纳米级脂质超声微泡造影剂在超声显像及介导基因转染中的应用研究

发布时间：2021-08-21 05:39

　　第一部分超声微泡破裂法联合阳离子脂质体介导基因转染的实验研究目的探讨超声微泡破裂法联合阳离子脂质体（cationic liposome，CL）介导绿色荧光蛋白质粒在肝癌细胞（HepG2）基因转染的可行性，并探索最佳转染条件。方法依次采用培养液中是否含有血清和不同的CL浓度、不同超声辐照时间点、不同纳米级脂质微泡造影剂（nano-liposomal bubble, NB）浓度等处理因素进行细胞基因转染。荧光显微镜和流式细胞仪检测基因转染效率，CCK-8法检测细胞活性，以获得优化的转染参数。结果血清能降低CL的细胞毒性，但对基因转染效率无明显影响，CL与质粒DNA质量比为4:1时可以达到相对高效低毒的转染效果，细胞转染率和存活率分别为（17.71±0.79）%和（91.28±0.76）%。CL联合1小时时间点辐照超声可以提高转染率至（24.85±0.78）%（P<0.01），加入10%的NB可进一步提高转染率至（32.47±4.01）%（P<0.05）。结论超声微泡破裂法可以有效增强阳离子脂质体介导的基因转染，联合应用为基因治疗提供了新思路。第二部分纳米级脂质超声微泡造影剂制备... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

不同质量比的CL-DNA复合物的电泳图

荧光显微镜（100×）示不同处理因素下HepG2细胞表达绿色荧光蛋白情况

NBⅡ稀释10倍后的光镜图（A：100×；B：400×）

【参考文献】：
期刊论文
[1]小肝癌与肝硬化再生结节的超声造影定量分析的临床价值[J]. 黄婷,董常峰,罗婷婷,徐伟韬,李汉英,何为芬.  中国超声医学杂志. 2012 (08)
[2]纳米级超声造影剂的研究现状及进展[J]. 潘弟仪,杨莉,侯连兵.  中国药房. 2012(29)
[3]超声造影在肝肿瘤定性及射频消融治疗效果的评价[J]. 何雁,李小晶,张玲,耿丽娜,李蕾,曾金凤.  中国超声医学杂志. 2012 (07)
[4]自制脂质体超声纳米微泡的特性和显影效果[J]. 刘娜香,陈云超,刘晓玲,丁璐,蒋丽萍,张青萍.  中华超声影像学杂志. 2012 (04)
[5]靶向微泡造影剂介导c-myc反义基因治疗移植肝癌的实验研究[J]. 张久维,程文,荆慧,郭文佳,韩雪,汤丽丽.  中国超声医学杂志. 2010 (08)
[6]载竹红菌素脂质微泡的制备及对兔VX2肝肿瘤的显影实验[J]. 刘学兵,王志刚,许川山,康娟,李攀,张勇,冉海涛.  中国医学影像技术. 2008(10)
[7]超声介导微泡造影剂促进HSV-TK基因转染抑制小鼠肝癌移植瘤的实验研究[J]. 聂芳,徐辉雄,吕明德,王瑛,汤庆.  中国超声医学杂志. 2008(05)
[8]超声和微泡造影剂介导细胞基因转染的实验研究[J]. 陈云超,张青萍,朱蔚,张超,Martin JK Blomley.  中华超声影像学杂志. 2006(11)
[9]载紫杉醇脂质微气泡体内外毒性实验研究[J]. 杨春江,王志刚,赖天霞,李攀,彭晓琼,谢昭鹏.  中国超声医学杂志. 2006(07)
[10]超声辐射微泡对小鼠皮下H22肝癌移植瘤血管生成及VEGF表达的影响[J]. 翟光林,姜藻,吴巍.  现代医学. 2006(03)



本文编号：3354986