脑出血后神经纤维溃变的变化研究及DTI图像应用

发布时间：2020-05-09 16:04

【摘要】： [目的]建立大鼠脑内出血模型,从组织、细胞、行为学、分子角度对脑出血后的神经纤维溃变进行研究;并利用MR-DTI技术,对大鼠脑白质内的神经纤维进行弥散张量纤维重建,探讨脑出血发生后磁共振弥散张量成像对神经纤维溃变的诊断价值。 [材料和方法]1.制作SD大鼠脑出血动物模型:选Sprague-Dawley(SD)成年健康雄性大鼠40只,体重350-400克,随机分成4组,每组10只:即假损伤组,脑出血组,再分为:1d,7d,14d。根据《大鼠脑立体定向图谱》,采用脑立体定向术对大鼠脑尾状核部位注入自体尾动脉血制成大鼠脑内出血的模型。 2.在术后各个时间段用Berderson和Corner Test对大鼠进行神经行为学评分。 3.用LFB(罗克沙尔坚牢蓝)对ICH大鼠进行注血层面的神经轴突染色,进行组织病理学观察。 4.用Western-blot检测ICH大鼠脑干部位NF-M,MAP-2因子的变化规律。 5.使用Philips Achieva MR 3.0T超导型磁共振成像系统,3inch表面线圈,对各个时间段ICH大鼠行冠状、矢状、水平位扫描,层厚1mm,层间隔0mm。图像后处理采用PHILIPS Extended MR Workspace R1.0软件,检测DTI相关定量分析参数FA值和ADC值,并进行注血区神经纤维束三维重建。采用SPSS11.5统计分析软件包进行统计学处理,以P＜0.05为差异具有显著性。 [结果]1.实验组不同时期脑组织病理形态学表现为出血侧脑组织内不规则的圆形或椭圆形的出血区,出血灶边缘脑组织疏松、水肿、变性、坏死。2.神经髓鞘染色可见有神经纤维变性,神经髓鞘发生了形态上的改变,髓鞘肿胀、断裂,形成脂质空泡,变性的神经纤维丧失正常神经纤维染色性质,证实了神经纤维溃变。3.神经系统功能评分显示所有的实验组动物均发生了不同程度的偏瘫。4.NF-M和MAP-2在大鼠术后在第1天、第7天、14天均呈递减变化,NF-M在第7天、第14天和对照组比较有显著性差异(P＜0.05),MAP-2在第1天、第7天、第14天和对照组比较均有显著性差异(P＜0.05)。5.ICH大鼠经MR-DTI分析,FA值呈逐渐下降的变化趋势,1天组和7天组与对照组无明显差异,14天组与对照组有明显差异(P＜0.05)。ADC值1天组和7天组与对照组相比逐渐下降,14天组与对照组相比上升,但无统计学意义。MR-DTI三维纤维束图像能清晰的显示大鼠尾状核内的白质纤维,并可以观察到局灶性出血灶对神经纤维的侵犯程度及病灶与神经纤维之间的相对空间位置。 [结论]1.自体动脉血注入法可建立可靠的实验性ICH动物模型。纹状体脑出血模型操作简单,成活率高,伤情稳定、均一,对肢体运动功能损伤小,较为符合临床。 2.实验性ICH动物有肢体运动障碍等行为学变化,镜下主要组织病理变化包括组织坏死、水肿、,神经纤维和髓鞘损伤。 3.NF-M,MAP-2在ICH模型早期呈递减趋势,其变化规律与神经行为学改变和组织病理学变化相一致,可以反映脑出血后神经纤维的溃变程度。 4.DTI可提供活体研究脑白质出血性损伤细微改变的量化信息,FA值和ADC值可以反映白质神经纤维完整性的溃变程度,DTI神经纤维的三维重建可对出血灶准确定位,可用于观察和评价白质纤维束走行、完整性以及属性状态,DTI为神经网络结构提供可视化、实时、无创的研究平台,可指导脑出血的临床分型、治疗及判断预后。
【图文】：

大鼠,尾动脉,微量注射器,骨膜

在手术过程中不会移位，确保定位点准确，四肢不固定。c.头顶部皮肤消毒后，在双眼正中至耳朵之间做一纵行切口，深达骨膜，长约Zcm，细致剥离骨膜暴露BregIDa点(图1)，参考大鼠脑立体定位图谱〔川进行定位，定位部位为大鼠尾状核。Bregma点右侧中线旁开3lllln，前Ilnln为进针部位。用牙科钻钻一直径约Ilnm的小孔至硬脑膜。将微量注射器置于立体定向仪上，使其针头垂直于颅骨骨面并对准小孔，，取下注射器。d.将大鼠双下肢翻转朝上，暴露尾根部腹侧。消毒后在腹侧根部正中做一长Zcm一3cm的纵向切口，细致分离尾动脉(位于尾静脉背侧)。用盐水冲洗过的微量注射器穿刺尾动脉，抽取尾动脉血60u1(相当于人约40ml)

评分法

无神经功能缺损1前肢出现任何屈曲成分，即对侧腕关节、肘关节屈曲、肩内收屈曲不伴其它不正常2上述体征+向麻痹侧推阻力下降无转圈行为，即侧向推力实验阳性3同2级行为+自发性旋转，自由活动时向瘫痪侧划圈(呈追尾状)2.2.2CornerTest[，3]实验装置为由两块30cmx20cmxIcm的平板构成30。的夹角(图4)。当实验动(小鼠或大鼠)进入夹角(corner)深部，双侧的触须将受到刺激，继而小鼠将站立并身面向夹角的开口端。正常小鼠向左向右转身的几率基本相等，而一侧脑损伤的小则以向脑损伤同侧转身为主。不对称分值=(向出血侧作“站立转身”的次数/总的“立转身”的次数)x10服，正常基线为5服，分值越高，反映损伤越严重。主要用以检大鼠“不对称感觉运动功能障碍”(as卿etriealsensorimotordysfunetion)。
【学位授予单位】：昆明医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R743.34;R445.2

【参考文献】