直肠肛门畸形远端神经节细胞分布及GDNF、GFRa1、RET表达情况研究

发布时间：2017-10-08 08:43

  本文关键词：直肠肛门畸形远端神经节细胞分布及GDNF、GFRa1、RET表达情况研究

  更多相关文章： 肠神经系统 神经节细胞 神经丛 神经营养因子 GDNF GFRα RET

【摘要】：目的： 了解不同类型的直肠肛门畸形(anorectal malformations, ARM)患儿直肠闭锁远端肠壁神经丛、神经节细胞的分布情况以及胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor, GDNF)、胶质细胞源性神经营养因子受体al (GFRα1)、酪氨酸激酶受体(RET)的表达情况,并探讨其临床意义。 方法： 1.选取天津市儿童医院2009年1月至2012年12月间临床诊断为“直肠肛门畸形”病人12例：男8例,女4例；年龄3日至2岁；高位畸形6例,中位畸形2例,低位畸形4例。取直肠盲端及距离盲端3cm处肠壁组织标本,新鲜标本提取RNA逆转录PCR检测神经营养因子的表达情况；石蜡包埋组织切片检测神经节细胞分布情况,免疫组化技术检测神经营养因子在肠壁内的表达情况。 2.HE染色观察神经丛、神经节细胞的分布情况。 3.免疫组化SP法检测GDNF、GFRα1、RET蛋白在低、中、高位ARM直肠盲端及距直肠盲端3cm处肠壁组织中的表达情况。 4. RT-PCR方法半定量分析GDNFmRNA、GFRα1mRNA和RETmRNA在低、中、高位ARM距直肠盲端3cm处肠壁组织中的表达情况。 结果： 1.手术后肛门功能随访结果： 术后随访时间为3个月～4年。高位ARM中2例出现污便,1例出现稀便不能控制,无肛门失禁情况。中、低位ARM中有1例出现直肠黏膜脱出,经坐浴肛门护理好转；1例出现排气时偶有污便,其余7例术后排便功能未见异常。按照中国医科大学修定的肛门功能临床评分标准6分法,评估结果如下：高位ARM组优：50%(3/6),良：50%(3/6)；中低位ARM组优：83%(5/6),良：17%(1/6)。 2.HE染色结果： (1)直肠盲端：高位、中位和低位ARM,均未见神经节细胞存在。 (2)距离直肠盲端3cm处取材的组织中：低位和中位ARM标本中可见正常的神经节细胞,而高位ARM标本中神经节细胞数量明显少,且细胞形态小,肌间神经丛分布稀疏,且细。 3.免疫组化染色结果： 直肠盲端组织中三组标本均未见神经营养因子表达；距离直肠盲端3cm处组织中,观察都有GDNF、GFRα1、RET蛋白的表达,但是表达的量有所不同,中低位ARM标本中GDNF、GFRα1、RET的表达明显高于高位ARM的表达情况。 4. RT-PCR方法半定量检测结果： 距离直肠盲端3cm处肠壁组织中存在GDNFmRNA.GFRα1mRNA和RET mRNA表达；结果均显示低位ARM表达最高,中位ARM表达次之,高位ARM表达最低。 结论： 1.ARM患儿直肠盲端无神经节细胞存在,距盲端3cm处肠壁内神经系统(包括神经丛、神经节细胞)存在发育异常。 2.ARM患儿直肠末端(距盲端3cm处)肠壁内神经系统发育程度与直肠肛门畸形类型密切相关。 3.在不同类型ARM中,GDNF、GFRα1和RET蛋白的表达情况以及GDNFmRNA、GFRα1mRNA和RETmRNA的表达情况均与神经节细胞的分布情况相一致。GDNF、GFRα1和RET基因可能与ARM的发病存在相关性。
【关键词】：肠神经系统 神经节细胞 神经丛 神经营养因子 GDNF GFRα RET
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R726.1
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 缩略语11-12
• 前言12-15
• 研究现状、成果12-14
• 研究目的、方法14-15
• 对象和方法15-25
• 1.1 实验对象及标本制备15-16
• 1.1.1 实验对象15-16
• 1.1.2 标本制备16
• 1.2 方法16-25
• 1.2.1 HE染色16-18
• 1.2.2 免疫组化方法检测各组直肠末端GDNF、GFR α1和RET的表达情况18-21
• 1.2.3 RT-PCR法测定各组距离直肠末端3cm处GDNF、GFR α1和RET基因表达21-25
• 结果25-33
• 2.1 手术后肛门功能随访结果25
• 2.2 HE染色表达情况25
• 2.3 免疫组织化学染色结果25
• 2.4 RT-PCR实验结果25-33
• 讨论33-39
• 结论39-40
• 参考文献40-43
• 发表论文和参加科研情况说明43-44
• 综述44-59
• 综述参考文献53-59
• 致谢59

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 刘于宝;梁长虹;张忠林;黄飚;余元新;谢淑飞;林韩斌;王秋实;郑君惠;;MRI对先天性肛门直肠畸形的诊断价值[J];中国医师杂志;2006年04期

2 王维林;;先天性肛门直肠畸形基础与临床研究[J];继续医学教育;2006年18期

3 朱小春,徐本源,邹音,杨文萍,钟华生,冯亮,陶强;先天性巨结肠RET蛋白免疫组化研究[J];临床小儿外科杂志;2002年01期

4 施诚仁;;重视先天性肛门直肠畸形术后并发症治疗与长期转归问题[J];临床小儿外科杂志;2007年01期

5 黄焱磊;郑珊;;先天性肛门直肠畸形直肠末端PGP9.5和S-100蛋白表达的临床研究[J];临床小儿外科杂志;2008年06期

6 詹江华;罗喜荣;胡博;赵林胜;朱倩仪;;倒“Y”字皮瓣在先天性无肛合并会阴瘘手术中的应用[J];天津医药;2011年12期

7 林琳;姜柳琴;张红杰;胡晔东;林征;黄峻;;慢传输运动小鼠结肠组织中Cajal间质细胞的改变[J];胃肠病学;2006年08期

8 付军;王练英;李正;;先天性肠闭锁病理组织学研究[J];中华小儿外科杂志;1997年02期

9 白玉作,王维林,王慧贞,李正;小儿肛门直肠畸形术后远期生活质量的初步研究[J];中华小儿外科杂志;1999年05期

10 白玉作;先天性肛门直肠畸形遗传学研究进展[J];中华小儿外科杂志;2002年03期

，

本文编号：993095