肾脏的表达及意义15-45
• 前言15-16
• 1 材料与方法16-22
• 2 实验结果22-43
• 3 讨论43-44
• 4 结论44-45
• 第二部分 缺血预处理对缺血再灌注肾损伤模型鼠肾组织紧密连接蛋白Claudins的影响45-76
• 前言45-46
• 1 材料与方法46-52
• 2 实验结果52-75
• 3 讨论75
• 4 结论75-76
• 总结论76-77
• 参考文献77-81
• 综述81-86
• 参考文献84-86
• 攻读学位期间主要成果86-87
• 致谢87-88

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本文编号：988752