携抗P-selectin靶向超声造影剂的制备及超声分子成像研究

发布时间：2020-04-05 22:53

【摘要】：第一部分携抗P-selectin靶向超声造影剂的制备及体外寻靶实验研究 目的制备携抗P-selectin靶向超声造影剂，并研究其体外寻靶能力。 方法采用“生物素-亲和素”桥接法制备携抗P-selectin靶向超声造影剂，检测其基本特性。应用不同剂量重组人白介素-4（rhIL-4）和组胺联合刺激人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)表达P-selectin，用免疫荧光检测P-selectin的表达水平并探寻rhIL-4最适刺激剂量。靶向超声造影剂、同型对照超声造影剂和空白超声造影剂分别与经最适剂量rhIL-4和组胺联合刺激的HUVECs及未作处理的HUVECs进行体外寻靶实验。 结果成功制备携抗P-selectin靶向超声造影剂，平均粒径为（2.24±0.71）μm，平均Zeta电位为（-2.75±0.84）mV，浓度为（3.0±0.3）×109个／ml，抗体结合率高达99.80％；免疫荧光检测结果显示rhIL-4和组胺能成功刺激HUVECs表达P-selectin，并探寻出rhIL-4最适刺激剂量；体外寻靶实验显示靶向超声造影剂能较好地粘附在经最适剂量rhIL-4和组胺联合刺激的HUVECs表面，，与其它组比较差异有统计学意义。 结论采用“生物素-亲和素”桥接法成功制备携抗P-selectin靶向超声造影剂，该造影剂在体外能有效地粘附在经rhIL-4和组胺联合刺激的HUVECs表面。 第二部分携抗P-selectin靶向超声造影剂体内超声分子成像研究 目的制备携抗P-selectin靶向超声造影剂，并研究其评价心肌缺血再灌注损伤的超声分子成像效果。 方法采用“生物素-亲和素”桥接法制备携抗P-selectin靶向超声造影剂，建立犬心肌缺血再灌注模型，随机先后（间隔30min）注入携抗P-selectin靶向超声造影剂（MBp）和空白超声造影剂（MBc），注入10min后，行心肌声学造影检查，采图、存盘。应用DFY型超声图像定量分析诊断仪中的彩色编码技术对存储的图像进行脱机处理，观察MBp体内超声分子成像效果。 结果成功制备携抗P-selectin靶向超声造影剂及建立犬心肌缺血再灌注模型；彩色编码图像显示：MBp行心肌声学造影可于缺血再灌注区心肌见显著造影增强，MBc于缺血再灌注区心肌造影无明显增强。 结论应用携抗P-selectin靶向超声造影剂，于体内行心肌声学造影检查能准确检测在灌注治疗后的心肌缺血再灌注损伤。
【图文】：

图 1-1a 空白超声造影剂光镜图(×400) 图 1-1b 靶向超声造影剂光镜图(×400)Fig.1-1a Light microscope image of blank Fig.1-1b Light microscope image ofultrasound contrast agent (×400) targeted ultrasound contrast agent (×400)图1-1c 同型对照超声造影剂光镜图(×400)Fig.1-1c Light microscope image of isotypecontrol ultrasound contrast agent(×400)图1-2a 靶向超声造影剂粒径分 布图：平均粒径为(2.35±0.71)μm Fig.1-2a Diameter distributionof targeted ultrasound contrastagent: the mean diameter was(2.35±0.71) μm 图1-2b 靶向超声造影剂电位分布图：平均表面电位为(-2.75±0102030400.1 1 10 100 1000 10000粒径 (nm)度（％强）

图 1-1a 空白超声造影剂光镜图(×400) 图 1-1b 靶向超声造影剂光镜图(×400)Fig.1-1a Light microscope image of blank Fig.1-1b Light microscope image ofultrasound contrast agent (×400) targeted ultrasound contrast agent (×400)图1-1c 同型对照超声造影剂光镜图(×400)Fig.1-1c Light microscope image of isotypecontrol ultrasound contrast agent(×400)图1-2a 靶向超声造影剂粒径分 布图：平均粒径为(2.35±0.71)μm Fig.1-2a Diameter distributionof targeted ultrasound contrastagent: the mean diameter was(2.35±0.71) μm 图1-2b 靶向超声造影剂电位分布图：平均表面电位为(-2.75±0102030400.1 1 10 100 1000 10000粒径 (nm)度（％强）
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R445.1

【参考文献】

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本文编号：2615633