SPIO标记的C-erbB2反义探针用于活体荷瘤裸鼠磁共振基因成像的研究

发布时间：2020-11-08 14:02

　　 第一部分SPIO标记的c-erbB2反义探针用于活体荷瘤裸鼠MR靶向性的研究 目的 探讨SPIO标记的c-erbB2反义寡脱氧核苷酸探针用于活体荷瘤裸鼠MR的靶向性。 方法 荷瘤裸鼠10只，每只注射SPIO标记的反义探针（12.0mg Fe/Kg）并于不同时间点（注射前、注射后60min、180min、360min、720min）同步行MRI扫描。对比取得的MR图像所测量的各时间点肝、脾、肾肿瘤组织及邻近肌肉组织信号强度变化；每完成一个时间点扫描后，处死荷瘤裸鼠2只，取肝、脾、肾及肿瘤组织，行HE及普鲁士蓝染色，光学显微镜下观察。 结果 成功建立荷瘤裸鼠模型，成瘤率100%。对比反义探针注射后肝、脾、肾、临近肌肉组织与肿瘤组织信号变化曲线，发现肿瘤组织信号变化明显滞后与其余重要代谢脏器，信号变化曲线与其余代谢脏器存在差异性。 结论 SPIO标记的c-erbB2反义寡脱氧核苷酸探针能够靶向作用于肿瘤组织。 第二部分SPIO标记的c-erbB2反义探针用于活体荷瘤裸鼠MR的最佳扫描时间的探讨 目的 探讨SPIO标记的c-erbB2反义寡脱氧核苷酸探针用于活体荷瘤裸鼠MR的最佳扫描时间。 方法 荷瘤裸鼠20只，注射反义探针（12.0mg Fe/kg）并于不同时间点（注射前，注射后60min、180min、360min、720min）同步行MRI扫描。在完成一个时间点扫描后，立即处死荷瘤裸鼠4只，取出肿瘤组织，行HE及普鲁士蓝染色，光学显微镜下观察；测量肿瘤组织及邻近肌肉组织各时间点信号强度。 结果 成功建立荷瘤裸鼠模型，成瘤率100%。对比荷瘤裸鼠在反义探针注射前后的不同时间点扫描的信号强度，发现肿瘤组织在注射后360min信号变化最明显，在MR扫描图像上能清楚显示。HE染色发现肿瘤组织结构紊乱，存在大量异性肿瘤细胞，排列呈“癌巢”状，在各时间点表现相似；而普鲁士蓝染色发现各观察时间点标本的肿瘤组织中均散在分布斑点状蓝色铁颗粒，以注射反义探针后360min分布最密集。 结论 SPIO标记的c-erbB2反义寡脱氧核苷酸探针能靶向于肿瘤组织，用于BALB/c裸鼠MR的最佳扫描时间为注射后360min。 第三部分SPIO标记的c-erbB2反义探针用于活体荷瘤裸鼠MR的最佳扫描浓度的探讨 目的 探讨SPIO标记的c-erbB2反义寡脱氧核苷酸探针用于活体荷瘤裸鼠MR的最佳扫描浓度。 方法 BALB/c荷瘤裸鼠20只，随机分为4组并每组注射不同浓度反义探针（6.0mg、9.0mg、12.0mg、15.0mg Fe/Kg），每组裸鼠于既定的时间点（注射前、注射后360min）同步行MRI扫描。在完成一个时间点扫描后，每组立即处死荷瘤裸鼠2只，取出肿瘤组织，行HE及普鲁士蓝染色，光学显微镜下观察；测量肿瘤组织在注射不同浓度反义探针前后的信号强度变化。 结果 成功建立荷瘤裸鼠模型，成瘤率100%。6.0mg、9.0mg及12.0mg组裸鼠注射探针后均存活，但15.0g组注射探针及扫描完成后存在部分裸鼠死亡；对比荷瘤裸鼠肿瘤组织在不同浓度反义探针注射前后的信号强度变化，发现12.0mg、15.0mg组裸鼠在注射探针后，肿瘤组织信号强度均明显变化并可达到明显肉眼辨识水平，在MR扫描图像上能够清楚显示，各组间信号强度变化差异无显著性。HE染色发现肿瘤组织结构紊乱，存在大量异性肿瘤细胞，排列呈“癌巢”状，在各浓度组表现相似；而普鲁士蓝染色发现各浓度组的肿瘤组织标本中均散在分布斑点状蓝色铁颗粒，12.0mg组、15.0mg组分布均密集明显。 结论 SPIO标记的c-erbB2反义寡脱氧核苷酸探针能靶向于肿瘤组织，用于BALB/c裸鼠MR的最佳扫描时间为注射后360min。
【学位单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2013
【中图分类】：R445.2
【部分图文】：

A：12d after inoculation B：15d after inoculation图 1 荷瘤裸鼠模型Fig 1 The model of Tumor-burdened nude mice图 2 注射反义探针 180min 后荷瘤裸鼠肝、脾 HE 染色×200Fig 2 HE staining of liver and spleen 180min after injection of antisense probe×200

图 2 注射反义探针 180min 后荷瘤裸鼠肝、脾 HE 染色×200Fig 2 HE staining of liver and spleen 180min after injection of antisense probe×200图 3 注射反义探针 180min 后 SK-Br3 荷瘤裸鼠肝（左）、脾（右）普鲁士蓝染色Fig 3 Staining with Prussian blue of liver (left) and spleen (right) 180min after injection ofantisense probe×400

A：12d after inoculation B：15d after inoculation图 1 荷瘤裸鼠模型Fig 1 The model of Tumor-burdened nude mice图 2 注射反义探针 180min 后荷瘤裸鼠肝、脾 HE 染色×200Fig 2 HE staining of liver and spleen 180min after injection of antisense probe×200
【参考文献】

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本文编号：2874882