超声介导下多途径联合治疗兔单侧睾丸不全缺血再灌注损伤的实验研究

发布时间：2020-04-08 08:54

【摘要】：目的：探讨地塞米松、维拉帕米联合持续低流量复灌注治疗兔单侧睾丸不全扭转复位后缺血再灌注损伤的超声表现、保护作用及相关机制。方法：制备脂质微泡造影剂并检测其物理学活性。将30只健康成年大白兔随机分成对照组、地塞米松组（DS组）、维拉帕米组（VP组）、30s持续低流量复灌注（H组）和联合处理组（L组），共五组，每组6只。在超声监控下根据血流减少程度对兔单侧精索行不全结扎，制成单侧睾丸中度不全缺血模型。在复灌注前分别对各组进行不同方式的处理，对照组直接完全复灌注，其他四组分别给予地塞米松、维拉帕米、30s持续低流量复灌注和三种方式的联合处理后再行完全复灌注，再灌注3天后再行超声检查，取下术侧睾丸观察其组织学改变、细胞凋亡情况、丙二醛（MDA）含量改变、超氧化物歧化酶（SOD）活力，黄嘌呤氧化酶（XOD）活力及低氧诱导因子-1α（HIF-1α）蛋白含量。5组兔子均在再灌注前及再灌注3天后进行超声脂质微泡造影，分析各个时间段双侧睾丸造影参数峰值强度（PEAK）、达峰时间（P-T）、平均通过时间(M-T)和曲线下面积（AREA）的变化。结果：脂质微泡造影剂为乳白色浑浊液体，光镜下可见粒径平均1.5~4μm，分布均匀的圆形微泡，室温下保存12h后液体变澄清，镜下观察微泡变大、数量减少。各组再灌注前，术侧睾丸不全扭转的二维灰阶、彩色多普勒超声表现一致；各组术侧睾丸体积比较，再灌注前比术前增大，均有统计学意义（p0.05）。超声造影参数比较，各组术侧睾丸与对侧比，参数PEAK降低，有统计学意义（p0.05），T-P延长，有显著统计学意义（p0.01），M-T延长，有极显著统计学意义（p=0.000），AREA减小，有统计学意义（p0.05），所有参数各组两两比较均无统计学意义（p0.05）；各组超声造影时间-强度曲线显示，术侧睾丸均呈现“慢进慢退”现象。再灌注3天后，术侧睾丸超声表现不同，体积比较，除H组外，均较再灌注前缩小，有统计学意义（p0.05）；超声造影参数比较，各组术侧睾丸与对侧比，对照组T-P和AREA缩短，减小，有统计学意义（p=0.014，0.026），对照组和H组比M-T延长，有统计学意义（p=0.023，0.002），DS组各参数均无统计学差异（p0.05）；所有造影参数各组间两两比较，DS组、VP组和L组参数PEAK较对照组减低，有统计学意义（p0.05），P-T和M-T较对照组延长，有统计学意义（p0.05），DS组和L组的AREA值较对照组减小，有统计学意义（p=0.018,0.000），VP组与DS组比，各参数均无统计学差异（p0.05）；各组超声造影时间-强度曲线显示，对照组和H组术侧睾丸造影时间-强度呈“快进慢退”现象，VP组峰值高，消退较慢，DS组、L组双侧几乎“同进同退”。光镜下Johnsen’s评分，各处理组较对照组评分高，均有显著统计学差异（p0.01），L组较H组评分高，有统计学意义（p=0.025）。Tunel检测凋亡指数AI%，各处理组术侧睾丸组织较对照组减低，均有极显著统计学意义（p=0.000），L组较H组减低，有显著统计学意义（p=0.001）。MDA含量检测，各处理组术侧睾丸组织比对照组降低，均有极显著统计学意义（p=0.000），L组较其他组减低不明显。SOD活力检测，各处理组术侧睾丸组织较对照组增高，有极显著统计学意义（p=0.000），L组较H组增高，有显著统计学差异（p=0.007）。XOD活力检测，VP组和L组较其他组活力降低，均有统计学意义（p0.05），VP组与L组间无统计学差异（p=0.671）。HIF-1α蛋白含量检测，H组和L组较其它组含量增高，有显著统计学意义（p0.001），H组与L组间比较无统计学差异（p=0.603）。结论：①联合彩色多普勒超声和超声脂质微泡造影，能够实时动态地显示睾丸不全扭转及扭转后复位各阶段组织和微循环的改变。②地塞米松、维拉帕米和持续低流量复灌注对睾丸不全扭转复位后IRI治疗效果不同。③多种途径联合治疗IRI效果更好。
【图文】：

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物理学性质测定方法悬浊液静置后不同时间段肉眼观察其外观变镜下观察脂质微泡形态，粒径大小及分布情悬浮液稀释 100 倍后，采用血细胞计数仪检，肉眼观察外观呈乳白色悬浊液（图 1），乳白色的微泡，下层为透明溶液。室温下隔基本消失，仅可见少许泡沫漂浮在透明溶液通光学显微镜下进行观察发现，微泡圆形，m（图 2）。室温下放置 12 小时后再观察发散在的微泡，直径约 1.0-10μm（图 4）。 1:100 比例稀释，血细胞计数仪测定微泡体的浓度为 5.0×108个/mL。

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通光学显微镜下进行观察发现，微泡圆形，m（图 2）。室温下放置 12 小时后再观察发散在的微泡，直径约 1.0-10μm（图 4）。 1:100 比例稀释，血细胞计数仪测定微泡浓体的浓度为 5.0×108个/mL。图 1 脂质微泡肉眼观
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R445.1;R697.22

【参考文献】