超声波结合微泡技术联合间充质干细胞重建做功心肌的实验研究

发布时间：2025-01-01 00:50

　　目的： 1.对比小鼠外周血和骨髓来源的间充质干细胞（mesenchymal stemcell,MSCs）的分离培养方法及生物学特性，并探讨重组人粒细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte colony-stimulating factor，rhG-CSF）对外周血MSCs的动员反应。 2．探索建立低强度脉冲超声波（low-intensity pulsed ultrasound，LIPUS）联合SonoVue微泡剂培养孔内直接辐照可能增强5-氮杂胞苷（5-azacytine，5-aza）体外诱导人骨髓间充质干细胞（human bone marrowmesenchymal stem cell，HMSC-BM）的心肌样分化方法，初步摸索适当的超声波辐照条件，为超声靶向击破微泡（ultrasound-targeted microbubbledestruction，UTMD）技术在MSCs移植治疗急性心肌梗死的应用提供基础实验数据。 方法： 1.将15只健康C57BL/6雄性小鼠随机分为如下几组，1组：切脾手术+rhG-CSF皮下连续5天注射；2...

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【学位级别】：硕士

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图1C57BL/6雄性小鼠切脾造模A：箭头1为从腹腔中取出脾脏；B：箭头2、3为结扎脾脏上、下端的血管

川北医学院硕士学位论文轻游离脾脏周围系膜，结扎脾脏上、下尖端血管即脾动脉、输出小静脉，摘除脾脏，剪断连线；⑤腹腔内注射青霉素注射液5万单位，断点法缝合腹膜及外表皮，酒精擦拭伤口；⑦待小鼠麻醉苏醒后放入干净笼里饲养；⑧后期2周内每天定时观察切脾动物的术后的存活、切口愈合、饮....

图2C57BL/6雄性小鼠剪断腹主动脉采血A：箭头所示为腹主动脉

图2C57BL/6雄性小鼠剪断腹主动脉采血A：箭头所示为腹主动脉1.2.2外周血MSCs分离培养①随机选择20只C57BL/6小鼠切脾造模（步骤同上），2周后连续皮下注射5天rhG-CSF350ug/(kg.d)，末次注射6小时内所有切脾造模成功....

图3分离小鼠外周血单个核细胞分层示意图，离心管中由上至下细胞分四层,分别为：血浆层、环状乳白色单个核细胞、透明分离液层及红细胞层

图3分离小鼠外周血单个核细胞分层示意图，离心管中由上至下细胞分四层,分别为：血浆层、环状乳白色单个核细胞、透明分离液层及红细胞层1.2.3骨髓MSCs分离培养①取20只C57BL/6健康小鼠，脊椎脱臼处死，75%酒精或碘伏浸泡1～3min；②将浸泡后小鼠放于手术....

图448小时外周血单个核细胞接种后首次换液（x40，半量换液）

图448小时外周血单个核细胞接种后首次换液（x40，半量换液）

本文编号：4021794